【正文】 病害生物防治 效果 得到顯著提高 。 CK N Y D B N Y C B010203040506070Disease incidence (%)D if f erent groupsaaa 圖 33 幾丁質(zhì)培養(yǎng)后 R. paludigenum 對蘋果誘導(dǎo)抗性的增強效應(yīng)（發(fā)病率） 哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 第三章 海洋酵母 R. paludigenum 對果實采后真菌病害抑制機理研究 16 Fig. 33 Incidence of blue mold decay caused by Penicillium expansum on apples inoculated with R. paludigenum cultivation in NYDB or NYDB amended with chitin powder at % on induction of resistance to blue mold rots in apple fruit. Bars represent standard errors. Different letter indicates significant differences (P ) according to the Duncan39。 過氧化物酶 （ peroxidase, POD）活性測定 POD 活性 采用愈創(chuàng)木酚方法測定（ Lurie et al., 1997）， ?? 。 幾丁質(zhì)對 R. paludigenum 生防機理的影響 幾丁質(zhì)對 R. paludigenum 在果實傷口處生長動態(tài)的影響 用 ?? 。 D: R. paludigenum cultured in NYCB with % chitin。s multiple range tests. 類似的，在蘋果果實上， ?? 。 不同培養(yǎng)時間對幾丁質(zhì)誘導(dǎo) 拮抗酵母生防活性的影響 酵母活化和液體培養(yǎng)、菌體收集同 ， ?? 。 ?? 酵母誘導(dǎo)培養(yǎng) 保存的酵母菌種首先在 NYDA 斜面培養(yǎng)基中進行活化， ?? 。 本試驗?zāi)康氖墙鉀Q瓶頸問題之一，探討通過在培養(yǎng)基中添加幾丁質(zhì)等培養(yǎng)酵母 R. paludigenum 提高其拮抗效力的可行性，以提高酵母的生防效果。 ?? 。 非共知的英文縮寫在文中第一次出現(xiàn)時需要寫出全稱，并給出中文意思 哈爾濱工業(yè)大學(xué) 工學(xué) 學(xué)士學(xué)位論文 第一章 文獻綜述 3 重寄生作用 許多酵母拮抗菌可以分泌胞外 水解酶（幾丁酶， β1,3葡聚糖酶等），從而分解病原菌的細胞壁或菌絲體。 果實采后病害 物理 防治 果蔬采后病害防治物理方法主要有：熱處理；低溫冷藏 ； 微波處理；氣調(diào)；輻射處理；低壓處理。 ?? 致病菌酸化果實組織 Pseudomonas expansum、 P. digitatm 和 P. italicum 等酸性病原真菌能產(chǎn)生檸檬酸和葡萄糖酸等有機酸，使寄主果實組織發(fā)生酸化，進而促進病原菌致病因子，如 PG 基因（ pepgl）的表達（ Prusky et al., 20xx）。 作者簽名： 日期： 年 月 日 學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書 本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。 BCPD 畢業(yè)設(shè)計（論文）原創(chuàng)性聲明和使用授權(quán)說明 原創(chuàng)性聲明 本人鄭重承諾：所呈交的畢業(yè)設(shè)計（論文），是我個人在指導(dǎo)教師的指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的成果。本實驗通過利用酵母細胞壁組分之一幾丁質(zhì)誘導(dǎo)培養(yǎng)本實驗室分離得到的拮抗菌株海洋酵母 Rhodosporidium paludigenum Fell amp。 Tallman) to enhance the effectiveness of its biological control of postharvest decays of fruits. …… Key words: R. paludigenum。除了文中特別加以標注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品。 ?? . 采后病原真菌的侵染方式 采后病原真菌主要通過 3 種途徑或方式入侵果實： (1)通過機械傷或蟲害等造成的傷口； (2)通過自然開放的皮孔、氣孔、果實和花梗結(jié)合部位； (3)通 過分泌寄主細胞壁水解酶等直接突破果實表皮的防御機制（ Prusky 和Lichter, 20xx）。 ?? 。 采后拮抗酵母作用機制 根據(jù)已有的研究結(jié)果顯示，微生物對病原菌有直接作用和間接作用兩種方式，直接作用包括抗生作用和重寄生作用，間接作用包括營養(yǎng)和空間的競爭，胞外活性物質(zhì)的產(chǎn)生和誘導(dǎo)抗性等。 ?? 。 ?? 基因工程技術(shù) 的應(yīng)用 利用分子生物學(xué)和基因工程的 手段研究拮抗菌的遺傳背景并開展相應(yīng)分子水平的改造是生物防治領(lǐng)域的一個研究熱點， ?? 。 章節(jié)間要有分頁符哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 對果實采后真菌病害抑制效果研究 6 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 對果實采后真菌病害抑制效果研究 前言 生物防治是采用微生物菌株或抗菌素類物質(zhì)，通過噴灑或浸漬果實處理，以降低或防 治果實采后病害的保鮮方法。 幾丁質(zhì)對 R. paludigenum 生防效果的影響 不同濃度幾丁質(zhì)對拮抗酵母生防活性的影響 酵母活化和液體培養(yǎng)、菌體收集同 ， ?? 。 ?? 。 E: %（ w/v）幾丁質(zhì) NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum. Fig. 23 Incidence of blue mold decay caused by Penicillium expansum on apples inoculated with R. paludigenum cultured with different concentrations of chitin. 哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 對果實采后真菌病害抑制效果研究 10 Notes: A: R. paludigenum cultured in NYDB。 材料和方法 主要儀器 TH3560 全自動滅菌鍋 造鑫 (TSAO HSIN)企業(yè)有限公司 SWCJ1F 超凈工作臺 蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司 SIGMA 3K15 離心機 德國希格瑪（ SIGMA）公司 QYC211 全溫空氣搖床 上海?，攲嶒炘O(shè)備有限公司 Sartrious 電子天平 北京賽多利斯天平有限公司 200 ?l、 1000 ?l、 5ml移液器 德國 Eppendorf 公司 血球計數(shù)板（ 2516） 上海醫(yī)用光學(xué)儀器廠 光學(xué)顯微鏡 日本奧林巴斯有限公司 LRH250 生化培養(yǎng)箱 上海一恒科技有限公司 酶標儀 美國分子儀器公司（ MDA） 哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 第三章 海洋酵母 R. paludigenum 對果實采后真菌病害抑制機理研究 13 拮抗菌及其培養(yǎng) 見 。 ?? 。 5 0 5 10 15 20 25 30 35 404. 24. 44. 64. 85. 05. 25. 45. 65. 86. 06. 26. 4Population (log cells/wound)T im e af t er inoc ulat ion (h) N Y D B N Y C B** 圖 31 幾丁質(zhì)誘導(dǎo)后 1106 cells/mL R. paludigenum 在蘋果果實傷口處的生長動態(tài) Fig. 31 Population dynamics of R. paludigenum in wounds of apples incubated at 25℃ . Wounds were treated with 50?l of 1106cells/mL washed cell suspension of R. paludigenum alone. Bars represent standard errors of three replications. * Symbols indicates significant differences (P ) according to the Duncan39。s multiple range tests. 幾丁質(zhì)培養(yǎng)后 R. paludigenum 對果實 POD 酶活性的影響 試驗結(jié)果（見圖 36）顯示， ?? 。而在添加幾丁質(zhì)的培養(yǎng)基培養(yǎng)后， R. paludigenum 的發(fā)酵上清液顯示了出對擴展青霉在蘋果果實傷口處侵染一定的抑制作用。 Massart 和 Jijakli（ 20xx） 利用比較基因組學(xué)技術(shù)（ cDNAAFLP）獲得了用病原菌細胞壁提取物培養(yǎng)采后拮抗酵母（ P. anomala）后的一些差異基因，包括細胞壁代謝相關(guān)的 基因， 本實驗準備采用蛋白組學(xué)和基因組學(xué)相關(guān)技術(shù)，系統(tǒng)全面地篩選并鑒定與拮抗酵母生防效力相關(guān)的蛋白和基因，通過研究拮抗酵母內(nèi)在的生理和分子機制及其與生防效力的關(guān)系，更好地闡明拮抗酵母的作用機制，為明確其作用模式提供新的認識，為探索提高其生防效力的途徑提供新的思路，并為今后利用生物工程技術(shù)手段對拮抗酵母進行定向改造進一步提高其生防效力提供理論基礎(chǔ)。 在此，謹向以上各位老師表示崇高的敬意和衷心的感謝！ 感謝陪我走過四年大學(xué)生活的 0607501 班全體同學(xué)，謝謝你們曾經(jīng)予我的信任和鼓勵，幫助和關(guān)懷，不管未來有多遙遠，成長的路上有你有我 。, N., 20xx. Relative importance of amino acids, glycinebetaine and ectoine synthesis in the biocontrol agent Pantoea agglomerans CPA2 in response to osmotic, acidic and heat stress. Letters in Applied Microbiology 45: 612. Castoria, R., De Curtis, F., Lima, G., Caputo, L., Pacifico, S., De Cicco, V. 20xx. Aureobasidium pullulans (LS30) an antagonist of postharvest pathogens of fruits: study on its modes of action. Postharvest Biology and Technology 22: 717. 小二黑體居中 五號字體，按字母排序，格式統(tǒng)一 哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 參考文獻 24 ChandGoyal, T., Spotts, R. A., 1997. Control of postharvest pear diseases using natural saprophytic yeasts their bination with a low dosage of thiabendazole. Postharvest Biology and Technology 6: 253259. DombrinkKurtzman MA, Blackburn JA. 20xx. Evaluation of several culture media for production of patulin by Penicillium species. International Journal of Food Microbiology 98: 241– 248 ElGhaouth, A., Smilanick, J. L., Wilson, C. L., 20xx. 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