農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法的概述(完整版)
【正文】 寄主細(xì)胞染色體上的整合是隨機(jī)的，但對轉(zhuǎn)錄活化區(qū)域有所偏好。的內(nèi)切酶活性，它可以識別TDNA底鏈邊界重復(fù)序列上的特定位點(diǎn)，并在底鏈24蛋白是DNA如乙酰丁香酮（As）。TR區(qū)可進(jìn)行改造，這樣Ri通過農(nóng)桿菌細(xì)胞膜特定“孔道”進(jìn)入宿主植物細(xì)胞核，進(jìn)而使TDNA整合到植物基因組中。這些基因也稱為Ti質(zhì)粒編碼毒性基因(vir)。region)：不同來源的菌株，TDNA的長度在12~24關(guān)鍵詞：農(nóng)桿菌 轉(zhuǎn)化方法 轉(zhuǎn)化效率1 學(xué)年第學(xué)期2014級碩士生生物化學(xué)期末論文 任課老師： 開課學(xué)院： 課程名稱： 學(xué) 院： 專 業(yè)： 學(xué) 號： 姓 名： 2015年6月20日農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法的概述摘要：自從1983年轉(zhuǎn)基因植物誕生以來，植物基因工程成為發(fā)展最快、應(yīng)用潛力最大的生物技術(shù)領(lǐng)域之一。關(guān)于農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌[35]是普遍存在于土壤中的一種革蘭氏陰性細(xì)菌，它能在自然條件下趨化性的感染大多數(shù)雙子葉植物的受傷部位，并誘導(dǎo)產(chǎn)生冠癭瘤或發(fā)狀根。kb，它是在農(nóng)桿菌侵染細(xì)胞時(shí)，從Ti質(zhì)粒上切割下來轉(zhuǎn)移到植物基因組中的一段DNA，其攜帶的基因與腫瘤的形成有關(guān)，但與TDNA本身的轉(zhuǎn)移與整合無關(guān)．TDNA上最重要的是TDNA區(qū)兩端的邊界各為25目前，對章魚堿型農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒pTi15955和胭脂堿型農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒pTiC58的vir區(qū)進(jìn)行了全序列分析，在章魚堿型Ti質(zhì)粒的vir區(qū)發(fā)現(xiàn)了8個(gè)操縱子，分別為virAvjrH，共包括23個(gè)基因(virA，virB1virB11，virC1，virC2，virD1virD4，virE1，virE2，virF，virG，virH)．而胭脂堿型Ti質(zhì)粒的vir區(qū)不含vjrF和virH操縱子，它含有另一個(gè)基因tzs發(fā)根農(nóng)桿菌2當(dāng)農(nóng)桿菌接受到此類信號時(shí)，其vir區(qū)基因可被誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄。結(jié)合活化蛋白，可以以二體或多體形式結(jié)合到vir啟動子的特定區(qū)域，從而成為其它vir基因轉(zhuǎn)錄的激活因子，打開VirB、virC、virD、virE、virH等幾個(gè)基因。bp重復(fù)序列和第四個(gè)堿基之間切割，將TDNA從Ti質(zhì)粒上剪切下來，稱T鏈。TDNA通過與事先斷裂的寄主DNA雙鏈(DSB)發(fā)生重組來完成整合，進(jìn)而進(jìn)行表達(dá)。現(xiàn)將農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物遺傳轉(zhuǎn)化常采用的方法[9]，簡要介紹如下：結(jié)果顯示，TDNA向禾本科植物中的轉(zhuǎn)化沒有明顯障礙，但人們對整合過程的了解十分有限，同時(shí)存在相當(dāng)大的爭議。al許多研究表明，農(nóng)桿菌介導(dǎo)單子葉植物遺傳轉(zhuǎn)化已具備了與雙子葉植物相似的農(nóng)桿菌本身的必要條件，但單子葉植物的轉(zhuǎn)化相比較而言困難得多，這可能不僅是農(nóng)桿菌一方的因素，單子葉植物的植物因子也可能起著關(guān)鍵作用，也不排除農(nóng)桿菌和這些植物因子的相互作用[14]。1997；Liualet6安徽農(nóng)
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1