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醫(yī)學實驗常用方法學簡介-免費閱讀

2025-06-19 04:21 上一頁面

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【正文】 該技術的建立為細胞動力學、免疫學、血液學和腫瘤學等的研究提供了重要的研究手段。 ( B)二次熒光 (用化學染色) 非熒光性的物質(zhì)(蛋白質(zhì)、炭水化合物等)用熒光色素染色,由熒光色素產(chǎn)生熒光(二次熒光),以便進行觀察,對特定物體選擇合適的熒光色素,該物體就能和周圍的組織或細胞區(qū)別(分離)出來而可以觀察到。 核酸 顯示 DNA的傳統(tǒng)方法是 Feulgen反應( Feulgen reaction),組織切片或細胞涂片先經(jīng)稀鹽酸處理,使 DNA水解,醛基暴露,再用雪夫試劑處理,形成紫紅色反應產(chǎn)物??捎脕硌芯炕罴毎麅?nèi) Ca Na+和 K+等 pH值的動態(tài)變化;細胞內(nèi)各種細胞器、細胞骨架、核酸、蛋白質(zhì)和受體等的定位和定量分析;細胞膜電位、膜通道及信息傳遞的檢測;利用激光對細胞結(jié)構或染色體作切割、分離和克隆等逐漸成為生物醫(yī)學研究中重要的研究手段。 透射電鏡( transmission electron microscope) 用于觀察組織或細胞表面的微細結(jié)構,標本需經(jīng)噴鍍金屬膜特殊處理,然后在掃描電鏡下觀察,在熒光屏上掃描成像,呈現(xiàn)富于立體感的表面圖像,如細胞表面的微絨毛、纖毛和細胞伸出的偽足等。在電鏡下所見的結(jié)構稱為超微結(jié)構 (ultrastructure)。 相差顯微鏡 ( phase contrast microscope) 用于進行細胞培養(yǎng)中活細胞的觀察,可使無色透明的細胞鏡下結(jié)構反差明顯,圖像清晰。 脂類 標本用甲醛固定,冷凍切片,用油紅 O、尼羅藍或蘇丹類染料染色,使組織和細胞中的脂類物質(zhì)顯示相應顏色。 ( A)自發(fā)熒光 ( B)二次熒光 ( C)抗體熒光技術 ( A)自發(fā)熒光 (不加染色) 有些物質(zhì)不加染色,也能發(fā)出熒光(自發(fā)熒光或原發(fā)熒光),但在醫(yī)學和生物學(細胞學、生物組織、培養(yǎng)體等)領域中,只有很少物質(zhì)具有自發(fā)熒光,常采用后兩種方法。 標記胰島素 cRNA探針 , 示胰島素 mRNA陽性 (六)細胞和細胞化學定量術 顯微分光光度測量術 形態(tài)計量術 流式細胞術 顯微分光光度測量術( microspectrophotometry) 應用顯微光光度計,以物質(zhì)分子對光波的選擇性吸收為基礎,在顯微鏡下對生物樣品中的化學物質(zhì)進行定量分析。 新鮮實體組織細胞分離 膠原纖維 酶消化法原理 緊密連接 粘多糖 常用酶 蛋白酶類 胰酶:脂鍵、肽鍵 膠原酶:膠原 溶菌酶:糖蛋白和肽的糖苷鍵 血管
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