基因工程制下ppt課件(完整版)
【正文】 余抗生素活性測定 （ 9）紫外光譜掃描：最大吸收峰應(yīng)為 280+2nm （ 10）肽圖測定：用 CNBr裂解法 （ 12）等電點(diǎn)測定：用等電聚焦法 成品檢定 （ 1）物理形狀：凍干制品為白色或?yàn)辄S色疏松體，加水后不含有肉眼可見的不溶物。 體內(nèi)測定：建立合適的動(dòng)物模型 體外測定：細(xì)胞培養(yǎng)計(jì)數(shù)法、 3HT α R摻入法等。thrich）（瑞士蘇黎士聯(lián)邦理工學(xué)院）教授的貢獻(xiàn)是把核磁共振（ NMR）分析方法應(yīng)用到了生物大分子 (蛋白質(zhì)和核酸 )的結(jié)構(gòu)研究中，建立了一套完整的確定生物大分子空間結(jié)構(gòu)的方法。 ② 雙向?qū)蔷€ SDSPAGE：既無鏈內(nèi)又無鏈間二硫鍵的分子位于對角線上 (兩向電泳中分子遷移率相等 ) 。 ： （ 1） 肽圖分析 ：用酶法或化學(xué)法降解目的蛋白質(zhì)，對生成的肽段進(jìn)行分離分析。 可溶性蛋白，誘導(dǎo)后 2，3， 4， 5， 6小時(shí)后，目的蛋白的表達(dá)量 包含體，誘導(dǎo)后 2， 3， 4， 5，6小時(shí)目的融合蛋白表達(dá)量 第八節(jié) 基因工程藥物的分離純化 （ 三 ） 初步分離 ： 離心 ， 超離心 ： 酶法 DNase,RNase；超聲 ： 丙酮 ， 脂肪酶 （ 四 ） 粗分蛋白 ： NaCl， (NH4)2SO4沉淀 ： 甲醇 ， 乙醇 ， 丙酮 ： 除去雜蛋白 ： 除去雜蛋白 （ 五 ） 除鹽 4 層析一般步驟 ： 處理介質(zhì) ↓ 裝柱 ↓ 平衡 ↓ 上樣 ↓ 洗滌 ↓ 洗脫 ↓ 介質(zhì)再生 3 注意問題 ： (1) 緩沖液的選擇 ： 陽離子： Tris 陰離子：磷酸鹽 ， 檸檬酸鹽 (2) 介質(zhì)處理 ： 陽離子： Na+ 型 陰離子： Cl 型 (3) 洗脫 ： ?原理： i改變鹽濃度 ii改變 pH值 ?方式： i連續(xù)洗脫 ii梯度洗脫 (4) 介質(zhì)再生
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