【正文】 ______、 ________和 _________. 10．今有甲、乙、丙三種蛋白質(zhì)，它們的等電點分別為 、 ,當(dāng)在 ，它們在電場中電泳的情況為：甲 _______，乙 _______，丙 ________。 2．大多數(shù)蛋白質(zhì)中氮的含量較恒定，平均為 ___%，如測得 1克樣品含氮量為 10mg, 則蛋白質(zhì)含量為 ____%。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)處在某一 pH值溶液中時，它所帶的正負電荷數(shù)相待，此時的蛋白質(zhì)成為 _________，該溶液的 pH值稱為蛋白質(zhì)的 __________。 ，又稱凝膠過濾。蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)改變隨其功能的變化，構(gòu)象決定功能。使肽鍵中的CN 鍵具有部分雙鍵性質(zhì)，不能自由旋轉(zhuǎn)，因此。 ③ 以蛋白質(zhì)的別構(gòu)效應(yīng)和變性作用為例說明蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系： ，某物質(zhì)與蛋白質(zhì)結(jié)合，引起蛋白質(zhì)構(gòu)象改變，導(dǎo)致功能改變。 ３、透析：利用透析袋把大分子蛋白質(zhì)與小分子化合物分開的方法。 D．每個氨基酸殘基上升高度為 . 4．下列氨基酸中哪一種不具有旋光性？ A． Leu B． Ala C． Gly D． Ser E． Val 5．下列關(guān)于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的敘述，哪一項是錯誤的？ A．氨基酸的疏水側(cè)鏈很少埋在分子的中心部位 B．電荷的氨基酸側(cè)鏈常在分子的外側(cè)，面向水相 C．蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)在決定高級結(jié)構(gòu)方面是重要因素之一 D．蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)主要靠次級鍵維持 6．持蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要作用力是： A．鹽鍵 B．疏水鍵 C．氫鍵 D．二硫鍵 7．維持蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的因素是： A．肽鍵 B．二硫鍵 C．離子鍵 D．氫鍵 E．次級鍵 8. 下列哪項與蛋 白質(zhì)的變性無關(guān)？ A. 肽鍵斷裂 B．氫鍵被破壞 C．離子鍵被破壞 D．疏水鍵被破壞 9．蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)是指： A．蛋白質(zhì)氨基酸的種類和數(shù)目 B．蛋白質(zhì)中氨基酸的排列順序 C．蛋白質(zhì)分子中多肽鏈的折疊和盤繞 D．包括 A,B和 C 三、多項選擇題 （在備選答案中有二個或二個以上是正確的，錯選或未選全的均不給分） 1．含硫氨基酸包括： A．蛋氨酸 B．蘇氨酸 C．組氨酸 D．半胖氨酸 2．下列哪些是堿性氨基酸： A．組氨酸 B．蛋 氨酸 C．精氨酸 D．賴氨酸 3．芳香族氨基酸是： A．苯丙氨酸 B．酪氨酸 C．色氨酸 D．脯氨酸 4．關(guān)于α 螺旋正確的是： A．螺旋中每 3． 6個氨基酸殘基為一周 B．為右手螺旋結(jié)構(gòu) C．兩螺旋之間借二硫鍵維持其穩(wěn)定 D．氨基酸側(cè)鏈 R基團分布在螺旋外側(cè) 5．蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)包括： 生物化學(xué)重點總結(jié) 5 A．α 螺旋 B．β 片層 C．β 轉(zhuǎn)角 D．無規(guī)卷曲 6．下列關(guān)于β 片層結(jié)構(gòu)的論述哪些是正確的： A．是一種伸展的肽鏈結(jié)構(gòu) B．肽鍵平面折疊成鋸齒狀 C．也可由兩條以上多肽鏈順向或逆向平行排列而成 D．兩鏈 間形成離子鍵以使結(jié)構(gòu)穩(wěn)定 7．維持蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)的主要鍵是： A．肽鍵 B．疏水鍵 C．離子鍵 D．范德華引力 8．下列哪種蛋白質(zhì)在 pH5的溶液中帶正電荷？ A． pI 為 4． 5 的蛋白質(zhì) B． pI 為 7． 4的蛋白質(zhì) C． pI 為 7的蛋白質(zhì) D． pI 為 6． 5的蛋白質(zhì) 9．使蛋白質(zhì)沉淀但不變性的方法有： A．中性鹽沉淀蛋白 B．鞣酸沉淀蛋白 C．低溫乙醇沉淀蛋白 D．重金屬鹽沉淀蛋白 10．變性蛋白質(zhì)的特性有： A．溶解度顯著下降 B．生物學(xué)活性喪失 C．易被蛋白酶水解 D．凝固或沉淀 四、填空題 1．組成蛋白質(zhì)的主要元素有 _________， ________， _________， _________。 8．按照分子形狀分類，蛋白質(zhì)分子形狀的長短軸之比小于 10 的稱為 _______，蛋白質(zhì)分子 形狀的長短軸之比大于 10 的稱為 _________。 7．α 螺旋結(jié)構(gòu) 是由同一肽鏈的 _______和 ________間的 ___鍵維持的，螺距為 ______, 每圈螺旋含_______個氨基酸殘基，每個氨基酸殘基沿軸上升高度為 _________。 ( ) 4．一氨基一羧基氨基酸的 pI 為中性，因為 COOH 和 NH2 的解離度相同。 2．必需氨基酸：指人體（和其它哺乳動物）自身不能合成，機體又必需，需要從飲食中獲得的氨基酸。一種構(gòu)象改變?yōu)榱硪环N構(gòu)象時，不涉及共價鍵的斷裂和重新形成。 15．超二級結(jié)構(gòu)：指蛋白質(zhì)分子中相鄰的二級結(jié)構(gòu)單位組合在一起所形成的有規(guī)則的、在空間上能辨認的二級結(jié)構(gòu)組合體。蛋白質(zhì)在受到光照、熱、有機溶劑以及一些變性劑的作用時，次級鍵遭到破壞導(dǎo)致天然構(gòu)象的破壞，但其一級結(jié)構(gòu)不發(fā)生改變。 4．錯：α 碳和羧基碳之間的鍵是 C— C 單鍵，可以自由旋轉(zhuǎn)。 9．錯：一氨基一羧基氨基酸為中性氨基酸，其等電點為中性或接近中性，但氨基和羧基的解離度，即 pK值不同。水解產(chǎn)物為黃色的 N端 DNP氨基酸和各種游離氨基酸。 18．錯：二硫鍵是由兩個半胱氨酸的巰基脫氫氧化而形成的，所以兩個半胱氨酸只能形成一個二硫鍵。 24．錯：蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性是由鏈內(nèi)氫鍵維持的，如α 螺旋結(jié)構(gòu)和β 折疊結(jié)構(gòu)中的氫鍵均起到穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的作用。 （ 2）α 螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定主 要靠鏈內(nèi)氫鍵，每個氨基酸的 N— H與前面第四個氨基酸的 C＝ O 形成氫鍵。一級結(jié)構(gòu)相同的蛋白質(zhì)，其功能也相同，二者之間有統(tǒng)一性和相適應(yīng)性。 （ 3）運輸功能 如血紅蛋白具有運輸氧的功能。 9．答：（ a）異硫氫酸苯酯；（ b）丹黃酰氯；（ c）脲、β 巰基乙醇；（ d）胰凝乳蛋白酶；（ e） CNBr。 １、堿基： NH2 NH2 O CH3 O O O O O NH2 胞嘧啶 胸腺嘧啶 尿嘧啶 鳥嘌呤 腺嘌呤 嘌呤和嘧啶環(huán)中均含有共軛雙鍵，因此對波長 260nm 左右的紫外光有較強吸收，這一重要的理化性質(zhì)被用于對核酸、核苷酸、核苷及堿基進行定性定量分析。帽子和多聚尾 A的功能： mRNA核內(nèi)向胞質(zhì)的轉(zhuǎn)化、 mRNA的穩(wěn)定性維系、翻譯起始的調(diào)控 Ⅱ mRNA 功能：從 DNA 轉(zhuǎn)錄遺傳信息，是蛋白質(zhì)合成的模板 把核內(nèi) DNA 的堿基順序，按照堿基互補的原則，抄錄并轉(zhuǎn)送至胞質(zhì)，以決定 蛋白質(zhì)合成的氨基酸排列順序。其中 ________又可分為 ________堿和__________堿。 8． tRNA的三葉草型結(jié)構(gòu)中，其中氨基酸臂的功能是 _________，反密碼環(huán)的功能是 ___________。 （ ） 8． mRNA 是細胞內(nèi)種類最多、含量最豐富的 RNA。 5．錯：生物體的不同組織中的 DNA，其堿基組成也不同。 13．對：生物體內(nèi)，負超螺旋 DNA容易解鏈，便于進行復(fù)制、轉(zhuǎn)錄等反應(yīng)。 20．對：真核生物成熟 mRNA的 5’為帽子結(jié)構(gòu)，即 m7G（ 5’） PPP（ 5’） Nm，因此兩 5’端也是 3’ OH。 3．答：（ 1）設(shè) DNA的兩條鏈分別為α和β，那么： A =β T， Tα =Aβ， Gα =Cβ，： Cα =Gβ， 因為， (Aα + Gα )/（ Tβ + Cβ） = (Aα + Gα )/（ Aβ + Gβ） = 所以，互補鏈中（ Aβ + Gβ） /（ Tβ + Cβ） = 1/ = （ 2）在整個 DNA分子中，因為 A = T， G = C， 所以， A+G = T+C，（ A+G） /（ T+C） = 1 （ 3）假設(shè)同（ 1），則 Aα + Tα = Tβ + Aβ， Gα + Cα = Cβ +Gβ， 所以，（ Aα + Tα） /（ Gα +Cα） =（ Aβ + Tβ） /（ Gβ +Cβ） = （ 4）在整個 DNA分子中 （ Aα + Tα + Aβ + Tβ） /（ Gα +Cα + Gβ +Cβ） = 2（ Aα + Tα） /2（ Gα +Cα） = 4．答：將 DNA的稀鹽溶液加熱到 70～ 100℃幾分鐘后，雙螺旋結(jié)構(gòu)即發(fā)生破壞，氫鍵斷裂，兩條鏈彼此分開，形成無規(guī)則線團狀，此過程為 DNA 的熱變性，有以下特點：變性溫度范圍很窄 ， 260nm 處的紫外吸收增加；粘度下降；生物活性喪失；比旋度下降；酸堿滴定曲線改變。維持 DNA結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的力量主要是堿基堆積力；雙螺旋結(jié)構(gòu)表面有兩條螺形凹溝，一大一小。在它的中部含有三個相鄰堿基組成的反密碼子，可與 mRNA上的密碼子相互識別。 RNA能夠被水解，而 DNA不被水解。靜電吸附與非極性吸附共同作用的結(jié)果使洗脫順序為：CMPAMPUMPGMP。催化基團：催化底物變成產(chǎn)物 ①高效性：酶的催化作用可是反應(yīng)速度提高 106 到 1012次方，反應(yīng)前后酶本身無變化 ②專一性（對底物具有選擇性）：Ⅰ絕對專一性：酶對底物要求非常嚴格，只作用于一個特定的底物；Ⅱ相對專一性：作用對象不是一種底物，而是一類化合物或化學(xué)鍵；Ⅲ立體異構(gòu)體專一性： D、 L，順反，α /β . ③ 酶活性對環(huán)境因素的敏感性 ④ 酶活性可調(diào) 節(jié)控制：Ⅰ別構(gòu)調(diào)節(jié)；Ⅱ反饋調(diào)節(jié)；Ⅲ供價修飾調(diào)節(jié)；Ⅳ酶原激活及激素控制 ⑤ 某些酶催化活力與輔酶因子有關(guān) ⑥ 酶的區(qū)域性分布（多在線粒體）：有利于酶活性的調(diào)控 ： 酶表面并沒有一種與底物互補的固定形狀，而只是由于底物的誘導(dǎo)才形成了互補的形狀①底物誘導(dǎo)酶分子，構(gòu)象改變②底物和酶分子都發(fā)生構(gòu)象改變 ㈠測定化學(xué)反應(yīng)速度 :測定初速度（測定底物消耗小于 5%反應(yīng)時段內(nèi)的平均速度） ㈡底物濃度對酶促反應(yīng)速度的影響： ① 反應(yīng)速度最大：底物濃度﹥﹥酶濃度 K1 K3 生物化學(xué)重點總結(jié) 22 ② 中間產(chǎn)物學(xué)說 E（酶） +S（底物） ? ES（中間復(fù)合物）→ E+P（游離酶產(chǎn)物） K2 中間產(chǎn)物學(xué)說 ：酶催化時，酶活性中心首先與酶底物結(jié)合生成一種酶和一種底物的復(fù)合物，此復(fù)合物再分解釋放出酶并釋放出產(chǎn)物 米氏方程 ： V=Vmax [S] ／﹙ Km＋ [S] ﹚ ⑴當(dāng)?shù)孜餄舛群艽髸r ([S] ≥ 10 Km﹚ ,酶對底物飽和，反應(yīng)速度達到最大 ⑵ 當(dāng)反應(yīng)速度 V=1/2Vmax時， Km=[S] ㈢米氏方程中動力學(xué)參數(shù) Km 的意義★ ① Km 在數(shù)值上等于最大反應(yīng)速度一半時對應(yīng)的底物濃度，即 V=1/2Vmax時， Km=[S] ② Km 單位： mol/L ③ Km 只是在固定的底物、一定的溫度和 pH 條件下、一定緩沖體系中測定，不同條件下，具有不同 Km 值。分子量為 13,000—— 35,000。 7．激活劑：凡是能提高酶活性的物質(zhì)，都稱激活劑，其中大部分是離子或簡單的有機化合物。 2． FAD（ flavin adenine dinucleotide）：黃素腺嘌呤二核苷酸。 第三章 酶 測試題 一、單項選擇題 （在備選答案中只有一個是正確的） 1．關(guān)于酶的敘述哪項是正確的？ A．所有的酶都含有輔基 或輔酶 B．只能在體內(nèi)起催化作用 C．大多數(shù)酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì) D．能改變化學(xué)反應(yīng)的平衡點加速反應(yīng)的進行 E．都具有立體異構(gòu)專一性（特異性） 2．酶原所以沒有活性是因為： A．酶蛋白肽鏈合成不完全 B．活性中心未形成或未暴露 C．酶原是普通的蛋白質(zhì) D．缺乏輔酶或輔基 E．是已經(jīng)變性的蛋白質(zhì) 生物化學(xué)重點總結(jié) 25 3．磺胺類藥物的類似物是： A．四氫葉酸 B．二氫葉酸 C．對氨基苯甲酸 D．葉酸 E．嘧啶 4．關(guān)于酶活性中心的敘述，哪項不正確？ A．酶與底物接觸只限于酶分子上與酶活性密切有關(guān)的較小區(qū)域 B．必需基團可位于 活性中心之內(nèi)，也可位于活性中心之外 C．一般來說，總是多肽鏈的一級結(jié)構(gòu)上相鄰的幾個氨基酸的殘基相對集中，形成酶的活性中心 D．酶原激活實際上就是完整的活性中心形成的過程 E．當(dāng)?shù)孜锓肿优c酶分子相接觸時，可引起酶活性中心的構(gòu)象改變 5．輔酶 NADP+分子中含有哪種 B 族維生素？ A．磷酸吡哆醛 B．核黃素 C．葉酸 D．尼克酰胺 E．硫胺素 6．下列關(guān)于酶蛋白和輔助因子的敘述，哪一點不正確？ A．酶蛋白或輔助因子單獨存在時均無催化作用 B．一種酶蛋白只與一種輔助因子結(jié)合成一種全酶 C．一種輔助因子只能與一種 酶蛋白結(jié)合成一種全酶 D．酶蛋白決定結(jié)合酶蛋白反應(yīng)的專一性 E．輔助因子直接參加反應(yīng) 7．如果有一酶促反應(yīng)其〔 8