【正文】 物個體間的遺傳和環(huán)境不同，易感性差異很大；傳統(tǒng)流行病學無法有效測量。分子事件〔 molecular event〕或分子生物標志〔 molecular biomarker〕主要指代表生物結構和功能的生物大分子特征。 ? 研究的水平不同： ? 傳統(tǒng)流行病學：宏觀水平或表型 ? 分子流行病學：微觀水平或基因水平 ? 所解決的問題不同： ? 傳統(tǒng)流行病學：可說明暴露與發(fā)病之間的聯(lián)系，但不能揭示疾病發(fā)生的機制〔黑匣子〕。 第十四頁，共六十頁。 ? 以腫瘤為例 第十九頁，共六十頁。 生物標志的分類 ? 在暴露 疾病鏈中，一般可將生物學標志分為 :體內劑量標志、生物有效劑量標志、生物學反響標志、疾病標志，此外，尚有易感性標志：起著重要作用 ,是決定疾病能否發(fā)生的主要因素。 ? 內暴露標志： 指暴露因素 進入機體之后 的標志 ?生物性病原因子 ：可以是生物病原因子本身、其代謝產物或與宿主體內生物大分子結合產物，像病毒整合基因、生物毒素 DNA加合物等 ?非生物性病原因子 ：可以是體內轉運分子、代謝產物或與宿主靶體結合物等，如暴露于苯并 (a)芘后，在淋巴細胞中能檢測到特異的 DNA加合物。 生物標志的篩選 要求： ? 具有較好的特異性和穩(wěn)定性 ? 檢測方法具有較高的靈敏度，特異度高 ? 檢測方法快速、簡便 依據(jù)： ? 研究目的、生物學標志的本身特性、在疾病過程中的意義、檢測方法、生物學標志與所要代表的特定階段的關聯(lián)程度。 ? 生物性病原因子檢測鑒定 流感嗜血桿菌 ? 病原生物進化變異規(guī)律研究 O157大腸桿菌 ? 確定傳播途徑 ? 非生物性因素的暴露測量 吸煙煙霧 可研究病原生物分型、分類和檢定是最有效手段、研究病原生物變異的規(guī)律等。 第三十三頁，共六十頁。 應用生物學標志的意義 ?能精確測量暴露因素及其水平； ?揭示生物學反響的早期事件 。 分子流行病學應用的主要研究方法 ? 測量指標 ? 標本采集 ? 現(xiàn)場調查研究方法 ? 實驗室檢測技術 ? 研究設計 ? 資料分析 第三十七頁，共六十頁。 現(xiàn)場調查研究方法 ? 傳統(tǒng)的現(xiàn)場流行病學研究方法 ,即描述性研究、分析性研究與干預性研究均可應用于分子流行病學。 〔 3〕所有的生物標本都應有詳細的背景材料和鑒別標識。 ? 宏觀資料的收集：不應無視 ? 偏倚的控制： ? 選擇偏倚：樣本選擇偏倚、標本采集偏倚〔如采集的部位、時間、機體狀態(tài)、方法等〕 ? 信息偏倚：檢測偏倚、標本儲存偏倚〔儲存條件和時間〕。狹義 一個生物體的無性繁殖群體，稱為一個克隆。 實例二 ? 研究目的 研究布魯氏菌的生物標志 ? 測量指標 布魯氏菌的核苷酸序列同源性 ? 測量方法 基因外重復回文 PCR(REP－ PCR)、細菌內基 ? 因重復一致 PCR(ERIC－ PCR)和核酸測序 ? 研究設計 研究者選擇了來自近 20 個國家和地區(qū)的 34 株不同種、不同生物型的布氏桿菌，這些細菌分屬于牛種、豬種、犬種、沙林鼠種、羊種、綿羊附睪種等 6 種 7 個生物型。 ? 病原體研究 ? 人群感染和傳染源研究 ? 傳播途徑研究 ? 人群易感性研究 ? 疫苗及免疫預防制劑的研究 ? 防治對策和措施研究及其效果評價 第五十五頁，共六十頁。 第五十九頁，共六十頁。 。 1972年 Kilbourne 博士在美國傳染病學會第 10次年會上作了題為 “流感的分子流行病學〞的報告。 第五十六頁，共六十頁。 ? 結果分析 用 REP－ PCR技術可把 34 種布氏桿菌進一步分為 9 個型，后以 ERIC－ PCR又可分出 13 個型，綜合這兩種方法可以區(qū)除牛種的 3 型和 9 型生物型以外的各種不同布氏桿菌。 第五十頁，共六十頁。 ? 輔以動物實驗研究問題 動物實驗可以較好控制 ? 影響因素，連續(xù)采樣、動態(tài)觀察 ? 研究樣本量的估計問題 原理和方法同一般流行病學研 ? 究設計。 實驗室常用檢測技術 ? 核酸技術 核酸電泳圖譜 核酸酶切電泳圖譜 核酸分子雜交 核酸體外擴增 核酸序列分析 PCR ? 蛋白質技術 凝膠電泳、蛋白轉印雜交、色譜分析、蛋白質測序 ? 酶學技術 多位點酶電泳法 ? 生物芯片技術 基因芯片 ? 其他技術 免疫學技術 如酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA)、熒光免疫試驗 (FIA) 等； 色譜技術 如高效液相色譜技術 (HPLC)等 第四十五頁，共六十頁。 第四十二頁，共六十頁。 測量指標 ? 暴露指標 最好能代表接觸劑量或生物作用劑量 ? 易感性指標 ? 一般選擇抗體水平作為傳染病易感性指標， ? 易感基因及其表達產物等作為心腦血管病、惡性腫瘤、糖尿病、遺傳病等慢性非傳染病的易感性標志。 ?提高篩檢和診斷疾病的準確性和精確性 。第二方面那么是分子流行病學研究的重要內容之一。 第三十一頁，共六十頁。 生物標志