【正文】 基因工程理論研究：基因工程得以建立與發(fā)展的理論基礎(chǔ)主要來之于微生物研究。極端環(huán)境下的微生物：嗜熱、嗜冷、嗜酸、嗜堿、嗜鹽、嗜壓微生物。德國的科赫：1證實(shí)了炭疽病菌是炭疽病的病原菌；2發(fā)現(xiàn)肺炎結(jié)核病的病原菌；3提出證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則—科赫原則。用固體培養(yǎng)基獲得微生物純培養(yǎng)方法： 1涂布平板法：（菌落通常只在平板表面生長）將一定量的某一稀釋度的樣品懸液滴加在已倒好的平板表面，再用無菌涂布棒涂布均勻，經(jīng)培養(yǎng)后挑取單個菌落。球狀體：人工去除部分壁而形成的，一般由革蘭氏陰性菌組成。營養(yǎng)元素：碳源、氮源、能源、無機(jī)鹽、生長因子、水。對數(shù)期：又稱指數(shù)期。減短遲緩期的措施：1通過遺傳學(xué)的方法改變種的遺傳特性；2用出于對數(shù)生長期的細(xì)胞作種；3盡量使接種前后的培養(yǎng)基組成不要相差太大；4適當(dāng)擴(kuò)大接種量。抗生素：由某些生物合成或半合成的一類次級代謝產(chǎn)物或衍生物，能抑制微生物的生長或殺死微生物的化合物。分五個階段：吸附→侵入→脫殼→病毒大分子合成→裝配與釋放。2 基因工程載體：由質(zhì)粒、噬菌體或其他病毒DNA等改造而成。赤潮：在海洋中，某些甲藻類大量繁殖可以形成水花，從而使海水出現(xiàn)紅色或褐色。菌種保藏條件（4點(diǎn)）第三篇：醫(yī)學(xué)微生物學(xué)重點(diǎn)總結(jié)微生物的六大特點(diǎn)：體積微小、結(jié)構(gòu)簡單、種類繁多、分布廣泛、繁殖迅速、容易變異。④細(xì)菌L型：細(xì)胞壁受損的細(xì)菌能夠生長和分裂者叫細(xì)菌L型。：化膿性病灶采取膿汁、滲出液；疑為敗血癥采取血液；腦膜炎采取腦脊液；食物中毒則分別采集剩余食物、病人嘔吐物和糞便等。丙型鏈球菌不溶血，不致病。：百日咳疫苗、白喉類毒素、破傷風(fēng)類毒素。：幾乎每年必考，名詞解釋。③“一包基因”－為保護(hù)內(nèi)部的核酸不被破壞，外圍有蛋白衣殼或更復(fù)雜的包膜。構(gòu)成頓挫感染的細(xì)胞叫非容許性細(xì)胞。細(xì)菌的營養(yǎng)物質(zhì)：水、碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子。菌落分三型：光滑型菌落S、粗糙型菌落R、粘液型菌落M。2質(zhì)粒與生物學(xué)性狀的對應(yīng)關(guān)系：F質(zhì)粒－生殖；R質(zhì)粒－耐藥性；Vi質(zhì)粒－毒力；細(xì)菌素質(zhì)粒－細(xì)菌素；代謝質(zhì)粒－代謝酶。2構(gòu)成細(xì)菌毒力的物質(zhì)是侵襲力和毒素。細(xì)菌學(xué)各論一、葡萄球菌屬基本知識點(diǎn)： +，無芽孢，體外培養(yǎng)時一般不形成莢膜。菌群失調(diào)性假膜性腸炎：又名抗生素性腸炎，常由于長期使用廣譜抗生素造成腸道菌群失調(diào)所致。除上述細(xì)菌性腸炎外也可因長期使用抗生素消除了正常腸道菌群中與霉菌相拮抗的細(xì)菌，使霉菌得以大量繁殖而引起類。重癥的病人都會發(fā)生顱內(nèi)壓增高的種種危險癥狀，但乙腦病程進(jìn)展不象流腦那么迅速。：ETEC、EIEC、EPEC、EHEC、EAEC。：（一道10分的論述題）肥達(dá)試驗－傷寒桿菌127頁 錫克試驗－白喉桿菌155頁 PPD試驗－結(jié)核桿菌163頁 【肥達(dá)試驗】：用已知傷寒沙門菌菌體O抗原和鞭毛H抗原與受檢血清作凝集反應(yīng)，測定受檢血清中有無相應(yīng)抗體及抗體的效價。：⑴陽性反應(yīng)見于：①接種BCG后；②年長兒無明顯臨床癥狀僅呈一般陽性反應(yīng)，表示曾感染過結(jié)核菌；③嬰幼兒尤其是未接種BCG者，陽性反應(yīng)多表示體內(nèi)有新的結(jié)核病灶。七、厭氧性細(xì)菌：。：生長需要X因子和V因子。支原體是目前所知能在無生命培養(yǎng)基中繁殖的最小微生物。對多種抗生素敏感。具有細(xì)胞壁，其組成與G菌相似。：沙眼、包涵體結(jié)膜炎、泌尿生殖道感染。各種絲狀菌長出的菌絲和孢子形態(tài)不同，是鑒別真菌的重要標(biāo)志。黃曲霉毒素可導(dǎo)致肝癌的發(fā)生。：溶細(xì)胞型感染、穩(wěn)定狀態(tài)感染、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增生與細(xì)胞轉(zhuǎn)化、病毒基因的整合。：雞胚接種、細(xì)胞培養(yǎng)、動物接種。呼吸道合胞病毒RSV是在嬰幼兒中引起嚴(yán)重呼吸道感染的最重要的病原因子，典型的是細(xì)支氣管炎和細(xì)支氣管肺炎，在較大兒童和成人主要引起上感。四、肝炎病毒：，引起急性肝炎，不轉(zhuǎn)為慢性肝炎或慢性攜帶者。：注射乙肝疫苗是最有效的預(yù)防方法。、咽部上皮細(xì)胞，與EB病毒感染有關(guān)的疾病主要有三種：傳染性單核細(xì)胞增多癥、非洲兒童性淋巴瘤（Burkitt淋巴瘤）、鼻咽癌?？炙Y ：宮頸癌、尖銳濕疣。 證實(shí)炭疽病因 — 炭疽桿菌 216。a)純種分離；b)通過寄主體進(jìn)行復(fù)壯；2)有意識地利用微生物會發(fā)生自發(fā)突變的特性，在日常的菌種維護(hù)工作中不斷篩選 “正變”個體。n 速凍及快速解凍可減少損傷；還可加一些保護(hù)劑，%左右的甘油或二甲亞砜可透入細(xì)胞，并通過降低強(qiáng)烈的脫水作用而保護(hù)細(xì)胞；n 因此在采用冷凍法保藏菌種時，一般應(yīng)加入各種保護(hù)劑以提高培養(yǎng)物的存活率。大腸桿菌、變形桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、分枝桿菌和霍亂弧菌等20多種細(xì)菌中均有發(fā)現(xiàn)，被認(rèn)為可能與針對細(xì)胞壁的抗菌治療有關(guān)。18芽孢的構(gòu)造與耐熱機(jī)理芽孢衣對多價陽離子和水分的透性很差皮層的離子強(qiáng)度很高,產(chǎn)生極高的滲透壓奪取芽孢核心的水分,結(jié)果造成皮層的充分膨脹。在培養(yǎng)基中加入某種特殊化學(xué)物質(zhì)，某種微生物在培養(yǎng)基中生長后能產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物，而這種代謝產(chǎn)物可以與培養(yǎng)基中的特殊化學(xué)物質(zhì)發(fā)生特定的化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征性變化，根據(jù)這種特征性變化，可將該種微生物與其他微生物區(qū)分開來。生物體內(nèi)的有機(jī)物在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)過一系列的氧化反應(yīng)，最終生成H2O、CO2或其他產(chǎn)物，并且釋放出能量的總過程。在分支代謝途徑中，幾種末端產(chǎn)物同時都過量，才對途徑中的第一個酶具有抑制作用。這一過程的產(chǎn)物，即為次級代謝產(chǎn)物。 在營養(yǎng)成分豐富的天然培養(yǎng)基上生長的遲緩期比在合成培養(yǎng)基上生長時短； 216。 生長速率最大，代時(generation time)最短 216。 此時期的微生物開始合成次生代謝產(chǎn)物，對于發(fā)酵生產(chǎn)來說，一般在穩(wěn)定期的后期產(chǎn)物積累達(dá)到高峰，是最佳的收獲時期。（四）衰亡期特點(diǎn)：n 細(xì)胞死亡數(shù)增加，死亡數(shù)大大超過新增殖的細(xì)胞數(shù)，群體中的活菌數(shù)目急劇下降，出現(xiàn)“負(fù)生長”。微生物的生長速率正好與恒速流入的新鮮培養(yǎng)基流速相平衡。n 計數(shù)室內(nèi)有25個中格，每個中格有16個小格，共400個小格。35 抗生素：是由微生物在代謝過程中產(chǎn)生（有的可人工合成）具有一定濃度下抑制或殺死其他微生物的有機(jī)化合物。 每一種病毒只含有一種核酸(DNA或RNA)。 對一般抗生素不敏感，但對干擾素敏感。細(xì)菌病毒也即噬菌體多呈蝌蚪狀。溫和噬菌體特點(diǎn)：都是dsDNA；具有整合能力；具有同步復(fù)制能力。n 溶源性反應(yīng)是一種比裂解反應(yīng)更有利于病毒持續(xù)和傳播的病毒生存方式。第五篇：環(huán)境工程微生物學(xué)課后習(xí)題(重點(diǎn))環(huán)境工程微生物學(xué)緒論寫出大腸埃希氏桿菌和枯草芽孢桿菌的拉丁文全稱。 溫和噬菌體存在形式：216。病毒的復(fù)制：5個步驟吸附、侵入、增殖(復(fù)制)、裝配、釋放 40一步生長曲線n 從一步生長曲線中，可以獲得病毒增殖的兩個特征性數(shù)據(jù)：潛伏期和裂解量。38毒粒的形狀與大?。簄 大?。翰《镜拇笮〕Ｓ眉{米（nm）來度量，病毒大小從20~300nm之間，通常大小在100nm左右。 在宿主細(xì)胞協(xié)助下，通過核酸的復(fù)制和核酸蛋白質(zhì)裝配的形式進(jìn)行增殖。 形體極其微小，電鏡下才能觀察，可通過細(xì)菌濾器。不適用于細(xì)菌等個體較小的細(xì)胞，因為（1）細(xì)菌細(xì)胞太小，不易沉降；（2）在油鏡下看不清網(wǎng)格線，超出油鏡工作距離。恒濁培養(yǎng)n 概念：通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)基流速，使培養(yǎng)液濁度保持恒定的連續(xù)培養(yǎng)方法。n 因菌體本身產(chǎn)生的酶及代謝產(chǎn)物的作用，使菌體死亡、自溶等，發(fā)生自溶的菌生長曲線表現(xiàn)為向下跌落的趨勢。216。（三）穩(wěn)定期又稱恒定期或最高生長期，此期特點(diǎn)：216。 通過遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短216。 出現(xiàn)原因：把細(xì)菌接種到新鮮的培養(yǎng)基中培養(yǎng)時，并不立即進(jìn)行分裂繁殖，細(xì)菌增殖數(shù)為零，這時需要合成多種酶，輔酶和某些中間代謝產(chǎn)物，要經(jīng)過一個調(diào)整和適應(yīng)過程。 n 在分支代謝途徑中，任何一種末端產(chǎn)物過量時都能對共同途徑中的第一個酶起抑制作用，而且各種末端產(chǎn)物的抑制作用互不干擾。C6H12O6+6O2=6CO2+6H2ONADH經(jīng)電子傳遞鏈產(chǎn)生3個ATP，F(xiàn)ADH2產(chǎn)生2個ATP無氧呼吸n 是指在厭氧條件下，厭氧或兼性厭氧微生物以外源無機(jī)氧化物（硝酸根、亞硝酸根、硫酸根、二氧化碳和三價鐵離子等）或有機(jī)氧化物（延胡索酸，但罕見）作為末端氫受體時發(fā)生的一類產(chǎn)能效率低的特殊呼吸。（我書上記的是產(chǎn)生8分子的ATP，不知道是不是PPT上面出錯了）n 在其總反應(yīng)中，可概括成兩個階段（耗能和產(chǎn)能）、三種產(chǎn)物（2NADH+H+、丙酮酸和ATP）和10個反應(yīng)步驟。皮層含有大量的交聯(lián)度低（約6%）、負(fù)電荷強(qiáng)的芽孢肽聚糖和吡啶2,6二羧酸（DPACa），與低價陽離子一起引起了皮層的高滲透壓，從而使皮層的含水量增加，隨之體積也增大。原生質(zhì)與球狀體都是 人工去壁形成的（溶菌酶青霉素）實(shí)驗室或宿主體內(nèi)形成 L型細(xì)菌 原生質(zhì) 球狀體（4）在自然界長期進(jìn)化中形成——支原體 17革蘭氏染色的機(jī)制G﹢菌：細(xì)胞壁厚，肽聚糖網(wǎng)狀分子形成一種透性障，當(dāng)乙醇脫色時，肽聚糖脫水而孔障縮小，故保留結(jié)晶紫碘復(fù)合物在細(xì)胞膜上。（4）冷凍真空干燥保藏n 用水升華的方式除去水分，手段比較溫和，細(xì)胞受損傷的程度相對比較小，存活率及保藏效果均不錯，是目前使用最普遍，也是最重要的微生物保藏方法。n 瓊脂斜面、半固體瓊脂柱和液體培養(yǎng)等。3提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則柯赫原則 微生物技術(shù)方面：1用固體培養(yǎng)基分離純化微生物的技術(shù)2配置培養(yǎng)基 6純培養(yǎng)物:微生物學(xué)中，在人為規(guī)定的條件下培養(yǎng)、繁殖得到的微生物群體。（2）研究狂犬疫苗成功，開創(chuàng)了免疫學(xué)。HIV的主要靶細(xì)胞是CD4+的T細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞亞群。：聯(lián)合感染（同時發(fā)生急性乙肝和急性丁肝）、重迭感染（慢性HBsAg攜帶者發(fā)生急性丁肝）。HDV是一種缺陷病毒，必須在HBV輔助下方能復(fù)制，其傳播途徑與HBV相同。甲型和乙型流感病毒包膜上鑲嵌有兩種由病毒基因編碼的糖蛋白刺突：血凝素HA和神經(jīng)氨酸酶NA，二者數(shù)量之比為5：1，是劃分流感病毒亞型的依據(jù)。②產(chǎn)生誘發(fā)因素：病毒、細(xì)菌內(nèi)毒素、人工合成的雙鏈RNA。：主要傳染源是鴿子。病原性真菌大多形成無性孢子，無性孢子根據(jù)形態(tài)分3種：分生孢子、葉狀孢子、孢子囊孢子。其基本結(jié)構(gòu)與細(xì)菌相似，例如有細(xì)胞壁、原始核質(zhì)，以二分裂方式繁殖和對抗生素等藥物敏感等。有DNA和RNA兩類核酸。由于變形桿菌抗原易于制備，其凝集反應(yīng)結(jié)果又便于觀察，因此臨床檢驗中常用這類變形桿菌代替相應(yīng)的立克次體抗原進(jìn)行非特異性凝集反應(yīng)，這種交叉凝集試驗叫外斐反應(yīng)，用于檢測人類或動物血清中有無相應(yīng)抗體，供立克次體病的輔助診斷。溶脲脲原體、人型支原體和生殖器支原體在一定條件下也能引起泌尿生殖系統(tǒng)感染和不育癥。V因子是NAD或NADP，耐熱性差，在細(xì)胞呼吸中起遞氫遞電子的作用。十、動物源性細(xì)菌：：布氏桿菌→胞內(nèi)寄生菌（中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞）→菌入血→菌血癥→發(fā)熱→菌入臟器細(xì)胞→發(fā)熱漸退→菌再度入血→菌血癥→發(fā)熱、致死因子、水腫因子三種蛋白質(zhì)組成。⑵陰性反應(yīng)見于：①未感染過結(jié)核；②結(jié)核遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)前期（初次感染后4～8w內(nèi)）；③假陰性反應(yīng)，由于機(jī)體免疫功能低下或受抑制所致，如部分危重結(jié)核??；急性傳染病如麻疹、水痘、風(fēng)疹、百日咳等；體質(zhì)極度衰弱者如重度營養(yǎng)不良、重度脫水、重度水腫等；應(yīng)用糖皮質(zhì)激素或其他免疫抑制劑治療時；原發(fā)或繼發(fā)免疫缺陷病；④技術(shù)誤差或結(jié)核菌素失效?！惧a克試驗】：調(diào)查人群對白喉是否有免疫力。？：腸毒素性、細(xì)胞毒性、神經(jīng)毒性。兩者的腦脊液化驗結(jié)果也有很多不同。想一想流腦和乙腦各屬于哪一種炎癥類型？乙腦（流線性乙型腦炎）和流腦（流行性腦脊髓炎）雖然都是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的傳染性疾病，臨床表現(xiàn)也有一些相同之處，但它們是兩種不同的疾病。過去認(rèn)為抗藥性金黃色葡萄球菌為主要的病原體，以后則認(rèn)為病原菌是一種梭狀芽胞桿菌，該菌在正常情況下存在于腸腔內(nèi)，當(dāng)菌群失調(diào)時則出現(xiàn)異常增生，其毒素可引起腸粘膜上皮細(xì)胞變性壞死。（看一看即可）：凝固酶、葡萄球菌溶素、殺白細(xì)胞素、腸毒素、表皮剝脫毒素、毒性休克綜合征毒素其他。毒素有內(nèi)毒素和外毒素之分。接合－細(xì)菌通過性菌毛相互連接溝通，將遺傳物質(zhì)（主要是質(zhì)粒DNA）從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌。滅菌－殺死所有微生物。1耐酸之王－結(jié)核分枝桿菌；耐堿之王－霍亂弧菌1專性厭氧菌在有氧環(huán)境中不能生長的原因： ①缺乏氧化還原電勢高的呼吸酶 ②缺乏分解有毒氧基團(tuán)的酶1細(xì)菌群體的生長繁殖可分為四期：遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期。－病毒主要通過皮膚、粘膜傳播，但在特定條件下可直接進(jìn)入血液循環(huán)而感染機(jī)體，這種傳播方式叫水平傳播。⑤不是進(jìn)行二分裂繁殖，而是根據(jù)病毒核酸的指令，使細(xì)胞改變其一系列的生命活動，結(jié)果大量地復(fù)制出病毒的子代，并且導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生多種改變。脂質(zhì)包括索狀因子、磷脂、硫酸腦苷脂、蠟質(zhì)D。鏈球菌溶素有兩種：O和S。發(fā)酵甘露醇等作為參考指標(biāo)。質(zhì)粒：18頁整個一段異染顆粒：胞質(zhì)顆粒中有一種主要成分是RNA和多偏磷酸鹽的顆粒，嗜堿性強(qiáng)，用亞甲藍(lán)染色時著色較深呈紫色，叫異染顆?；蚣u回體，常見于白喉棒狀桿菌。②原核細(xì)胞型微生物原始核呈dsDNA結(jié)構(gòu)，無核膜、核仁，細(xì)胞