植物組織培養(yǎng)第六章植物細胞培養(yǎng)(完整版)
【正文】 適于現(xiàn)代種質庫管理，材料恢復生長快。 ? 對數(shù)生長期 （ logarithm phase ） 細胞數(shù)目迅速增長， ? 直線生長期 (linear phase)單位時間內細胞數(shù)目增長大致恒定。 ★ 方法類型： 分批培養(yǎng) （ 一次性生產(chǎn)采收提?。? 半連續(xù)培養(yǎng) （ 每隔一定時間更換培養(yǎng)液） 連續(xù)培養(yǎng) （封閉型與開放型） 陳傳紅 制作 2021 / 5 ★ 小規(guī)模： 利用 培養(yǎng)瓶 培養(yǎng)，震蕩條件下； ★ 大規(guī)模： 利用 生物反應器 培養(yǎng)，提供可控制環(huán)境條件，以滿足細胞正常生長和生物合成的容器，具有攪拌和通氣裝置，使物料均勻混合，各組分和熱量在不同相際間傳遞。一個月以后單細胞可以長成肉眼可見的細胞團， 2～ 3個月后從濾紙上取出放在新的培養(yǎng)基上直接培養(yǎng)。 陳傳紅 制作 2021 / 5 ★ 單細胞培養(yǎng)方法 1）平板培養(yǎng) 2）看護培養(yǎng) 3）微室培養(yǎng) 4）條件培養(yǎng)基培養(yǎng) 等 陳傳紅 制作 2021 / 5 1）平板培養(yǎng) （ Plating technique） 是為了分離單細胞無性系，并對不同的無性系進行研究，揭示它們在生理、生化和遺傳上的差異而設計的一種單細胞培養(yǎng)技術。陳傳紅 制作 2021 / 5 第八章 植物細胞培養(yǎng) （ plant cell culture） 陳傳紅 制作 2021 / 5 本章內容提要： 一、植物細胞培養(yǎng)概念及技術 二、植物細胞生長和活力的測定 三、植物細胞培養(yǎng)的應用 四、人工種子 陳傳紅 制作 2021 / 5 ? 定義： 在離體條件下，將愈傷組織或其他植物器官易分散的組織置于液體培養(yǎng)基上進行振蕩培養(yǎng)，得到游離的懸浮細胞，通過繼代培養(yǎng)使細胞增殖，從而獲得大量細胞群（單細胞無性系）的一種技術。最早是由貝格曼（ Bergmann,1960）首創(chuàng)的。 陳傳紅 制作 2021 / 5 3）微室培養(yǎng) （ Microculture） ? 是為了進行單細胞活體連續(xù)觀察而建立的一種微量細胞培養(yǎng)技術； ? 最早是由德洛普（ De Ropp 1955）發(fā)明的懸滴培養(yǎng) (Hangingdrop culture)演變而來的； ? 后來又發(fā)展成了多滴排列技術（ Potrykus 1979）和多室培養(yǎng)盤 (Muotidish,Wergicke 1979)。 大規(guī)模培養(yǎng)包括： 懸浮培養(yǎng)反應器 固定化細胞反應器 陳傳紅 制作 2021 / 5 ? 細胞培養(yǎng)技術的優(yōu)點 (1)代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)是在控制條件下進行的，因此可以通過選擇優(yōu)良細胞系和優(yōu)化培養(yǎng)條件等方法得到超越整株植物產(chǎn)量的代謝產(chǎn)物。 ? 減緩期 (retara phase)細胞數(shù)目的增長速率減緩。 ? (1) 低溫保存： 200C。脫氫酶使 TTC（氯化三苯四氮唑）還原生成一種紅色的物質，作為檢驗活細胞的方法。使生生代謝產(chǎn)物成為可能，并進一步得到很大發(fā)展
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