【正文】 射 .大鼠自由進(jìn)食和飲水， — 般于 2h后出現(xiàn)血紅蛋白尿，48h形成穩(wěn)定模型。 3．造模成功指標(biāo)和藥物療效觀察 (1)24h尿量較對(duì)照組明顯減少，尿蛋白明顯升高。 (3)血清 K、 Na增高。 所試藥物的藥效可根據(jù)用藥后對(duì)以上指標(biāo)的改善來(lái)評(píng)價(jià)，結(jié)果進(jìn)行組間比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用 t檢驗(yàn)。 (2)禁水 24h后體重減輕明顯，脫水嚴(yán)重的大鼠選作實(shí)驗(yàn)動(dòng)物效果較好。 2．操作方法 取 10— 20kg雄性家犬，以戊巴比妥鈉 30mg／ kg，靜脈注射麻醉后，于術(shù)分離 — 側(cè)輸尿管，插入管收集尿液。 1— 4h內(nèi)可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。腎衰陰性對(duì)照組用等量生理鹽水，每組動(dòng)物至少 5只。 (2)BUN、 Scr、血清總蛋白和白蛋白、血清 K和 Na(藥前 1h及用藥 1h、 2h、 4h后 )。所試藥物的藥效可根據(jù)以上指標(biāo)的改善來(lái)坪價(jià)，結(jié)果進(jìn)行檢驗(yàn)作組間比較。 (2)實(shí)驗(yàn)前勿給高蛋白飲食 (如肉類 )，否則影響 BUN水平。腎衰陽(yáng)性對(duì)照組用地塞米松 (0． 1mg／ kg)或右旋糖酐 (相對(duì)分子質(zhì)量 75000， 10ml／ kg，靜脈注射 )。 2．原理、評(píng)價(jià)指標(biāo)等 同犬去甲腎上腺素模型。受累細(xì)胞由于汞 — 硫反應(yīng)而損害細(xì)胞及其膜的功能與結(jié)構(gòu)，細(xì)胞呼吸功能喪失，變性壞死，并部分脫落于管腔中阻塞腎小管，使原尿通過(guò)受阻。原尿漏至腎間質(zhì)，形成間質(zhì)水腫，壓迫腎小管。 2．操作方法 2kg以上的健康成年家兔，雌雄均可。測(cè)定前 3日的血，尿的尿素氮和肌酐含量，取平均值作自身對(duì)照；注射氯化汞后的的 5日，每天作同樣測(cè)定，以后可改為隔天或多日測(cè) 1次，至腎功能正常。 3．注意點(diǎn) (1)HgCl2溶液必須是新鮮配制。 (3)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物所食飼料、青菜不加限制。抑制腎皮質(zhì)細(xì)胞溶酶體內(nèi)的磷脂酶 A和 C，導(dǎo)致磷脂、磷脂酰肌醉在溶酶體內(nèi)菖積，溶酶體由于磷脂的沉積，最后破裂而致細(xì)胞損傷。 2．操作方法 Wistar雄性大鼠，體重 250— 300g，腹腔注射慶大霉素 140mg／kg(體重 )，共 7日，治療組動(dòng)物注射的同時(shí)給藥物；陽(yáng)性藥用維拉帕米，每大鼠每日灌胃 15mg／ kg(體重 )；空白對(duì)照則給溶劑。 (2)BUN、 Scr，血清總白和白蛋白，血清 K和 Na。 (4)病理組織學(xué)檢查?；颊叨嘁?jiàn)倦怠乏力、氣短懶言、納差腹脹、惡心嘔吐、四肢麻木、皮膚瘙癢、腰腿酸軟、面色晦暗、肌膚甲錯(cuò)、舌淡有齒痕或色紫暗并有瘀斑、舌苔白滑或厚膩、脈沉弱?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)則以改善腎功能，促進(jìn)氮質(zhì)化合物等毒素的排出，糾正水、電解質(zhì)和酸堿紊亂，糾正貧血等方法以延緩病程進(jìn)展。 (2)大鼠 5／ 6腎切除的 CRF模型：經(jīng)兩期外科手術(shù)切除大鼠 5／ 6腎造成的CRF。 (4)小鼠電凝摘除腎臟 CRF模型：以電燒灼小鼠右側(cè)腎表面， 2星期后摘除左腎的外科手術(shù)制作的模型。根據(jù)新藥可能的作用機(jī)制特點(diǎn)選擇適當(dāng)?shù)哪Ｐ汀? 2 觀察指標(biāo) (1)各組動(dòng)物血液毒素物質(zhì)的比較 :一般認(rèn)為尿毒癥毒素物質(zhì)應(yīng)具備以下幾個(gè)條件：①該物質(zhì)的理化性質(zhì)和結(jié)構(gòu)明確；②血液中的濃度增高；③該物質(zhì)與 CRF特定的臨床發(fā)現(xiàn)相關(guān)；④隨血液中該物質(zhì)濃度降低，臨床癥狀和體癥改善；⑤在腎功正常的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中能用該物質(zhì)復(fù)制與 CRF類似的臨床癥狀。凡是公認(rèn)為 CRF毒素物質(zhì)應(yīng)當(dāng)是反應(yīng)新藥療效最主要的指標(biāo)，目前臨床和評(píng)價(jià)藥效多用的觀察指標(biāo)是肌酐、尿素氮。 (二 )相關(guān)藥效學(xué)試驗(yàn) 1．血壓試驗(yàn) 按常規(guī)方法觀察藥物對(duì)大鼠血壓的影響。 (三 )陽(yáng)性對(duì)照藥 1．包醛氧淀粉或愛(ài)西特 (活性炭 ) 適用于以吸附腸道毒素來(lái)促進(jìn)毒裹排除、緩解癥狀的新藥。 3．地塞米松 地塞米松 0． 1mg／ kg(體重 )肌內(nèi)注射，每日一次，屬非特異性作用，可減輕病情。 2．制作方法 用含 0． 75％腺嘌吟 (adenine)飼料喂養(yǎng)大鼠，每日投放量約350mg／ kg(體重 )。 3．造模成功的指標(biāo)和藥物療效觀察 大鼠隨著進(jìn)食腺嘌吟飼料的日數(shù)增加而日漸消瘦，畏寒拱背，體毛脫落，生長(zhǎng)抑制．多尿；血肌酐、尿素氮水平升高(喂飼 2星期后可見(jiàn)升高 )；中分子物質(zhì)水平升高；電解質(zhì)代謝紊亂 (高磷、高鉀、低鈉、低鈣等 )；氨基酸紊亂 (主要為必需氨基酸降低 )；貧血。 藥物療效觀察： (1)一般觀察：動(dòng)物的體重、尿量、體毛和 — 般活動(dòng)狀況。 (3)尿液檢查： 24h尿量及尿蛋白總量。 4．注意點(diǎn) (1)為了減少差異，最好用雄性動(dòng)物。 (4)亦可配成含 0． 5%腺嘌呤的飼料。 2．制作方法 大鼠用戊巴比妥鈉 3035mg/kg體重腹注射麻醉，局部剪毛，常規(guī)皮膚消毒，背左側(cè)或腹部切口，充分暴露左側(cè)腎肌，剝離腎包膜，迅速切除上、下極，以明膠海綿壓迫止血．然后分層縫合。 3. 造模成功的指標(biāo)和藥物療效觀察 大鼠傷口應(yīng)無(wú)出血和感染，術(shù)后大鼠體重明顯下降，食量，活動(dòng)量均減少，體毛疏松不齊，術(shù)后 7日可山現(xiàn)蛋白尿； BUN、Scr水平逐漸升高；電解質(zhì)紊亂；氨基酸代酣紊亂；貧血；組織病理學(xué)觀察。 藥物的療效觀察基本同腺嘌呤。 (2)手術(shù)注意防止損傷腎上腺；摘除腎臟時(shí)要結(jié)腎蒂。 (4)如果用藥時(shí)間長(zhǎng)或需要損傷程度輕，可在手術(shù)前用低蛋白飼料。 (三 )大鼠經(jīng)液氮冷凍腎臟引起的 CRF模型 1 原理 與大鼠 5／ 6腎切除的 CRF模型基本相同。將預(yù)先浸入液氮瓶?jī)?nèi)的冷刀依次在腎臟的上下極和外側(cè)前后共 4個(gè)位，每處冷凍 40s，然后復(fù)位腎臟，分層縫合。術(shù)后 6— 12星期呈現(xiàn)穩(wěn)定的模型。 4 注意 用該模型評(píng)價(jià)新藥藥效成功的關(guān)鍵是冷凍損傷腎臟的程度要適當(dāng)，多人操作，應(yīng)冷凍損傷度一致。 2．制作方法 小鼠麻醉后，背右側(cè)切口 0． 8cm，暴腎臟，剝離周圍脂肪組織及腎包膜，用電燒灼電凝右腎表面，深度約 1mm，保留距腎門周圍2