【正文】 以用過(guò)氧化氫或過(guò)氧乙酸。⑹ 減少實(shí)驗(yàn)室內(nèi)利器的使用。安全保障措施個(gè)人防護(hù)⑴ 高標(biāo)準(zhǔn)的個(gè)人保健對(duì)于減少感染的危險(xiǎn)性很重要。國(guó)際上常用性病研究實(shí)驗(yàn)室（UDRL）的玻片試驗(yàn)法；該法是一種簡(jiǎn)單的玻片沉淀試驗(yàn)，試劑及對(duì)照已標(biāo)準(zhǔn)化?？梢葬槍?duì)其弱點(diǎn)將梅毒螺旋體消滅。在其前端有46根鞭毛樣細(xì)纖維束，其末端呈卷曲狀。流感病毒易發(fā)生基因重配，易形成新的亞型，但型間無(wú)交叉免疫。1．實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ?． 1 流感病毒的分離培養(yǎng)流感病毒大量存在于病人痰液、咽拭子和病禽尸解臟器中。對(duì)紫外線和化學(xué)有毒劑敏感。而禽流感發(fā)病率和病死率高，季節(jié)性不強(qiáng)，來(lái)源常不明。 2. 直接用火焰對(duì)未經(jīng)任何處理的污染地面、操作臺(tái)、器械等進(jìn)行燒灼處理。有害氣體、氣溶膠、污水、廢液應(yīng)經(jīng)適當(dāng)?shù)臒o(wú)害化處理后排放，應(yīng)符合國(guó)家相關(guān)的要求。二、實(shí)驗(yàn)室污物處理及消毒 (一) 實(shí)驗(yàn)室含有生物危險(xiǎn)物的臨床標(biāo)本及被污染的一次性用品，試驗(yàn)完成后，應(yīng)在操作臺(tái)或?qū)嶒?yàn)區(qū)域內(nèi)以紫外燈近距離照射消毒 2小時(shí)以上，再經(jīng)高壓消毒后方可丟棄或焚燒。還應(yīng)穿戴其它的個(gè)人防護(hù)裝備，如手套、防護(hù)鏡、面具、頭部面部保護(hù)罩等。 (十一)實(shí)驗(yàn)中發(fā)生意外污染情況，應(yīng)立即通知主管人員并做好處理污染物和相應(yīng)區(qū)域的準(zhǔn)備，不得擅自采用其它禁止的方法進(jìn)行消毒處理。 (三) 普通實(shí)驗(yàn)室應(yīng)注意氣流方向，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中盡量避免強(qiáng)氣流變化而產(chǎn)生氣溶膠（如﹕涂片、染色過(guò)程中）。 (五) 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中絕對(duì)禁止吸煙、飲食等，不要以手撫頭面部等。3. 培訓(xùn)考核上崗，掌握相關(guān)技術(shù)操作要領(lǐng)，熟悉規(guī)章制度，適應(yīng)工作環(huán)境。3. 研磨：最好使用組織研磨器，乳缽易產(chǎn)生氣溶膠?；魜y患者雖然對(duì)新感染的保護(hù)免疫可達(dá)數(shù)年，但對(duì)霍亂毒素和細(xì)菌的腸抗體僅維持一致數(shù)月。輕型病人易被忽略，健康帶菌者不易檢出，兩者皆為危險(xiǎn)傳染源。治療不及時(shí)常易死亡，屬甲類傳染病。 (二) 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，如污染物濺落到身體表面，或有割傷、刺傷、燒傷、燙傷等情況發(fā)生，應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)工作進(jìn)行緊急處理，更換被污染的實(shí)驗(yàn)服，皮膚表面用消毒液清洗，傷口以碘酒或酒精消毒，眼睛用無(wú)菌生理鹽水沖洗。不允許積存垃圾和實(shí)驗(yàn)室廢棄物。應(yīng)用皮制或合成材料的不滲液體的鞋類。對(duì)于有特殊風(fēng)險(xiǎn)的人員，要求閱讀并在工作及程序上遵照?qǐng)?zhí)行。 (七) 使用注射器加樣時(shí)，用過(guò)的針頭切勿再重新入套或拔開注射器與針頭，應(yīng)直接放入銳器收集器，以免劃破皮膚造成接種感染。(九) 實(shí)驗(yàn)室中的生物危險(xiǎn)品要根據(jù)檢查項(xiàng)目和性質(zhì)不同，局限在相應(yīng)的試驗(yàn)區(qū)間，不得隨意將其帶到其它的實(shí)驗(yàn)室。 (二) 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格限制非實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入，減少實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外交叉生物污染。 培養(yǎng)管或培養(yǎng)瓶中含有培養(yǎng)物的滴落物。 被污染的操作臺(tái)、器械、儀器、試劑等。2. 入口處應(yīng)有危險(xiǎn)警示標(biāo)識(shí)，并標(biāo)明所操作的微生物的種類。2. 混勻：吸管吸吹菌液時(shí)不要產(chǎn)生氣泡，應(yīng)沿容器壁排出。傳染源主要是排菌的肺結(jié)核患者（尤其是痰涂片陽(yáng)性未經(jīng)治療者）。5．3 消毒方法5．3．1 廢棄物缸：10%（V/V）次氯酸鈉（含10，000ppm有效氯）。檢驗(yàn)科質(zhì)量管理體系文件5．1．4 離開實(shí)驗(yàn)室前必須脫去隔離衣并洗手。4．3 HIV病毒培養(yǎng)：培養(yǎng)物中含大量的HIV，對(duì)于實(shí)驗(yàn)人員具有相當(dāng)高的傳染危險(xiǎn)性。2．2 傳播途徑：世界公認(rèn)的傳播途徑有三種，即性傳播、血液傳播及母嬰傳播。HIV既有嗜淋巴細(xì)胞性又有嗜神經(jīng)性，主要感染CD4+T淋巴細(xì)胞，也能感染單核巨噬細(xì)胞，B細(xì)胞和小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、骨髓干細(xì)胞等。學(xué)士學(xué)位3名，3名曾經(jīng)從事微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，3名曾經(jīng)從事無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)經(jīng)歷，5名技術(shù)人員學(xué)習(xí)過(guò)生物安全手冊(cè)并通過(guò)定期培訓(xùn)及考核成績(jī)合格，經(jīng)體檢無(wú)現(xiàn)患嚴(yán)重疾病，本實(shí)驗(yàn)室除HBV攜帶者1名無(wú)其他患傳染性疾病的技術(shù)人員，健康狀態(tài)良好。（4）可能產(chǎn)生致病性微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作如涂片、接種時(shí)，應(yīng)在生物安全柜內(nèi)操作，并使用個(gè)體防護(hù)設(shè)備。（4）廢棄的標(biāo)本連同試管、蓋帽要用1000mg /L“84”消毒液浸泡，由工人統(tǒng)一清潔后進(jìn)行無(wú)害化處理。17. 標(biāo)本(血清、血漿、全血、尿)上檢驗(yàn)分析儀檢測(cè)過(guò)程的危害評(píng)估及防護(hù)感染途徑危害評(píng)估感染途徑危害評(píng)估感染途徑危害評(píng)估皮膚極少粘膜（眼結(jié)膜）可能呼吸道可能消化道（經(jīng)手口）極少經(jīng)血（針刺傷、切割傷）極少經(jīng)血（蟲媒介）極少盜竊可能化學(xué)腐蝕無(wú)放射無(wú)（1）為了避免液滴和氣溶膠和擴(kuò)散，實(shí)驗(yàn)室儀器加樣、加液，清洗等過(guò)程應(yīng)在封閉罩內(nèi)進(jìn)行的。（2）工人每天早晨更換消毒液，包括浸泡銳器、止血帶的消毒液和手消毒液。（6）在不影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的前提下，應(yīng)盡量減少使用玻璃器具。（12）出口通路：實(shí)驗(yàn)室的出口和通道必須保持暢通無(wú)阻，不準(zhǔn)堆放物品、垃圾、裝置、或設(shè)備。（6）為便于清潔消毒，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不應(yīng)有織物裝飾的用具或椅子。實(shí)驗(yàn)臺(tái)至少應(yīng)每天清潔、消毒一次，如有必要可以多次清洗、消毒。一次性注射器上的針頭用后不要取下。7. 實(shí)驗(yàn)中頭發(fā)和飾物的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及防護(hù)留長(zhǎng)發(fā)的工作人員應(yīng)將頭發(fā)盤在腦后，以防止頭發(fā)接觸到被污染物和避免人體脫屑落入工作區(qū)。5. 實(shí)驗(yàn)中服裝和個(gè)人防護(hù)裝備的一般要求（1）應(yīng)穿著符合實(shí)驗(yàn)室工作需要的服裝，工作服應(yīng)干凈、整潔。評(píng)估我檢驗(yàn)科生物安全防護(hù)水平按二級(jí)實(shí)驗(yàn)室（BSL2）生物安全要求。根據(jù)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》，本檢驗(yàn)科不涉及《人間傳染的病原微生物名錄》中高致病性微生物的分離培養(yǎng)及高致病性微生物的菌、毒種的保藏，實(shí)驗(yàn)室采用一定防護(hù)措施就能控制感染或防范災(zāi)害，或者對(duì)相應(yīng)病原體存在有效的免疫方法。（3）使用、處理能夠通過(guò)粘膜和皮膚感染的試劑，或有可能發(fā)生試劑濺溢的情況時(shí)，必須佩帶護(hù)目鏡、面罩或面具式呼吸器。帆布鞋可吸收化學(xué)物品和有傳染性的液體，所以最好穿皮革或其它防滲漏的合成材料的鞋。使用后的針具不要折斷、彎曲、破損、重復(fù)使用或用手重裝在針管上?！扒鍧崱焙汀胺乔鍧崱眳^(qū)都應(yīng)保持整潔。（5）裝飾：不得在電燈、燈座或儀器上進(jìn)行裝飾，更不要使用電子裝飾物、蠟燭、圣誕樹等有引起火災(zāi)危險(xiǎn)的裝飾品。較大的廢棄物容器應(yīng)靠近地面存放。（5）高熱操作玻璃器具時(shí)應(yīng)戴隔熱手套。檢驗(yàn)科質(zhì)量管理體系文件16．采集血樣的危害評(píng)估及防護(hù)感染途徑危害評(píng)估感染途徑危害評(píng)估感染途徑危害評(píng)估皮膚極少粘膜（眼結(jié)膜）極少呼吸道可能消化道（經(jīng)手口）極少經(jīng)血（針刺傷、切割傷）可能經(jīng)血（蟲媒介）極少盜竊可能化學(xué)腐蝕極少放射無(wú)（1）每天早晨用500mg/L的”84”消毒液擦拭抽血臺(tái)面及其它物表，并開紫外燈消毒至少30分鐘，并做好記錄。（7）工作人員需對(duì)銳器如采血針采取高度預(yù)防措施，用過(guò)的采血針需浸泡在含有消毒液的厚壁容器中。（3）實(shí)驗(yàn)中使用的竹簽用后要用1000mg/L“84”消毒液浸泡。（3）操作中使用的接種環(huán)、鑷子等金屬物品要在酒精燈火焰上燒灼滅菌。三、特定實(shí)驗(yàn)活動(dòng)危害評(píng)估（見以下章節(jié)之各種病原體的危害評(píng)估） 工作人員素質(zhì) 本實(shí)驗(yàn)室共有技術(shù)人員20名，其中申請(qǐng)進(jìn)入BSL2實(shí)驗(yàn)室20名。但多數(shù)AIDS乃由HIV1型引起。病毒主要存在于血液、精液、子宮和陰道分泌物中；乳汁、唾液、淚水等均能檢出病毒。4．2 HIV核酸檢測(cè)：樣品有全血、血漿、組織和其他分泌物，有時(shí)還包括生物制品，此類標(biāo)本具有潛在危險(xiǎn)性，對(duì)于HIV感染者或艾滋病病人的樣品，實(shí)驗(yàn)危險(xiǎn)性較高。如果接觸物傳染危險(xiǎn)性大，則應(yīng)戴雙層手套和防護(hù)眼鏡。5．2．3 污染或可能造成污染的材料在帶出實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)進(jìn)行消毒。傳播途徑呼吸道感染（respirator tract infection）是肺結(jié)核的主要傳染途徑（routes of infection），飛沬傳染（droplet infection）為最常見的方式。1. 接種：應(yīng)使用無(wú)彈力的鉑絲接種環(huán)，結(jié)核菌接種后接種環(huán)火焰滅菌易崩散，酒精燈燒灼時(shí)要特別注意。（二）技術(shù)保障1. 雙人原則，不允許單人操作2類病原。(一) 分枝桿菌存在的地點(diǎn) 各種臨床標(biāo)本，通常是痰，胃或支氣管灌洗液、腦脊液、尿液等。 使用移液器混合培養(yǎng)物。實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員必須經(jīng)過(guò)生物安全培訓(xùn)后方可上崗。 (八) 每次試驗(yàn)結(jié)束后，必須清理好實(shí)驗(yàn)臺(tái)，并用70%酒精液或35%石炭酸擦洗實(shí)驗(yàn)臺(tái)面。 (六) 稀釋菌液時(shí)，吸管、針管要緩慢插入試管或燒瓶底部，小心操作避免產(chǎn)生氣泡或氣溶膠。 (十四)實(shí)驗(yàn)室主任為實(shí)驗(yàn)室人員特別制定的標(biāo)準(zhǔn)操作程序或生物安全手冊(cè)中，應(yīng)包括生物安全程序。(十八) 實(shí)驗(yàn)用鞋應(yīng)舒適，鞋底防滑。 (四) 培養(yǎng)物或?qū)嶒?yàn)室垃圾，在丟棄前必須經(jīng)高壓消毒和紫外燈近距離長(zhǎng)時(shí)間照射處理。 意外事故的處理 (一) 如果發(fā)生意外，必須立即通知實(shí)驗(yàn)室主管人員，并在有關(guān)人員的指導(dǎo)監(jiān)督下對(duì)出事現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行處理，絕對(duì)禁止未經(jīng)報(bào)告而私自對(duì)出事現(xiàn)場(chǎng)給予非規(guī)范的處理。檢驗(yàn)科質(zhì)量管理體系文件第四章 霍亂弧菌的生物危害評(píng)估報(bào)告霍亂(cholera)是由霍亂弧菌所致的烈性腸道傳染病，臨床表現(xiàn)輕重不一，典型病例病情嚴(yán)重，有劇烈吐瀉、脫水、微循環(huán)衰竭、代謝性酸中毒和急性腎功能衰竭等。典型病人的吐瀉物含菌量甚多，每ml糞便可含107～109弧菌，這對(duì)疾病傳播起重要作用。古典霍亂弧菌初次感染的免疫力能(100%保護(hù)力)較埃爾托弧菌者(90%保護(hù)力)為強(qiáng)。2. 混勻：吸管吸吹菌液時(shí)不要產(chǎn)生氣泡，應(yīng)沿容器壁排出。2. 入口處應(yīng)有危險(xiǎn)警示標(biāo)識(shí)，并標(biāo)明所操作的微生物的種類。 (四) 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，工作人員應(yīng)穿著工作服，操作時(shí)應(yīng)穿戴防護(hù)隔離衣、口罩、帽子和手套，長(zhǎng)發(fā)者應(yīng)將頭發(fā)裝束在帽子內(nèi)。 (二) 實(shí)驗(yàn)室采集病人標(biāo)本時(shí)要格外注意。 (十) 試驗(yàn)結(jié)束后，操作過(guò)程中所有可能與生物危險(xiǎn)物接觸或被污染的試驗(yàn)器械和物品，能夠高壓消毒的必須高壓消毒，不能進(jìn)行高壓消毒的設(shè)備、儀器，應(yīng)使用有效的消毒劑擦洗后再以紫外燈近距離長(zhǎng)時(shí)間消毒。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)確保具備足夠的有適當(dāng)防護(hù)水平的清潔防護(hù)服供使用?！緦?shí)驗(yàn)室廢物處理 】一、實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理的目的： (一) 將操作、收集、運(yùn)輸、處理及處置廢棄物的危險(xiǎn)減至最??； (二) 將實(shí)驗(yàn)室廢棄物對(duì)環(huán)境的有害作用減至最小。 (五) 實(shí)驗(yàn)室廢棄物應(yīng)置于適當(dāng)?shù)拿芊馇曳缆┤萜髦邪踩\(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。(五) 絕對(duì)禁止使用的事故處理方法﹕ 1. 任何有可能造成污染面積擴(kuò)大的去污方法，如使用70%乙醇或甲酚皂液擦洗被污染的區(qū)域。在人群中，它的發(fā)病率高，病死率低，多發(fā)于青少年，恢復(fù)快，具有一定季節(jié)性。 流感病毒在外界的抵抗力弱，在56℃30分鐘條件下易被滅活，在室溫下傳染性很快喪失，100℃1分鐘即被滅活，但在0～4℃能存活數(shù)周，在 20℃真空干燥條件下可長(zhǎng)期保存。用抗菌素防止細(xì)菌繼發(fā)感染產(chǎn)生的并發(fā)癥。特別是一些甲性流感毒株（H5N1，H9N2）通過(guò)何種途徑傳染人至今不清楚，因此采集標(biāo)本時(shí)，須做好一定的個(gè)人防護(hù)。梅毒螺旋體（如圖）是小而纖細(xì)的螺旋狀微生物，長(zhǎng)度為520nm，平均約810um，有6—12個(gè)螺旋；肉眼看不到，在光鏡暗視野下，人們僅能看到梅毒螺旋體的折光性，其活動(dòng)較強(qiáng)。梅毒螺旋體不耐高溫，40℃～60℃時(shí)2～3分鐘就能死亡，100℃時(shí)則即刻死亡?！　。ǘ┭鍖W(xué)檢查1．非螺旋體抗原試驗(yàn)：是用正常牛心肌的心類脂（Cardiolipin）作為抗原，檢測(cè)病人血清中的反應(yīng)素。用活梅毒螺旋體（Nichol株）加病人新鮮血清，35℃培養(yǎng)16小時(shí)，同法作正常血清對(duì)照，然后用暗視野顯微鏡觀察活動(dòng)的螺旋體數(shù)目，如試驗(yàn)標(biāo)本活動(dòng)的螺旋體數(shù)目小于或等于對(duì)照血清標(biāo)本內(nèi)的40%，即為陽(yáng)性。⑸ 嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)食、飲水、吸煙和化妝。⑶ 溢出物：10%次氯酸鈉（V/V）。冠狀病毒的RNA和RNA之間重組率非常高，病毒出現(xiàn)變異正是由于這種高重組率。 　　到目前為止，大約有15種不同冠狀病毒株被發(fā)現(xiàn)，能夠感染多種哺乳動(dòng)物和鳥類，有些可使人發(fā)病。動(dòng)物疾病模型主要用于實(shí)驗(yàn)生理學(xué)、實(shí)驗(yàn)病理學(xué)和實(shí)驗(yàn)治療學(xué)（包括新藥篩選）研究），因此對(duì)冠狀病毒的分離工作難度很大，需用人肝臟細(xì)胞、氣管及鼻黏膜細(xì)胞，經(jīng)器官培養(yǎng)才能分離得到。⑵加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)。當(dāng)人受帶病毒的蚊子叮咬后，乙腦病毒進(jìn)入人體，在血管內(nèi)皮細(xì)胞、淋巴結(jié)、肝、脾等吞噬細(xì)胞內(nèi)增殖，并經(jīng)血液循環(huán)到達(dá)腦部而引起炎癥。早期住院、中西醫(yī)結(jié)合治療，可以大大提高治愈率，減少后遺癥。細(xì)胞培養(yǎng)增殖病毒簡(jiǎn)便易行，已取代動(dòng)物培養(yǎng)用物制備疫苗、診斷抗原，以及研究病毒復(fù)制機(jī)理、篩選抗病毒藥物等。若將感染病毒的腦組織加入50%甘油緩沖鹽水中貯存在4℃，其病毒活力可維持?jǐn)?shù)月。有關(guān)病毒越冬的方式可為：①越冬蚊再感染鳥類，建立新的鳥—蚊—鳥循環(huán)；②病毒可在鳥、哺乳動(dòng)物、節(jié)肢動(dòng)物體潛伏越冬。重癥患者可能死于檢驗(yàn)科質(zhì)量管理體系文件呼吸循環(huán)衰竭，部分患者病后遺留失語(yǔ)、強(qiáng)直性痙攣、精神失常等后遺癥?！　∪?、微生物學(xué)診斷　　乙腦早期快速診斷通常采集性期患者血清或腦脊液特異性lgM ，也可做RT—PCR檢測(cè)標(biāo)本中的病毒核酸片段，一般6個(gè)小時(shí)內(nèi)可初步報(bào)告結(jié)果?！　?補(bǔ)體結(jié)合抗體僅存在于lgG 中，病后出現(xiàn)遲，消失快，適用于診斷近期感染。流行區(qū)當(dāng)年飼養(yǎng)的仔豬接種乙腦疫苗，以杜絕傳染來(lái)源，也可使豬健康成長(zhǎng)。接種猴腦內(nèi)，可致四肢麻痹。居住在森林疫區(qū)的人，因受少量病毒的隱性感染，血中有中和抗體，對(duì)病毒有免疫力。淋病雙球菌呈腎形，兩個(gè)凹面相對(duì)，大小一致。兩側(cè)腹股溝淋巴結(jié)亦可受到感染而引起紅腫疼痛，甚至化膿。因此淋病孕婦的新生兒應(yīng)該用硝酸銀滴眼預(yù)防。　　成人特別是男性淋病20%30%屬于性交傳染。當(dāng)細(xì)菌進(jìn)入尿道腺體和隱窩后，腺管開口及隱窩被阻塞，潛藏的細(xì)菌成為慢性淋病的主要病灶。目前國(guó)外推薦選擇培養(yǎng)基有改良的ThayerMartin（TM）培養(yǎng)基和New York City（NYC）培養(yǎng)基?！　。ㄋ模┗蛟\斷　　1．淋球菌的基因探針診斷 淋球菌的基因