【正文】 粒 （裂解后）VG1(pTU14)中 SRRz 基因的表達(dá)5 h58 h37 h11 hPHB 大量積累時(shí)VG1(pTU14)細(xì)胞的自動(dòng)裂解Magnification： 160050 h在優(yōu)化條件下，經(jīng)過(guò) 60小時(shí)的補(bǔ)料分批培養(yǎng)， VG1(pTU14)的細(xì)胞干重達(dá)到： 216g/L ， PHB濃度： 194g/L， PHB占細(xì)胞干重： 90 % — 達(dá)到了國(guó)際上文獻(xiàn)報(bào)道的高指標(biāo) ?？山档头蛛x回收的成本，且提高了 PHB產(chǎn)品的質(zhì)量。這方面的報(bào)道也很少利用溫和性噬菌體裂解細(xì)胞壁利用溫和性噬菌體感染細(xì)胞 ,獲得溶源菌 ,進(jìn)而通過(guò)外在條件的變化來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞裂解 ,這種破細(xì)胞壁的方法 ,由于其可控 ,所以相對(duì)于用烈性噬菌體裂解細(xì)胞的方法來(lái)說(shuō)更具有吸引力。n 這為基因工程的作用賦予了新的含意，即用基因工程來(lái)解決化學(xué)工程問(wèn)題。 又一例生化工程問(wèn)題n 傳統(tǒng)的細(xì)胞破碎方法有：n機(jī)械法、n溶劑萃取法、n化學(xué)試劑法、n酶法，等等。尤其為了提高產(chǎn)品的產(chǎn)量和降低生產(chǎn)成本進(jìn)行大規(guī)模、高密度培養(yǎng)時(shí)，氧的供給和傳遞問(wèn)題就更加突出。目前，生物化工工作者，通常是通過(guò)物理或化學(xué)的方法來(lái)解決這些問(wèn)題的。n 又例如：生物化工中，大多數(shù)基因工程產(chǎn)品是胞內(nèi)產(chǎn)物，即：產(chǎn)物積累在細(xì)胞內(nèi)。n 廢物、廢水的 處理問(wèn)題。利用 烈性噬茵體裂解細(xì)胞壁在菌體中添加烈性噬菌體可以有效地裂解細(xì)胞 ,破細(xì)胞壁。Rz 基因的產(chǎn)物可能是一種肽鏈內(nèi)切酶(endopeptidase) ,它可以切割肽聚糖的寡糖之間和 /或者肽聚糖與細(xì)胞壁外膜之間的交聯(lián)。透明顫菌血紅蛋白（ VHb） 及其基因（ vgb）VHb含 146個(gè)氨基酸殘基，有兩個(gè)相對(duì)分子量為 15775的亞基。化學(xué)農(nóng)藥的施用在減少蟲(chóng)害的同時(shí)引起一系列副作用 ,如提高成本、污染環(huán)境、誘導(dǎo)害蟲(chóng)產(chǎn)生抗藥性、引起次要害蟲(chóng)的大發(fā)生等。 1. 抗蟲(chóng)基因? 來(lái)源于微生物的抗蟲(chóng)基因? 蘇云金桿菌毒蛋白基因 (Bt基因 ) ? Bt是蘇云金桿菌 Bacillus thuringiensi的簡(jiǎn)稱 ,是一種革蘭氏陽(yáng)性土壤芽胞桿菌 ,其殺蟲(chóng)毒性來(lái)自芽孢形成時(shí)所產(chǎn)生的具有 高度特異性 殺蟲(chóng)活性的晶體蛋白 ,通常稱為蘇云金桿菌毒蛋白 (Bt toxic protein) 、 殺蟲(chóng)結(jié)晶蛋白 (insecticidal crystal protein,ICP) 、 δ內(nèi)毒素等。由中國(guó)農(nóng)科院生物工程中心開(kāi)發(fā)的 Bt棉對(duì)棉鈴蟲(chóng)有顯著的抗性。昆蟲(chóng)體內(nèi)的蛋白酶負(fù)責(zé)食物中蛋白質(zhì)的消化 ,將蛋白酶抑制劑基因引入植物,即可通過(guò)影響昆蟲(chóng)的消化作用而致昆蟲(chóng)死亡 。目前的工作主要是試圖分離鑒定那些僅在或主要在纖維細(xì)胞內(nèi)表達(dá)基因。? 導(dǎo)入的抗蟲(chóng)基因翻譯水平不高是普遍存在的問(wèn)題 ,因此 ,如何提高外源抗蟲(chóng)基因在植物體內(nèi)的表達(dá) ,是植物抗蟲(chóng)基因工程的一個(gè)重要研究方向。? Perlak等對(duì) WTcryⅠ A(b)（ 野生型）的 AT富含區(qū)進(jìn)行點(diǎn)突變 ,改變其中 63個(gè)堿基對(duì) ,AT含量由 63%下降至 59%,而 ATTTA重復(fù)序列也從 13個(gè)減少至 7個(gè) ,部分改造后的基因稱為 PM cryⅠ A(b)。? 抗蟲(chóng)基因的基因沉默? 目前 ,已發(fā)現(xiàn)基因沉默與轉(zhuǎn)基因在受體植物中 甲基化狀況，轉(zhuǎn)基因的 拷貝數(shù) ， 插入 受體植物染色體 位點(diǎn)及轉(zhuǎn)基因 是否 與受體植物 存在同源基因 等因素有關(guān)。雖然昆蟲(chóng)對(duì)轉(zhuǎn)基因植物的抗性發(fā)展緩慢 ,但也是一個(gè)不容忽視的問(wèn)題。 生物芯片 (biochip) 指通過(guò)微細(xì)加工工藝在固體芯片表面構(gòu)建的微型化學(xué)分析系統(tǒng) ,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞、蛋白質(zhì)、 DNA以及其他生物組分的準(zhǔn)確快速與大信息量的檢測(cè)。此外，噴印法不需特殊的合成試劑。基因芯片的應(yīng)用? （三）疾病的診斷與治療　人類的疾病與遺傳基因密切相關(guān)，基因芯片可以對(duì)遺傳信息進(jìn)行快速準(zhǔn)確的分析，因此它在疾病的分子診斷中的優(yōu)勢(shì)是不言而喻的，就臨床一種新的、強(qiáng)有力的分子工具?；蛐酒脖挥糜趯ふ业鞍准っ敢种莆铩０l(fā)現(xiàn)用 FK506處理的酵母細(xì)胞基因表達(dá)圖譜與 FK506靶標(biāo)的無(wú)意義突變體相似而用 FK506去處理此突變體，發(fā)現(xiàn)了不同于野生型的作用機(jī)制。 。尤其是慢性毒性和副作用，往往涉及基因或基因表達(dá)的改變。藥物研究中的應(yīng)用? 1 新藥開(kāi)發(fā)　高通量的 DNA芯片可發(fā)現(xiàn)眾多的新基因和新的靶分子用于新藥的設(shè)計(jì)?；蛐酒膽?yīng)用（四）藥物研究中的應(yīng)用從經(jīng)濟(jì)效益來(lái)說(shuō)，最大的應(yīng)用領(lǐng)域可能是制藥廠用來(lái)開(kāi)發(fā)新藥。點(diǎn)樣分子可以是核酸也可以是寡核酸。它是指在固相載體上按照特定的排列方式固定上大量的 DNA片斷，形成 DNA微矩陣。? 由此看來(lái) ,昆蟲(chóng)的抗性是抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因工程中較為嚴(yán)重的潛在問(wèn)題 ,因此如何防止或延緩害蟲(chóng)產(chǎn)生抗性 ,這已經(jīng)成為植物抗蟲(chóng)基因工程的另一重要研究?jī)?nèi)容。采用低拷貝數(shù) (最好是單拷貝 )的載體 。? 進(jìn)一步在不改變編碼的氨基酸序列的前提下 ,幾乎更換掉 WT基因中的所有不穩(wěn)定元件 ,同時(shí)盡可能將其中的密碼子換成植物優(yōu)化密碼子 ,AT含量下降至51%,去掉所有 ATTTA序列。? 1 .對(duì)非必需區(qū)段進(jìn)行缺