脂肪酶的概述與應(yīng)用(完整版)
【正文】 微生物脂肪酶，并研究了其性質(zhì)，它們?cè)诜肿恿?、最適pH、最適溫度、pH和熱穩(wěn)定性、等電點(diǎn)和其他生化性質(zhì)方面存在不同（Veeraragavan等）。其中用于有機(jī)相合成的具有轉(zhuǎn)酯化或酯化功能的脂肪酶的規(guī)?；a(chǎn)對(duì)于酶催化合成精細(xì)化學(xué)品和手性化合物有重要意義。水解生成的脂肪酸，可以用標(biāo)準(zhǔn)的堿溶液滴定，以滴定值表示酶活力。如圖1所示，絕大多數(shù)脂肪酶的活性中心都由 Ser 和 His 參與組成, His、Ser與另一種氨基酸殘基(如 CCL 和 GCL的Glu、RML 和 hPL 的 Asp 等)一起構(gòu)成脂肪酶催化活性中心的三元組(triad)。后用NaCl濃度梯度緩沖液階段洗脫吸附蛋白，一定的洗脫速率和時(shí)間分部收集，集中脂肪酶活性組分，用緩沖液透析。Tatsuo Maruyama 等[8]用硬脂酸修飾了脂肪 酶，發(fā)現(xiàn)雖然水解活性下降，但酯化活性明顯提高。 硬脂酸琥珀酰亞胺酯的制備活化后的硬脂酸易于與酶表面的氨基反應(yīng)，因此先將硬脂酸活化。300 mg 固體酶溶于 20 mL 磷酸二氫鉀–硼砂緩沖液（pH=），將 200 mg 硬脂酸琥珀酰亞胺酯溶于 5 mL DMF 后逐滴加入酶溶液。 Lipolase 脂肪酶酶活測(cè)定水解活力采用橄欖油乳化液法測(cè)定[11－12]；酯化活力按 M. Basri 等的方法進(jìn)行[13]。2 結(jié)果與討論 Lipolase 脂肪酶的水解活性圖 1 為溫度對(duì) Lipolase 催化橄欖油水解酶活的影響。要想生產(chǎn)出好的面粉, 就需要優(yōu)質(zhì)的原料, 而我國(guó)小麥由于品質(zhì)參差不齊, 要想達(dá)到焙烤食品工業(yè)的要求, 就要在面粉后處理中添加食品添加劑, 來(lái)彌補(bǔ)面粉品質(zhì)的不足。它能夠提高面制品的烘焙品質(zhì)、改善面包質(zhì)地、延長(zhǎng)制品的貨架期。傳統(tǒng)奶酪制品加工所用的脂肪酶大都來(lái)自動(dòng)物組織, 如豬、牛的胰腺和年幼反芻動(dòng)物的消化道組織,不同來(lái)源的脂肪酶會(huì)產(chǎn)生不同風(fēng)味特征。用酶對(duì)各種動(dòng)物皮毛進(jìn)行處理，其脫脂效果明顯，可提高皮革質(zhì)量。什么時(shí)候離光明最近？那就是你覺(jué)得黑暗太黑的時(shí)候。生物柴油是生物質(zhì)能的一種形式，生物酶法生產(chǎn)生物柴油是通過(guò)脂肪酶進(jìn)行酯化反應(yīng)，制備相應(yīng)的脂肪酸酯。對(duì)不同奶源的奶制品 , 脂肪酶的使用可大大改善其有的不良風(fēng)味 , 促使新的風(fēng)味的產(chǎn)生, 并能改進(jìn)乳制品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。它對(duì)面團(tuán)有強(qiáng)筋作用, 能夠提高面包的入爐急脹, 增大面包體積, 且對(duì)面包芯有二次增白作用。隨著溴酸鉀被禁用, 如何使用天然無(wú)害具有替代功能的產(chǎn)品, 成為廣大焙烤食品及面粉企業(yè)關(guān)注的焦點(diǎn), 而生物酶制劑滿足了這方面的要求。相同溫度下的酶活隨修飾度的增加而下降。生成的脂肪酸的量采用酸堿滴定法測(cè)定。反應(yīng)完畢后，混合物在 4 000 r/min 下離心 15 min 除去未反應(yīng)的酯，重復(fù)操作兩次。三者摩爾比為1∶∶[9－10]。表面活性劑是一類兼具親油基和親水基的兩 親物質(zhì)，它能富集于界面從而顯著地改變界面性質(zhì)。然后用硫酸銨濃度梯度差緩沖液階段洗脫吸附蛋白，最后用 H2O 洗脫，一定的洗脫速率和時(shí)間分部收集，集中脂肪酶活性組分，透析除鹽。 pMD19mRCL切下目的基因片段，連入表達(dá)載體 pPIC9k 構(gòu)建表達(dá)質(zhì)粒 pPIC9kmRCL 。迄今為止 ,人們已經(jīng)對(duì)多種脂肪酶進(jìn)行克隆和表達(dá) ,并利用 X衍射等手段和定向修飾等技術(shù)測(cè)定了酶的氨基酸組成、晶體結(jié)構(gòu) 、等電點(diǎn)等參數(shù), 確定了組成脂肪酶活性中心的三元組(triad)結(jié)構(gòu) 。酶是一種活性蛋白質(zhì)。脂肪酶的催化特性在于：在油水界面上其催化活力最大，早在1958年Sarda和Desnnelv 就發(fā)現(xiàn)了這一現(xiàn)象。包括磷酸酯酶、固醇
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