【正文】 , 84: 337345 18. Abbott P., Flewelling L I., Landsberg H., Saxitoxin monitoring in three species of Florida puffer fish. Harmful Algae, 20xx, 8: 343348 19. Lecy J L., Stauber J L., Jolley D F., Sensitivity of marine microalgae to copper: the effect of biotic factors on copper adsorption and toxicity. Science of the Total Environment, 長(zhǎng)春工程學(xué)院（畢業(yè)論文） 20 20xx, 387: 141154 20. Drost W., Matzke M., Backhaus T., Heavy metal toxicity to Lemna minor: studies on the time dependence of growth inhibition and the recovery after exposure. Chemosphere, 20xx, 67: 3643 21. Wollenberger L., S248。 Weller, Ulrich。在此感謝兩位老師的辛勤培養(yǎng)和諄諄教誨，與兩位老師的學(xué)習(xí)過(guò)程我會(huì)永遠(yuǎn)的銘記在心的，這樣的學(xué)習(xí)給我的大學(xué)生活也畫(huà)上了完美的句號(hào)。謝謝您！ 四年的生活中，感謝我的老師，朋友和同學(xué)給予我的幫助和鼓勵(lì)！希望今后的我們都不斷地向上奮進(jìn)，加油！ 感謝各位專家在百忙中審閱我的論文！ 感謝長(zhǎng)春工程學(xué)院理學(xué)院各位老師對(duì)我的栽培！ 。 大學(xué)生活的最后一個(gè)實(shí)習(xí)學(xué)習(xí)是在 中國(guó)科學(xué)院 長(zhǎng)春應(yīng)用化學(xué)研究所度過(guò)的，在這里的工作和生活得到了老師、師兄和師姐的熱心幫助和親切關(guān)懷。 Martin, Edith。 Biotechnology, 20xx, 24(4): 267274 26. Zhai, Junfeng。 OD 值 時(shí)間 /min 8 16 24 30 60 120 圖 4 不同微生物濃度和反應(yīng)時(shí)間下測(cè)得毒性物質(zhì)對(duì)微生物代謝物的抑制率 由 圖 4 可得，最為理想的實(shí)驗(yàn)條件是 OD 值為 8 和反應(yīng)時(shí)間為 60分鐘。然而，隨著時(shí)間的增長(zhǎng)，新稀釋的卟啉的熒光性質(zhì)表現(xiàn)為，先快速下降而后趨于穩(wěn)定。并且由圖 2D 的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示， OD24 的靈敏度是最高的，這也使得我們的實(shí)驗(yàn)中微生物的濃度得到了優(yōu)化。 在步驟（ 2）中，沒(méi)有加卟啉之前要靜置 60 分鐘，使得樣品中的各種反應(yīng)進(jìn)行完全，以便得到更加穩(wěn)定的作用。 依據(jù)這個(gè)原理，毒性的大小是可長(zhǎng)春工程學(xué)院（畢業(yè)論文） 8 以通過(guò)毒性物質(zhì)對(duì)微生物釋放的鉀離子的抑制率 來(lái) 進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算公式為 Inhibition Ratio（ %） =（ 1???????????） 100% A 是在有毒性物質(zhì)的環(huán)境中培養(yǎng)的微生物后，上層清液的微生物代謝物與卟啉在 621nm處的熒光峰值 與在 636nm 處的熒光峰值的比值 ； B 是 在沒(méi)有有毒性物質(zhì)的環(huán)境中培養(yǎng)的微生物后， 上層清液的微生物代謝物與卟啉 在 621nm 處的熒光峰值 與在 636nm 處的熒光峰值的比值 ； C 是 空白樣 （沒(méi)有搖床的微生物代謝物與卟啉） 在 621nm 處的熒光峰值 與在 636nm 處的熒光峰值的比值 。 卟啉 的 熒光 增強(qiáng) 比較測(cè)定有毒化學(xué)物質(zhì) 把微生物用 磷酸緩沖溶液（ PBS） 稀釋到所需的 OD 值，再用紫外可見(jiàn)近紅外掃描分光光度計(jì)測(cè)量微生物 OD 值，其波長(zhǎng)選在 600nm。而熒光的增強(qiáng)程度與微生物的代謝物濃度，即微生物的活性有直接的聯(lián)系。鉀離子是細(xì)胞內(nèi)普遍存在的無(wú)機(jī)離子，微生物通過(guò)位于原生質(zhì)膜上的離子通道蛋白 Na+， K+ATP 酶的作用將鉀離子運(yùn)輸進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，在細(xì)胞內(nèi)形成高濃度的鉀離子 [27]。例如，對(duì)于低濃度金屬樣品，鹽度校正會(huì)導(dǎo)致假陰性的結(jié)果；而對(duì)于一些溶解度低的樣品，如苯酚，則會(huì)由于毒物的析出而導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果；（ 3）單一發(fā)光細(xì)菌的使用難以做到適用于所有毒物。越來(lái)越多的科學(xué)家致力于能反映持久性污染物作用本質(zhì)，并能對(duì)污染物早期影響進(jìn)行檢測(cè)的指標(biāo)，試圖從分子水平基因調(diào)控的深度上 去闡明毒物中毒機(jī)理，并在此基礎(chǔ)上提供相應(yīng)的防范措施。 但是，由于化學(xué)分析方法在水體總毒性的檢測(cè)中有很多的不足之處 [12,13]且毒性物質(zhì)的種類(lèi)比較多，檢測(cè)到的有毒物只能代表水體被污染的性質(zhì)，不能預(yù)測(cè)不同毒性物質(zhì)之間的相互作用，從而很難分析水體總毒性對(duì)我們的危害程度。 生物毒性指標(biāo) 為了彌補(bǔ)傳統(tǒng)理化指標(biāo)在評(píng)價(jià)水體污染方面的不足，近年來(lái)，研究者們采用不同的生物作為指示生物來(lái)評(píng)價(jià)水體的生物毒性，從而反映水體毒性的大小，并定為水體生物毒性指標(biāo)。 長(zhǎng)春工程學(xué)院（畢業(yè)論文） 2 而這種水污染的檢測(cè)的重要意義在于不僅可以了解到水體中污染物質(zhì)的原始來(lái)源以及其會(huì)分布的絕大多數(shù)范圍等，還可以評(píng)估出這些污染物質(zhì)在未來(lái)的污 染變化趨勢(shì)。 當(dāng)污染很?chē)?yán)重時(shí)，則會(huì)破壞水體的生態(tài)系統(tǒng)的平衡 [2]。 關(guān)鍵詞 卟啉 毒性物質(zhì) 微生物代謝物 Abstract In this work, the thesis is based on the porphyrin fluorescence enhancement of the total microbial water toxicity testing the principle of the total toxicity detection is to pare the health of microbial metabolites and microbial metabolites which were damaged and the role of porphyrin fluorescence after the enhancement level. By changing the concentration of microanisms, reaction time and the concentration of toxicant DCP, we can further optimize the experimental 長(zhǎng)春工程學(xué)院（畢業(yè)論文） II conditions in order to more easy of experimental operation in the future. To obtain the desired experimental phenomena, toxic substances and microbial metabolites of porphyrin fluorescence effects more eminent than nontoxic substances microbial metabolites and the enhanced role of porphyrin fluorescence bigger extent. Such experimental results show that the method can be used to detect total microbiological water toxicity. Keyword： Porphyrin Toxicants Microbial metabolites 長(zhǎng)春工程學(xué)院（畢業(yè)論文） III 1 前言 ..................................................................................................................... 1 水環(huán)境污染的介紹 ..................................................................................... 1 水污染的檢測(cè)意義 ................................................................................... 1 水污染的評(píng)價(jià)指標(biāo) ..................................................................................... 2 理化指標(biāo) .....................................................