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現(xiàn)代分子生物學(xué)筆記(更新版)

2025-05-16 03:45上一頁面

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【正文】 稱為同工tRNA,同工tRNA既要有不同的反密碼子以識(shí)別該氨基酸的各種同義密碼,又要有某種結(jié)構(gòu)上的共同性,能被AA這種結(jié)構(gòu)是靠氫鍵來維持的,tRNA的三級(jí)結(jié)構(gòu)與AA反密碼子臂是根據(jù)位于套索中央的三聯(lián)反密碼子命名的。它不但為將每個(gè)三聯(lián)子密碼翻譯成氨基酸提供了接合體,還為準(zhǔn)確無誤地將所需氨基酸運(yùn)送到核糖體上提供了載體。反密碼子第一位是A或C時(shí),只能識(shí)別一個(gè)密碼子。 三.密碼子和反密碼子的相互作用 蛋白質(zhì)生物合成過程中,tRNA的反密碼子通過堿基的反向配對(duì)與mRNA的密碼子相互作用。Synthetase)。AGU…3’由第二種讀碼方式產(chǎn)生的密碼子UAG是終止密碼,不編碼任何氨基酸,因此,只產(chǎn)生GUA(Val)或AGU(Ser)。GUA…3’或5’…UAG5’…CUUUUCGUG 實(shí)驗(yàn)3: 以均聚物為模板指導(dǎo)多肽的合成。Zameik等人證實(shí)細(xì)胞中蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所。所謂翻譯是指將mRNA鏈上的核苷酸從一個(gè)特定的起始位點(diǎn)開始,按每3個(gè)核苷酸代表一個(gè)氨基酸的原則,依次合成一條多肽鏈的過程。duplicatedreplication(復(fù)制)in非編碼鏈(anticodingLength)=Coli=RNA QβDNANaCl和5mol/L尿素才能與DNA解離。group ⑵非組蛋白的一般特性 染色體上除了存在大約與DNA等量的組蛋白以外,還存在大量的非組蛋白。這些組蛋白都含有大量的賴氨酸和精氨酸,其中HH4富含精氨酸,H1富含賴氨酸;H2A、H2B介于兩者之間。所準(zhǔn)確復(fù)制,它們一般在DNA復(fù)制完成以后由telomarase合成后加到染色體末端。stabilizeat在酵母中,centromere的功能單位長約130由于堿基的組成不同,在CsCl密度梯度離心中易與其他DNA分開,形成含量較大的主峰及高度重復(fù)序列小峰,后者又稱衛(wèi)星區(qū)帶(峰)。 ⑵中度重復(fù)序列八聚體在中間,DNA分子盤繞在外,而H1則在核小體的外面。 Mutations:(表現(xiàn)型):geneticusuallyhavestructuresintimeasistotal 美國冷泉港卡內(nèi)基遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室科學(xué)家Hershey和他的學(xué)生Chase在1952年從事噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)。具有光滑外表的S型肺炎鏈球菌因?yàn)閹в星v膜多糖而都能使小鼠發(fā)病,而具有粗糙外表的R型因?yàn)闆]有莢膜多糖而失去致病力(莢膜多糖能保護(hù)細(xì)菌免受運(yùn)動(dòng)白細(xì)胞攻擊)。Thisbeeninbasecouldwouldexample,properstages: 1,Itbasegeneration. DNAbacterialcorrespondsrateon例如,某DNA分子的一條多核苷酸鏈有100個(gè)不同的堿基組成,它們的可能排列方式就是4100。DNA不僅具有嚴(yán)格的化學(xué)組成,還具有特殊的高級(jí)結(jié)構(gòu),它主要以有規(guī)則的雙螺旋形式存在,其基本特點(diǎn)是:DNA的組成與結(jié)構(gòu)一個(gè)生物大分子,無論是核酸、蛋白質(zhì)或多糖,在發(fā)揮生物學(xué)功能時(shí),必須具備兩個(gè)前提:首先,它擁有特定的空間結(jié)構(gòu)(三維結(jié)構(gòu));其次,在它發(fā)揮生物學(xué)功能的過程中必定存在著結(jié)構(gòu)和構(gòu)象的變化。 轉(zhuǎn)錄因子是一群能與基因5’端上游特定序列專一結(jié)合,從而保證目的基因以特定的強(qiáng)度在特定的時(shí)間與空間表達(dá)的蛋白質(zhì)分子。keyword=%BF%CB%C2%A1amp。DNA重組技術(shù)還被用來進(jìn)行基礎(chǔ)研究。生物體內(nèi)一切有機(jī)大分子的建成都遵循著各自特定的規(guī)則; 3. 1959年,美國科學(xué)家Uchoa第一次合成了核糖核酸,實(shí)現(xiàn)了將基因內(nèi)的遺傳信息通過RNA翻譯成蛋白質(zhì)的過程。序論 二、現(xiàn)代分子生物學(xué)中的主要里程碑 分子生物學(xué)是研究核酸、蛋白質(zhì)等所有生物大分子的形態(tài)、結(jié)構(gòu)特征及其重要性、規(guī)律性和相互關(guān)系的科學(xué),是人類從分子水平上真正揭開生物世界的奧秘,由被動(dòng)地適應(yīng)自然界轉(zhuǎn)向主動(dòng)地改造和重組自然界的基礎(chǔ)學(xué)科。孟德爾的遺傳學(xué)規(guī)律最先使人們對(duì)性狀遺傳產(chǎn)生了理性認(rèn)識(shí),而Morgan的基因?qū)W說則進(jìn)一步將性狀與基因相耦聯(lián),成為分子遺傳學(xué)的奠基石。 1965年,法國科學(xué)家Jacob和Monod提出并證實(shí)了操縱子(operon)作為調(diào)節(jié)細(xì)菌細(xì)胞代謝的分子機(jī)制。gene或稱mobile20世紀(jì)60年代、70年代和80年代,我國科學(xué)家相繼實(shí)現(xiàn)了人工全合成有生物學(xué)活性的結(jié)晶牛胰島素,解出了三方二鋅豬胰島素的晶體結(jié)構(gòu),采用有機(jī)合成與酶促相結(jié)合的方法完成了酵母丙氨酸轉(zhuǎn)移核糖核酸的人工全合成,在酶學(xué)研究、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)及生物膜結(jié)構(gòu)與功能等方面都有世所矚目的建樹。 生物大分子結(jié)構(gòu)功能結(jié)構(gòu)分子生物學(xué) DNA重組技術(shù)(又稱基因工程) 這是20世紀(jì)70年代初興起的技術(shù)科學(xué),目的是將不同DNA片段(如某個(gè)基因或基因的一部分)按照人們的設(shè)計(jì)定向連接起來,在特定的受體細(xì)胞中與載體同時(shí)復(fù)制并得到表達(dá),產(chǎn)生影響受體細(xì)胞的新的遺傳性狀。NBSP。 因?yàn)榈鞍踪|(zhì)分子參與并控制了細(xì)胞的一切代謝活動(dòng),而決定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和合成時(shí)序的信息都由核酸(主要是脫氧核糖核酸)分子編碼,表現(xiàn)為特定的核苷酸序列,所以基因表達(dá)實(shí)質(zhì)上就是遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯。當(dāng)基因轉(zhuǎn)錄成premRNA后,除了在5’端加帽及3’端加多聚A[polyA]之外,還要將隔開各個(gè)相鄰編碼區(qū)的內(nèi)含子剪去,使外顯子(編碼區(qū))相連后成為成熟mRNA。最常見的研究三維結(jié)構(gòu)及其運(yùn)動(dòng)規(guī)律的手段是X射線衍射的晶體學(xué)(又稱蛋白質(zhì)晶體學(xué)),其次是用二維核磁共振和多維核磁研究液相結(jié)構(gòu),也有人用電鏡三維重組、電子衍射、中子衍射和各種頻譜學(xué)方法研究生物高分子的空間結(jié)構(gòu)。溶解纖維狀物質(zhì)并重復(fù)數(shù)次,可提高其純度。 兩條鏈上的堿基通過氫鍵相結(jié)合,形成堿基對(duì),它的組成有一定的規(guī)律。DNA聚合酶與DNA的合成 Theofseemserrororimproveeitherthetherecongnizingpresyntheticbaseaddedinthea再用活的粗糙型細(xì)菌(R型)來侵染小鼠,也不能使之發(fā)病,因?yàn)榇植谛图?xì)菌天然無致病力。噬菌體侵染細(xì)菌的過程可以分為以下5個(gè)步驟:①噬菌體用尾部的末端(基片、尾絲)吸附在細(xì)菌表面;②噬菌體通過尾軸把DNA全部注入細(xì)菌細(xì)胞內(nèi),噬菌體的蛋白質(zhì)外殼則留在細(xì)胞外面;③噬菌體的DNA一旦進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi),它就能利用細(xì)菌的生命過程合成噬菌體自身的DNA和蛋白質(zhì);④新合成的DNA和蛋白質(zhì)外殼,能組裝成許許多多與親代完全相同的子噬菌體;⑤子代噬菌體由于細(xì)菌的解體而被釋放出來,再去侵染其他細(xì)菌。DNAofthe50%moleculesandmostchromosome 任何一條染色體上都帶有許多基因,一條高等生物的染色體上可能帶有成千上萬個(gè)基因,一個(gè)細(xì)胞中的全部基因序列及其間隔序列統(tǒng)稱為genomes(基因組)。aof染色體的組成但是,109堿基對(duì),其理論長度應(yīng)是180cm,這么長的DNA被包含在46個(gè)51μm長的圓柱體(染色體)中,其壓縮比約為104。及組蛋白基因等都屬這一類。 %是重復(fù)數(shù)千次、長約數(shù)百bp的中等重復(fù)序列。在高等真核細(xì)胞中,centromere都是由長約5-10of酵母Telomeres一般以100Alu與其它高度重復(fù)序列共占人類DNA的10%以上。牛的H4序列與豌豆序列相比只有兩個(gè)氨基酸的差異(豌豆H4中的異亮氨基酸60→纈氨酸60,精氨酸→賴氨酸)。例如,N端的半條鏈上凈電荷為+16,C端只有+3,大部分疏水基團(tuán)都分布在C端。NaCl)溶液抽提、能溶于2%的三氯乙酸、相對(duì)分子質(zhì)量較低的非組蛋白,104以下。原核與真核染色體DNA比較 原核生物中一般只有一條染色體且大都帶有單拷貝基因,只有很少數(shù)基因〔如rRNA基因〕是以多拷貝形式存在;relativelynt Bactariacoli細(xì)菌中常常帶有質(zhì)粒DNA。DNA蛋白質(zhì)合成 基因作為唯一能夠自主復(fù)制、永久存在的單位,其生理學(xué)功能以蛋白質(zhì)形式得到表達(dá)。 Geneticdoubleidentical翻譯時(shí)從起始密碼子AUG開始,沿mRNA5’→3’的方向連續(xù)閱讀直到終止密碼子,生成一條具有特定序列的多肽鏈。 如果注射后幾分鐘內(nèi)即收獲肝臟,那么,放射性標(biāo)記只存在于含有核糖體顆粒的細(xì)胞質(zhì)成份中。 1961年,Nirenberg等以poly(U)作模板時(shí)發(fā)現(xiàn)合成了多聚苯丙氨酸,從而推出UUU代表苯丙氨酸(Phe)。UGU5’…UCUCUUUAG例如,以只含A、C的多聚核苷酸作模板,任意排列時(shí)可出現(xiàn)8種三聯(lián)子,即CCC、CCA、CAC、ACC、CAA、ACA、AAC、AAA,獲得由Asn、His、Pro、Gln、Thr、Lys等6種氨基酸組成的多肽。如果把核糖體與poly(U)和PhetRNAPhe共溫育,核糖體就能同時(shí)與poly(U)和PhetRNAPhe相結(jié)合。 Wobble ③在一個(gè)同工tRNA組內(nèi),所有tRNA均專一于相同的氨基酰不同的tRNA分子可有7495個(gè)核苷酸不等,tRNA分子長度的不同主要是由其中的兩條手臂引起的。 tRNA的L形高級(jí)結(jié)構(gòu)反映了其生物學(xué)功能,因?yàn)樗纤\(yùn)載的氨基酸必須靠近位于核糖體大亞基上的多肽合成位點(diǎn),而它的反密碼子必須與小亞基上的mRNA相配對(duì),所以兩個(gè)不同的功能基團(tuán)最大限度分離。 在蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因中,一個(gè)核苷酸的改變可能使代表某個(gè)氨基酸的密碼子變成終止密碼子(UAG、UGA、UAA),使蛋白質(zhì)合成提前終止,合成無功能的或無意義的多肽,這種突變就稱為無義突變。tRNAfirstaminotoofsite核糖體和它的輔助因子為蛋白質(zhì)合成提供了必要條件。tRNA部位(A位)、結(jié)合或接受肽基tRNA的部位、肽基轉(zhuǎn)移部位(P位)及形成肽鍵的部位(轉(zhuǎn)肽酶中心),此外還有負(fù)責(zé)肽鏈延伸的各種延伸因子的結(jié)合位點(diǎn)。體外反應(yīng)體系中,核糖體的解離或結(jié)合取決于Mg2+離子濃度。ribonucleic約占大腸桿菌干重的35%。Aminocytosol,bearingtheaminoacyltRNA. Elongation.andsignaledandaminoacyltRNA. ②RF1RF3–1和IF3相結(jié)合,誘發(fā)模板mRNA與小亞基結(jié)合。真核細(xì)胞中參與翻譯起始的蛋白質(zhì)因子及其功能 真核因子與mRNA 有延伸因子EFTu, 第三步,移位(translocation)。 嘌呤霉素是AAtRNA的結(jié)構(gòu)類似物,能結(jié)合在核糖體的A位上,抑制AAtRNA的進(jìn)入。 蛋白質(zhì)是生物信息通路上的終產(chǎn)物,一個(gè)活細(xì)胞在任何發(fā)育階段都需要數(shù)千種不同的蛋白質(zhì)。cAMP, 第四,谷氨酰胺提供另一個(gè)N。 ATP能夠把磷酸基團(tuán)加到其它所有核苷單磷酸上生成核苷三磷酸。每個(gè)R1亞基上都有兩個(gè)調(diào)節(jié)位點(diǎn),當(dāng)影響整體酶活性的那個(gè)位點(diǎn)與ATP相結(jié)合時(shí),酶活性增加;而當(dāng)它與dATP結(jié)合時(shí),酶活性消失。 3.synthase)將dUMP轉(zhuǎn)化為dTMP;反應(yīng)中的甲基來自于N5,N10Methylenetetrahydrofolate。oxidase的作用下生成Uric 胸苷合成中的主要抑制劑有fluorouracil(氟脲)、methotrexate(氨甲基葉酸)和aminopterin(氨喋呤)。 1010t,而每年通過硝化細(xì)菌以氣態(tài)氮的形式釋放到大氣中的氮就有2108—5108t。Alanine,Glycine和其它至少6種gln代謝產(chǎn)物都是GS活性的變構(gòu)抑制劑,每個(gè)抑制劑都只有部分抑制作用。Tyrosine降解產(chǎn)物有dopamine(多巴胺),epinephrine(腎上腺素),norepinephrine,統(tǒng)稱為Catecholamines(兒茶酚胺)。Groups) (prostheticpeptide。particle)相結(jié)合,誘發(fā)SRP與GTP相結(jié)合,停止新生肽的進(jìn)一步延伸(此時(shí)新生肽一般長約70個(gè)殘基左右)。 蛋白質(zhì)的核定位是通過多個(gè)蛋白的共同作用來實(shí)現(xiàn)的。replication)和終止位點(diǎn)(terminus)。 Primases,為DNA復(fù)制提供RNA引物。C,全長245Bp,該序列在所有細(xì)菌復(fù)制起始位點(diǎn)中都是保守的。 整個(gè)DNA復(fù)制過程中,只有復(fù)制起始受細(xì)胞周期的嚴(yán)格調(diào)控。DNA子鏈被合成后,母鏈立即被甲基化(稱為hemimethylated)。 前導(dǎo)鏈的合成:由DnaG(primase)在復(fù)制起始位點(diǎn)附近合成一個(gè)1060DNA鏈的終止 當(dāng)子鏈延伸達(dá)到terminusofRepair) 錯(cuò)配修復(fù)對(duì)DNA復(fù)制忠實(shí)性的貢獻(xiàn)力達(dá)102103,DNA子鏈中的錯(cuò)配幾乎完全都被修正,充分反映了母鏈的重要性。細(xì)胞中最常見的Uracilelement)介導(dǎo)的遺傳物質(zhì)重排現(xiàn)象。一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞常帶有少于10個(gè)IS序列。 轉(zhuǎn)座可被分為復(fù)制性和非復(fù)制性兩大類。轉(zhuǎn)座產(chǎn)生新的基因。 1.模板DNA上都有終止轉(zhuǎn)錄的特殊信號(hào)終止子,每個(gè)基因或操縱子都有一個(gè)啟動(dòng)子,一個(gè)終止子。 有人認(rèn)為,在RNA合成起始以后,ρ因子即附著在新生的RNA鏈上,靠ATP水解產(chǎn)生的能量,沿著5’→3’方向朝RNA聚合酶移動(dòng),到達(dá)RNA的3’OH端后取代了暫停在終止位點(diǎn)上的RNA聚合酶,并從模板和酶上釋放RNA,完成轉(zhuǎn)錄過程。寡聚U的存在使雜合鏈的3’端部分出現(xiàn)不穩(wěn)定的rU ActinomycinII內(nèi)含子切除體系 核內(nèi)mRNA原始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的剪輯方式可能是最常見的。 件 1958Ochoa發(fā)現(xiàn)RNA聚合酶和信使RNA,并證明mRNA決定了蛋白質(zhì)分子中的氨基酸序列。C.NBSP。 19751977美國聯(lián)邦最高法院裁定微生物基因工程可以專利化。NBSP。Spradling和G.keyword=%D7%AA%BB%F9%D2%F2amp。NBSP。 1984D. 19941
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