【正文】 創(chuàng)造折疊的微環(huán)境． Hsp60:具有桶狀結(jié)構(gòu) 伴侶素 GroEL/GroES系統(tǒng)促進(jìn)蛋白質(zhì)折疊過程 hsp60 hsp60 hsp60 三、蛋白質(zhì)的加工和修飾 一 .蛋白質(zhì)翻譯后 的 加工修飾 ：即個(gè)別氨基酸的化學(xué)修飾如 。 ◆ 從非編碼區(qū)第一個(gè) 5 ′ AUG開始翻譯很快就會遇到終止密碼子 ,翻譯的產(chǎn)物為無活性的短肽 ,減少正常AUG的翻譯啟動作用 ,從而抑制正常翻譯的頻率 .對翻譯起始的競爭，使翻譯維持在比較低的水平 . AUGCAAGCCGGU 5′ 3′ 編碼區(qū) 正常翻譯 5 ′ AUG競爭正常起始密碼翻譯 AUGCAAGCCGGU 5′ 3′ AUGAAAAUGＵ AG 編碼區(qū) 非編碼區(qū) （二）翻譯錯(cuò)誤校正 ，以 上是遺傳信息正確解讀的保障． tRNA合成酶對氨基酸與 tRNA特異選擇性． tRNA合成酶有校正活性（即對錯(cuò)配的氨基酸有水解下來） （三） 5’帽和 polyA尾 2. polyA 有或無，加 polyA位點(diǎn)的數(shù)目對形成不同類型的翻譯產(chǎn)物具有重要的調(diào)節(jié)意義。 fMet Tu GTP 目 錄 進(jìn)位 轉(zhuǎn)位 成肽 真核生物肽鏈合成的延長過程與原核基本相似 ， 但有不同的反應(yīng)體系和延長因子 。消耗 GTP,釋放各因子 . ； tRNA與小亞基 P位結(jié)合； 3. mRNA在核蛋白體小亞基準(zhǔn)確就位； ． 40S 60S 真核生物翻譯起始復(fù)合物形成過程 40S 60S eIF3保持小亞基的分離狀態(tài) GDP+Pi 各種 elF釋放 elF5 ④ ATP ADP+Pi eIF4F復(fù)合物（ elF4E, elF4G, elF4A） ,elF4B,PAB ③ mRNA AUG Met AUG met P eIF6 ① elF2 ② Met MettRNAiMet Met eIF2 GTP AUG 掃描至kozak序列 概 述 肽鏈 合成 ： 指 根據(jù) mRNA密碼序列的 指導(dǎo)，按 次序添加氨基酸從 N端向 C端 延，伸 肽鏈到合成終止的過程。 目 錄 反密碼子識別 P位密碼子 ,使 起始氨基酰tRNA( fMettRNAimet )結(jié)合到小亞基 就位 .此時(shí) A位上面結(jié)合有 IF1，此過程 GTP水解（ IF2）這個(gè)過程也可以促進(jìn) mRNA的準(zhǔn)確定位。 蛋白質(zhì) AAA 二、蛋白質(zhì)生物合成的場所 場所：核糖體（ ribosome) 結(jié)構(gòu) : Mg2+,蛋白質(zhì)， rRNA （一） 核蛋白體（ rRNA） 蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)， rRNA－蛋白質(zhì)組成兩個(gè)亞單位，稱之為大小亞基． 完整核糖體 大亞基 小亞基 原核生物 70 S 50 S 30 S 真核生物 80 S 60 S 40 S 核糖體的沉降系數(shù)（ S)和亞單位 不同細(xì)胞核蛋白體的組成 原核生物 真核生物 S 核蛋白體 小亞基 大亞基 核蛋白體 小亞基 大亞基 70S 30S 50S 80S 40S 60S rRNA 16SrRNA 5SrRNA 23SrRNA 18SrRNA 28SrRNA 5SrRNA 蛋白質(zhì) rpS 21種 rpL 36種 rpS 33種 rpL 49種 原核生物各組分的功能 : rRNA具有肽?；D(zhuǎn)移酶活性 ,催化肽鍵的合成 . 2. 小 亞基 具有 mRNA上 SD互補(bǔ)的序列 ,是識別結(jié)合 mRNA 的位點(diǎn) . 亞基 5SrRNA具有 兩個(gè)保守序列 ,其中一個(gè)與 tRNA的 Tψ互補(bǔ)識別序列 ,另一個(gè)與 23SrRNA互補(bǔ) 識別序列 ,穩(wěn)定 核糖體結(jié)構(gòu) . (二 )核糖體蛋白作用 rRNA防止被核酸酶降解 . rRNA構(gòu)成功能活性區(qū)域 . 如 : 肽酰基轉(zhuǎn)移酶活性 蛋白因子結(jié)合位點(diǎn) P、 A、 E 肽酰氨基酰－ tRNA結(jié)合位點(diǎn) 。三種框架的出現(xiàn)完全取決于哪一個(gè)核苷酸作為第一個(gè)密碼子的第一個(gè)堿基。 ? 原核生物和真核生物有著各自的密碼偏愛性，如：脯氨酸的密碼子有 CCC（真核生物）和 CCG（原核生物）； 某一種密碼子的使用頻率與細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的 tRNA的豐度一致 ，二者之間的相互協(xié)調(diào)有利于細(xì)胞內(nèi)某一氨基酸含量高的蛋白質(zhì)的順暢表達(dá)。 ? 擺動性 是指在蛋白質(zhì)生物合成過程中，密碼子的第三位堿基 總是處于一個(gè)不穩(wěn)定的位置，它與 反密碼子的第一個(gè)堿基配對結(jié)合的強(qiáng)度不如前兩個(gè)堿基 ，即“ 擺動堿基配對 ” 。 ? 終止密碼（ stop coden）： 也稱無意密碼子（ nonsense coden）： 沒有對應(yīng)的 tRNA的反密碼子 與之結(jié)合，但能被蛋白質(zhì)合成的終止因子或釋放因子識別，終止肽鏈的合成。 終止密碼有 3個(gè)： UAA、 UAG、 UGA ? 起始密碼（ initiation/start coden）： AUG，是多肽鏈翻譯開始的第一個(gè)密碼子，在鏈內(nèi)部則作為 蛋氨酸 的密碼子。其結(jié)果是 使一種tRNA分子可與一個(gè)以上的密碼子堿基配對。 ? 理論意義 ： 的偏愛性可以 作為基因表達(dá) 調(diào)控的一種機(jī)制 ，例如基因序列中出現(xiàn)稀有密碼子時(shí)，可以使蛋白質(zhì)的生物合成受到延遲 。 P187 ? 開放閱讀框架 指從 AUG開始到終止密碼子處的 正確可讀序列 。 mRNA結(jié)合位點(diǎn) 核蛋白體與起始 fmet－ tRNAfmet的結(jié)合 三、蛋白質(zhì)生物合成的機(jī)制 （一）合成元件 － tRNA、 rRNA和蛋白因子 ◆ tRNA種類： 30種 ◆ 同工 tRNA：指攜帶不同的密碼子，但識別 相同的氨基酸的一組 tRNA。 IF3 IF2 GTP 起始氨基酰 tRNA ( fMettRNAimet ) 三元復(fù)合物 IF3 IF1 IF2 GTP A U G 539。 肽鏈延長在核蛋白體上連續(xù)性循環(huán)式進(jìn)行，每次循環(huán)增加一個(gè)氨基酸，包括以下三步： 核蛋白體循環(huán) (ribosomal cycle)： 進(jìn)位 (entrance) 成肽 (peptide bondformation) 轉(zhuǎn)位 (translocation .延長因子 (elongation factor, EF) ? 延伸過程所需蛋白因子稱為延長因子 ? 原核生物： EFT (EFTu, EFTs) EFG 原核延長因子 生物功能 對應(yīng)真核延長因子 EFTu 促進(jìn)氨基酰 tRNA進(jìn)入 A位，結(jié)合分解 GTP EF1α EFTs 調(diào)節(jié)亞基 EF1βγ EFG 有轉(zhuǎn)位酶活性，促進(jìn) mRNA肽酰 tRNA由 A位前移到 P位，促進(jìn)卸載 tRNA釋放 EF2 肽鏈合成的延長因子 指根據(jù) mRNA下一組遺傳密碼指導(dǎo)，使相應(yīng)氨基酰 tRNA進(jìn)入核蛋白體 A位。 另外 ， 真核細(xì)胞核蛋白體沒有 E位 ， 轉(zhuǎn)位時(shí)卸載的 tRNA直接從 P位脫落 。 有時(shí)，不同的部位加入 poly A尾可以生成不同的多肽。羥基化，磷酸化 (絲氨酸 ,蘇氨酸 ) : 結(jié)合蛋白質(zhì)進(jìn)行 糖基化 ,脂?；拜o基的連結(jié) . 指從新生肽鏈上去除不等的氨基酸殘基。 ?信號肽的去除 如：蛋白質(zhì)的越膜 ?前體蛋白的加工 酶原的激活和蛋白質(zhì)內(nèi)含子的去除 如：胰島素原的 C肽 ?活性肽的剪切釋放 多肽經(jīng)過剪切可以多種不同的蛋白質(zhì)和多肽。維持蛋白質(zhì)的正確的空間構(gòu)象；影響亞基聚合 。 的基本結(jié)構(gòu)1— 10aa 15— 20aa 15— 30 aa 1— 3 aa rich Arg+, Lys+ rich Phe, Leu, Ile… Hydrophilic Helix Hydrophobic amp。 COPⅠ