12基因工程的基本操作程序_2(完整版)
【正文】 的質(zhì)粒中插入 終止子 (抗蟲(chóng)基因末端 )，導(dǎo)入棉花受精卵，結(jié)果成長(zhǎng)的植株，有了抗蟲(chóng)能力。 （ 2）基因槍法 適用于 單子葉植物 （ 3）花粉通道法 植物花粉在柱頭上萌發(fā)后，花粉管要穿過(guò)花柱直通胚囊。 尋根問(wèn)底： 。 適用于 被子植物 （ 1）方法：顯微注射法 （將基因表達(dá)載體提純，用顯微儀注射到 受精卵 中） （ 2）操作程序 : 提純含目的基因表達(dá)載體 取受精卵 顯微注射 移植到子宮 受精卵發(fā)育 新性狀動(dòng)物 常用法 ： Ca2+處理 常用菌 ：大腸桿菌 微生物作受體細(xì)胞原因： 繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)少 過(guò)程： Ca2+處理大腸桿菌 感受態(tài)細(xì)胞 表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合 感受態(tài)細(xì)胞吸收 DNA 思考：為什么要用Ca2+處理受體細(xì)胞？ 用 Ca2＋ 處理，增加細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性 受精卵 體細(xì)胞 受精卵 細(xì)胞 /個(gè)體 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 基因槍法 花粉管通道法 顯微注 射技術(shù) 用 Ca2+處理成感受態(tài)細(xì)胞 采用基因工程的方法培育抗蟲(chóng)棉，下列導(dǎo)入目的基因的作法正確的是（ ） DNA序列，與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入細(xì)菌，用該細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞，再進(jìn)行組織培養(yǎng) DNA序列，與質(zhì)粒重組，注射到棉的子房并進(jìn)入受精卵 DNA序列，注射到棉受精卵中 四、目的基因的檢測(cè)與鑒定 ? 檢測(cè) : ? 是否插入目的基因 ? 是否轉(zhuǎn)錄 ? 是否翻譯 ? 鑒定 : ? 分子水平鑒定 ? 個(gè)體生物學(xué)水平鑒定 檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的 DNA上是否插入了目的基因 ① 首先取出轉(zhuǎn)基因生物的基因組 DNA； （ 1）方法 : DNA分子雜交 （ 2）過(guò)程 : ② 將含目的基因的 DNA片段用放射性同位素等作標(biāo)記 ,以此做 探針 ； ③ 使探針和轉(zhuǎn)基因生物的基因組雜交 ,若顯示出雜交帶 ,表明染色體已插入染色體 DNA中。 思考： 終止子的作用是什么？ 終止子是位于基因尾端的一段特殊的 DNA片斷，能終止 mRNA的轉(zhuǎn)錄。 ? （ 2） 反轉(zhuǎn)錄法 （ cDNA文庫(kù)的構(gòu)建方法 ） （ 3）根據(jù)已知的氨基酸序列合成 DNA法 ： 蛋白質(zhì)的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列 推測(cè) 推測(cè) 目的基因 化學(xué)合成 上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點(diǎn)？ 操作簡(jiǎn)便廣泛使用 工作量大，盲目，分離出來(lái)的有時(shí)并非一個(gè)基因 專一性強(qiáng) 操作過(guò)程麻煩，mRNA
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