【正文】 染色法）革蘭染色法（Gram stain）：涂片干燥固定、結晶紫初染、路哥碘液媒染、加95％酒精脫色、最后用沙黃或稀釋石炭酸復紅復染，2種顏色。m)。2.19701972，Arber、Smith和Nathans發(fā)現并提純了 DNA限制性內切酶；19821983 Prusiner發(fā)現朊病毒(prion)；19831984 Mullis建立PCR技術；1.微生物的種類按照有無細胞及細胞組成結構不同，可將微生物分為三種細胞類型。中國藥科大學 國家生命科學與技術人才培養(yǎng)基地 微生物與免疫學 By ZuHui Liu緒原核細胞型真核細胞型非細胞型細胞單細胞多數為多細胞，少數為單細胞無細胞細胞結構細胞核無典型核，無核仁核膜，單個染色體，僅有裸露DNA有典型核，有核膜核仁，多個染色體，由DNA與組蛋白組成無細胞結構，由蛋白和核酸組成，且僅含有一種核酸：DNA或RNA。巴斯德【微生物學之父】(1)柯赫【細菌學的奠基人】a）細菌純種分離技術、b）懸浮培養(yǎng)法、c）流動蒸汽滅菌、d）細胞染色技術和顯微攝影252。球菌：“直徑”；桿菌、螺旋菌： “寬度長度”；螺旋菌：“自然彎曲狀的長度。252。 G+ G細胞壁的比較比較項目G+細菌G細菌結構厚度(nm)20~8010~15對青霉素敏感性敏感不敏感252。LPS的主要功能有：是G多聚磷酸鹽可作為磷酸鹽的儲存體，在反應中可作為能量來源。(五)質粒(plasmid)質粒是細菌染色體外閉環(huán)雙鏈的DNA分子，是除染色體DNA外存在核外的遺傳物質，能獨立復制，亦能整合到染色體上隨細菌染色體同時復制，并隨細胞分裂而分配到子代細胞中。 莢膜的分類，可分為三種情況：167?？垢稍锬芰ΓＷo細菌，抵抗吞噬，免受溶菌酶和補體以及其他殺菌物質的殺菌作用；②） 觀察方法：電鏡直接觀察、鞭毛染色法、懸滴法暗視野觀察運動情況、半固體穿刺培養(yǎng)觀察有無擴散、菌落外形（邊緣、表面）、血清學反應 (三)菌毛(pilus或fimbriae)細菌菌毛是比鞭毛纖細、短而直的絲狀物，細菌菌毛的數目很多，遍布菌體表面。(四)芽胞(spore)芽孢：某些細菌在其生長發(fā)育后期，細胞質脫水濃縮，在細胞內形成一個圓形或橢圓形、對不良環(huán)境條件具有較強抗性的休眠體。252。三、細菌與人類的關系（毒力、入侵數量和入侵途徑）毒力是指病原菌致病性的強弱程度，具有菌株或型的差異，一般以半數致死量(LD50)表示，即采用一定途徑感染實驗動物使其半數死亡所需的最小細菌量。 DNA重組方式與細菌相同，為無性繁殖二、放線菌的形態(tài)與構造252。營養(yǎng)菌絲+氣生菌絲+孢子絲。 無細胞壁：支原體252。菌落微小，油煎蛋 252。特 鉤端螺旋體屬：鉤端螺旋體（鉤體?。?67。cerevisae）：第一個完成全基因組序列測定的真核生物（1996）。2.一、分布及與人類的關系霉菌易引起動物和人體傳染病，Eg.a）質配：兩個性細胞結合，細胞質融合，成為雙核細胞，每個核均含單倍染色體（n+n）。第一節(jié)（3）“復合對稱”衣殼結構：如有尾噬菌體（T4噬菌體等）。virino）：只含蛋白質，瘋牛病第二節(jié) 干擾素的產生和作用機制一般認為，在正常情況下，宿主細胞基因組中存在著IFN基因，但受阻遏物和操縱子的控制，IFN基因處于被抑制的狀態(tài)，干擾素基因不能轉錄和翻譯成蛋白質，從而不產生IFN?；蛘卟捎霉腆w培養(yǎng)基作噬菌斑計數，可測定噬斑形成單位(phqge forming unit，PFU)數目，常以每毫升噬菌體液能出現的噬斑數(PFU／m1)表示。 噬菌體免疫狀態(tài)：溶原性細菌具有抵抗同種或近緣噬菌體重復感染的能力。3．誘導溶源菌能以極低的頻率自發(fā)裂解，產生子代噬菌體，特別是在UV等理化因素作用下可使絕大部分乃至全部溶源菌裂解釋放子代噬菌體，理化因素的這種作用稱為誘導。因此在測定溶原細菌的噬菌體時必須同時加入非溶源性的指示菌。252。通過測定標本中的噬菌體或應用噬菌體效價增殖試驗，檢測標本中的未知細菌。（2）致病性：傳染性強，乙肝患者或攜帶者，密切接觸、性、母嬰。（2）致病性與免疫性：性行為、血液、母嬰傳播。(分子量小，脂溶性，極性小)二、 促進擴散 (facilitated diffusion)eg：氨基酸，單糖，維生素，無機鹽等三、 主動運輸 (active transport)eg：大多數氨基酸，糖類，部分離子（Na+,K+,HPO4 2等）四、基團轉位 (group translocation)有一個復雜的運輸系統(tǒng)來完成物質的運輸；在運輸中發(fā)生化學變化；eg：糖252。（2）微需氧菌：需要少量氧氣，如霍亂弧菌。167。167。當培養(yǎng)基中同時含有這兩類碳源（或氮源）時，微生物在生長過程中會形成二次生長現象。 連續(xù)培養(yǎng)：在微生物的整個培養(yǎng)期間，通過不斷補充營養(yǎng)物質和以同樣的速率移出培養(yǎng)物使微生物能以恒定的生長速率生長，并能持續(xù)生長下去的一種培養(yǎng)方法。3. 活菌計數法：液體稀釋后采用涂布法、傾注平板法，測定菌落形成單位。表型（phenotype）：又稱表現型，指生物體所具有的外表特征和內在特性的總和，是其遺傳型在合適環(huán)境下通過代謝和發(fā)育而得到的具體表現。第一節(jié)特點如下：A 共價，閉合，環(huán)狀，雙鏈cccdsDNA，常見的有超螺旋、開環(huán)兩種存在形式； B 自我復制（嚴緊型質粒，松弛型質粒）； C 不相容性（干擾近緣質粒）；D 非細胞生長所必需；E 質?？勺孕邢Щ蛉斯とコ?；F 可轉移性，質?？蓮囊粋€細菌轉移到另一個細菌。 （4）代謝質粒： 攜帶有能降解某些基質的酶的基因，尤其對一些有毒化合物進行降解，在環(huán)保方面有重要意義。營養(yǎng)缺陷型（auxotroph）某一野生型菌株因發(fā)生基因突變而喪失合成一種或幾種生長因子(堿基或氨基酸)的能力，只有從周圍環(huán)境或培養(yǎng)基中獲得這些營養(yǎng)或其前體物（precursor）才能正常生長繁殖的變異類型，稱為營養(yǎng)缺陷型。：“r”的上標表示抗性；strs產量突變型（metabolite quantitative mutant）基因突變后，在代謝產物產量上明顯有別于原始菌株的突變株，稱為產量突變型。通過轉化方式而形成的雜種后代，稱轉化子（transformant）。F因子的四種細胞形式252。252。細菌轉導的二種類型：普遍轉導：通過極少數完全缺陷噬菌體對供體菌任何小片段DNA進行“誤包”，而將其遺傳性狀傳遞給受體菌的現象，稱為普遍轉導。溶源轉變：一個與轉導相似又不同的現象。Hfr菌株，F因子插入到染色體DNA上，細胞表面有性菌毛。F菌株，感受態(tài)細胞（petent cell）具有攝取外源DNA能力的細胞。誘變劑與致癌物質——Ames試驗具體操作：檢測鼠傷寒沙門氏菌(Salmonella typhmurium)組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株(his)的回復突變率，his菌株在不含組氨酸的培養(yǎng)基中不能生長，或只有極少數的自發(fā)回復突變子生長，如果回復突變率因某種化學誘變劑(或待測物)的作用而增加，那么這種化學藥物可判斷為具有致癌性。3. 基因型：所需營養(yǎng)物的前三個英文小寫斜體字母表示：hisC（組氨酸缺陷型，其中的大寫字母C同一表型中不同基因的突變）167。三、轉座因子（transposable element）又稱跳躍基因，位于染色體或質粒上的一段能改變自身位置的DNA序列，廣泛分布于原核和真核細胞中。質粒的主要類型（1）致育因子（Fertility factor，F因子）：又稱F質粒，其大小約100kb，這是最早發(fā)現的一種與大腸桿菌的有性生殖現象（接合作用）有關的質粒。遺傳性變異（基因型變異）：微生物的基因型發(fā)生改變，可遺傳。2．掌握：遺傳、變異的概念；遺傳物質在微生物中的存在形式；基因符號及有關術語；轉座因子概念。二、對微生物的控制(一) 常用概念滅菌（sterilization）：殺滅所有的微生物，包括細菌的芽孢；消毒（disinfection）：殺滅病原微生物； 防腐（antiseptic）：抑制微生物的生長繁殖； 化療(Chemotherapy)：化療是指利用具有選擇毒性的化學物質如磺胺、抗生素等對生物體內部被微生物感染的組織進行治療，以殺死組織內的病原微生物，但對機體本身無毒害作用的治療措施。]167。 固體：常用于微生物的分離、純化、保存和種子制備。stationary phase）目的：（SCP、乳酸等）、次生代謝產物 穩(wěn)定期是產物的最佳收獲期；、堿基、氨基酸等物質進行生物測定 穩(wěn)定期是最佳測定時期。：20min左右167。（4）專性厭氧菌：缺乏SOD、細胞色素氧化酶和過氧化氫酶，氧氣有毒，如破傷風梭菌。第四章（3）檢查與防治：抗原抗體檢測：HBV的HBsAg、HBeAg、抗HBs、抗HBe、抗HBc