【正文】 驗(yàn)、腎小管微穿刺技術(shù)等探時(shí)藥物作用部位和功能。 一般認(rèn)為大鼠血紅蛋白尿性 ARF模型二種機(jī)制均有，接近于人的創(chuàng)傷性 ARF，特別是積壓綜合征。 (3)犬夾閉腎動(dòng)脈引起的 ARF模型：麻醉犬用外科手術(shù)暴露腎動(dòng)脈夾閉 1h，引起的缺血性腎功能衰竭。泌尿系統(tǒng)與男性生殖系統(tǒng)藥效學(xué)研究的設(shè)計(jì)和方法 第一節(jié) 急性腎功能衰竭藥 一、試驗(yàn)設(shè)計(jì)的醫(yī)學(xué)基礎(chǔ) 急性腎功能衰竭 (簡(jiǎn)稱 ARF)是危急重癥，屬中醫(yī)“癃閉”、“關(guān)格”、“腎風(fēng)”等范疇。 (4)汞劑引起的動(dòng)物 ARF模型：以適當(dāng)劑量的氯化汞靜脈注射家兔，皮下或靜脈給大鼠， l— 2日引起腎小管損傷，出現(xiàn)急性腎功能障礙的 — 系列變化。在此模型早期，腎血管阻力增加，腎血流量減少，腎皮質(zhì)區(qū)域的血管重度收縮，如所試藥物可能有類似于異博定的降低腎血管力、增加腎血流量等作用，采用此模型較適當(dāng)。這研究對(duì)了解新藥特點(diǎn)很有意義。 1— 5日內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 (二 )犬去甲腎上腺素 ARF模型 l 原理 去甲腎上腺素引起腎血管收縮而致腎小球的血流減少，腎小球?yàn)V過(guò)減少；組織缺血、缺氧加重對(duì)腎組織損害從而產(chǎn)生 ARF。 (3)病理學(xué)檢查。 (四 )汞劑引起的動(dòng)物 ARF模型 1．原理 一般認(rèn)為是由于汞離子經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)后，被腎小管上皮細(xì)胞重吸收，并在細(xì)胞內(nèi)累積．與細(xì)胞膜和細(xì)胞內(nèi)巰基 (一 SH)和二硫基 (一 S一 S一 )等結(jié)合，影響酶活性。進(jìn)行尿常規(guī)檢查。 3．評(píng)價(jià)指標(biāo) (1)尿量及尿常規(guī)檢查。 二、藥效學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) (一 )對(duì)疾病動(dòng)物模型的治療作用試驗(yàn) 1．常用動(dòng)物模型 (1)大鼠腺嘌呤 CRF模型：大鼠經(jīng)含 0． 5％～ 0. 75％腺嘌吟 (adenine)飼料喂養(yǎng)引起的。目前已從 CRF患者中分離出約 200種蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)物，其中 100多種物質(zhì)成分比止常值高，這些毒素物質(zhì)分為小分子 (相對(duì)分子質(zhì)量小于 500)，如肌酐、尿素氮、胍類和胺類；中分子 (相對(duì)分子質(zhì)量為 500— 5000)；大分子 (相對(duì)分子質(zhì)量大 5000)，如旁腺索、生長(zhǎng)激素等。 三、動(dòng)物模型建立方法 (一 )大鼠腺嘌呤 CRF模型 1. 原理 高濃度腺嘌吟通過(guò)黃嘌呤氧化酶的作用生成極難溶于水的 2， 8— 二羥腺嘌吟，后者沉積在腎小管，影響了氮質(zhì)化合物的排世，導(dǎo)致氮質(zhì)血癥、毒素蓄積從電解質(zhì)和氨基酸代謝紊亂，最終引起腎功能衰竭。 (4)腎臟病理形態(tài)學(xué)觀察：肉眼及組織學(xué)觀察，有條件時(shí)可作病理切片的圖像分析?？梢?jiàn)殘余腎臟代償性增大，鏡檢可見(jiàn)腎小球毛細(xì)管擴(kuò)張，內(nèi)皮細(xì)胞肥大，系膜基質(zhì)增生，大鼠上皮內(nèi)皮細(xì)胞壞死，毛細(xì)管腔消失的腎小球玻璃樣變性從硬化的病理過(guò)程。 2 操作方法 實(shí)驗(yàn)用成年健康大鼠，雄性，體重 200— 300g，注射戊巴比妥鈉 40mg／ kg(體重 )麻醉，常規(guī)消毒皮膚，背部一側(cè)切口，分離肌層，暴露左腎，用食指從腹部相應(yīng)部位輕輕向上頂起，腎臟即滑出皮膚切口外面，這樣便操作，然后剝離筋膜。將經(jīng)燒灼的腎臟放回，縫合肌層與皮膚．操作全過(guò)程不超過(guò) l0min。治療慢性腎炎的中藥，應(yīng)有①治本作用，去外、內(nèi)致病因子的繼續(xù)作用。 (二 )陽(yáng)性對(duì)照藥 藥典或中成藥中用治療慢性腎炎的新藥，均可用作對(duì)照藥。于末次注射后 2星期，采羊血分離血清；加入生理鹽水洗漂 3次的等量兔紅細(xì)胞，混勻， 過(guò)夜充分吸附，離心棄除血細(xì)胞。 (二 )大鼠 Heymann腎小球腎炎模型 1．原理 本方法用大白鼠腎組織，注射給同種大鼠，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間，受試動(dòng)物產(chǎn)生抗原 — 抗體復(fù)合物，沉淀于腎小球血管壁而形成腎小球腎炎。臨床表現(xiàn)為：尿頻、尿急、排尿不暢、夜尿增多等。 2．觀察指標(biāo) (1)前列腺指數(shù) [前列腺重 mg／ g(體重 )]。激素法前列腺肥大模型方法簡(jiǎn)便迅速，適宜藥物篩選，但與人類疾病的相關(guān)性較??；老年前列腺增生犬與人類發(fā)病機(jī)制相似，是公認(rèn)的研究人類前列腺增生的合適動(dòng)物模型，但來(lái)源較少，難于廣泛用作藥物篩選；胚胎尿生殖竇植入法小鼠前列腺肥大模型上需外源性激素，可在短期內(nèi)產(chǎn)生預(yù)期的增生，不干擾前列腺肥大藥物檢測(cè)，動(dòng)物操作容易，一般認(rèn)為此模型可用于探索人類前列腺肥大的疾病過(guò)程。 3．造模成功指標(biāo)與藥物療效觀察 鏡檢前列腺，與空白對(duì)照組比較增生程度，或取前列腺稱重計(jì)算前列腺指數(shù)以及測(cè)前列腺中 DNA含量與空白對(duì)照組比較，藥效可根據(jù)前列腺鏡檢、前列腺指數(shù)、 DNA含量、磷酸酶含量來(lái)評(píng)價(jià)。 (三 )小鼠尿生殖竇植入法模型 1．原理 胚胎與成年前列腺細(xì)胞相互作用，誘導(dǎo)成年前列腺細(xì)胞增小(可能是由于成年前列腺胚胎生長(zhǎng)能力的重新恢復(fù) )。前列腺炎多由大腸桿菌，金黃色葡萄球菌感染所致。 (2)前列腺液檢查：檢查其細(xì)胞數(shù)。 三、動(dòng)物模型的建立方法 (一 )非菌性前列腺炎的模型的建立 1．原理 注入角叉菜膠生理鹽水．能引起前列腺液檢驗(yàn)指標(biāo)的顯著改變，而注入等量滅菌生理鹽水則不能引起顯著改變。 (三 )大鼠實(shí)驗(yàn)性細(xì)菌前列腺炎病理模型建立 1．原理 由大腸桿菌感染引起前列腺液中白細(xì)胞提高及卵磷質(zhì)小體密度減少，引起前列腺形態(tài)的炎性病變。 3．造模成功的指標(biāo) 鏡檢前列腺液中卵磷質(zhì)小體密度減少，白細(xì)胞數(shù)增加，前列腺標(biāo)本病理形態(tài)學(xué)檢查診斷為前列腺炎模型。 3．造模成功指標(biāo) 前列腺液中白細(xì)胞數(shù)增加，卵磷質(zhì)小體密度減少，前列腺液細(xì)菌培養(yǎng)陰性，腺體標(biāo)本病理形態(tài)學(xué)檢查診斷為病變前列腺炎。 (3)卵磷質(zhì)小體密度 (前列腺液中 )。主要由炎細(xì)胞浸潤(rùn)腺腔梗阻，間質(zhì)纖維化產(chǎn)生，治療以清熱解毒，活血祛瘀、利水通淋。 3．造模成功的指標(biāo)和藥物療效觀察指標(biāo) 同激素法模型。 (二 )老年犬前列腺增生模型 1．原理 犬的前列腺增生與人發(fā)病機(jī)制相似。本癥?？诜o藥．應(yīng)注意劑量的合理性。前列腺肥大者腺體直徑增大。中醫(yī)認(rèn)為