醫(yī)學(xué)實驗常用方法學(xué)簡介(完整版)
【正文】 術(shù) （五）原位雜交術(shù) （六）細胞和細胞化學(xué)定量術(shù) 顯微分光光度測量術(shù) 形態(tài)計量術(shù) 流式細胞術(shù) （七）組織培養(yǎng)術(shù) （八）放射自顯影術(shù) （ 一）光學(xué)顯微鏡術(shù) light microscope（ LM） 1 石蠟切片 ①取材 Formalin 40%, 4% ② 固定 Bouin Formalin 40% 25ml 苦味酸飽和水溶液 75ml 冰醋酸 5ml ③ 脫水 乙醇、包埋 石蠟 ④切片 6um ⑤ 脫蠟 二甲苯 → 乙醇 → 水 ⑥染色 HE Hematoxylin： 核酸 RER、 Ribosome Eosin： 蛋白、膜結(jié)構(gòu)（ mitochondria、 SER、 lysosome） ⑦透明、封片 涂片 血涂片 精液 痰液 培養(yǎng)細胞 鋪片 磨片 骨和牙需制成磨片、經(jīng)染色后觀察 （二）電子顯微鏡技術(shù) 電子顯微鏡（簡稱電鏡）的發(fā)明和使用，使組織胚胎學(xué)研究內(nèi)容發(fā)生了深刻變化。 更好保存細胞內(nèi)酶的活性、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。 多糖 顯示多糖或蛋白多糖的常用方法是過碘酸 — 雪夫反應(yīng) (periodic acid Schiff reaction,PAS反應(yīng) )。為顯示抗原抗體復(fù)合物的存在，需進行抗體標(biāo)記；用熒光素如異硫氰酸熒光素標(biāo)記，可以在熒光顯微鏡下觀察，用膠體金標(biāo)記，可以在電鏡下觀察，用辣根過氧化酶標(biāo)記，則可在光鏡下或在電鏡下觀察。熒光顯微鏡最常用于抗體滎光技術(shù)進行觀察，并成為醫(yī)學(xué)、生物學(xué)很多領(lǐng)域中極為有用的工具。 （ 七）組織培養(yǎng)技術(shù)（ tissue culture） 是將離體的細胞、組織或器官置于培養(yǎng)基中，在無菌和適宜溫度及酸堿度條件下進行培養(yǎng)成活，藉以觀察各種物理、化學(xué)和生物因素對組織或細胞的作用，探索和提示細胞生命活動規(guī)律和細胞的結(jié)構(gòu)功能變化。 形態(tài)計量術(shù)（ morphometry） 運用幾何學(xué)和統(tǒng)計學(xué)原理，對組織或細胞進行二維和三維的形態(tài)測量研究，如對細胞的數(shù)量、體積、表面積和周長的相對和絕對值的測量等。 測定物質(zhì)的熒光光譜或者激發(fā)光譜，可以判定物質(zhì)性質(zhì)（熒光光度法）。亦可用鋨酸固定兼染色，脂類呈黑色。 激光掃描共聚焦顯微鏡 （ laser scanning confocal microscope） 是近年研制和應(yīng)用的一種新型顯微鏡。 用于觀察細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，標(biāo)本制
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