乳酸菌的分離、純化與鑒定(完整版)
【正文】 灰白色或暗黃色；在產(chǎn)酸菌落周圍還能產(chǎn)生CaCO3的溶解圈。 生理鹽水：稱取9g氯化鈉，溶解在少量蒸餾水中，稀釋到1000毫升。 結(jié)晶紫：結(jié)晶紫乙醇飽和液（結(jié)晶紫2g溶于20ml 95%乙醇中）20ml，1%草酸氨水溶液80ml。將兩液混勻，放置24小時后過濾即可。 取1潔凈三角瓶，盛以225ml生理鹽水；7只潔凈試管，各盛9ml的生理鹽水；加塞包扎于在103kPa 121℃高壓蒸汽滅菌20Min，得到無菌生理鹽水。40℃培養(yǎng)48h，如出現(xiàn)圓形稍扁平的黃色菌落及其周圍培養(yǎng)基變?yōu)辄S色者初步定為乳酸菌?！ ∪旧椒ǎ和科潭?；草酸銨結(jié)晶紫染1分鐘；自來水沖洗；加碘液覆蓋涂面染約1分鐘；水洗，用吸水紙吸去水分；加95%酒精數(shù)滴，并輕輕搖動進(jìn)行脫色，20秒后水洗，吸去水分；蕃紅染色液（?。┤?分鐘后，自來水沖洗。 蛋白胨、酵母膏、葡萄糖（PGY）培養(yǎng)基：蛋白胨10g，酵母膏5g ，葡萄糖1g，蒸餾水1L 。 3）.觀察記錄：與對照管比較，若接種培養(yǎng)液保持原由顏色，其反映結(jié)果為陰性；如果培養(yǎng)液呈黃色，反映結(jié)果為陽性。溶化后調(diào)pH ~，121176。(8)石蕊牛奶的反應(yīng) 牛奶中主要含有乳糖和酪蛋白，在牛奶中加入石蕊是作為酸堿指示劑和氧化還原指示劑。 (5).乳酸的檢測 選用已經(jīng)分離的菌種做小型發(fā)酵實驗，取發(fā)酵液的上清液約10 ml于試管中，加入10%硫酸1 ml ,再加2%高錳酸鉀 1 ml ,此時乳酸轉(zhuǎn)化為乙醛，把事先在含氨的硝酸銀溶液中侵泡的濾紙條搭在試管口中，微火加熱試管至沸，觀察濾紙變化。(3)吲哚試驗 1）.試管標(biāo)記：取裝有蛋白胨水培養(yǎng)基的試管2支，分別標(biāo)記乳酸菌和空白對照。 (1)耐鹽性試驗(NaCl 濃度:0. 85 、1. 20 和1. 71) (mol/ L) 。 發(fā)酵：觀察BCG培養(yǎng)基中乳酸菌菌落特征，選取長勢比較好的菌落無菌操作下將乳酸菌接種于裝有脫脂乳的試管中
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