【正文】 功能 來自海藻的多糖類物質，組織培養(yǎng)中最常用作凝固劑，是最方便、最好的凝固劑和支持物。 IBA促進生根 細胞分裂素的生理效應 ⑵細胞分裂素類 功能 促進細胞分裂和擴大，調節(jié)器官分化，延緩組織衰老，增強蛋白質合成。 ⑶ 肌醇 功能 促進糖的轉化、維生素和激素的利用，對胚狀體和芽的形成有良好影響。 無機鹽類 功能 離體組織生長發(fā)育的基本成分 根據(jù)植物對必需元素需要的量，可以分為以下兩類： 大量元素 — 植物所需元素的使用量一般在每升幾十幾千毫克，有 C、 H、 O、 N、 P、 K、 Ca、 Mg、 S。進行脫毒苗培養(yǎng)的還要進行病毒檢測。 第一節(jié) 培 養(yǎng) 基成分、種類及特點 第二節(jié) 培養(yǎng)基的制備 第三節(jié) 外植體無菌接種 第四節(jié) 外植體培養(yǎng) 第五節(jié) 試管苗的馴化與移栽 組織培養(yǎng)步驟圖 （ 1）準備階段 查閱相關文獻，根據(jù)已成功培養(yǎng)的相近植物資料，結合實際制定出切實可行的培養(yǎng)方案。 根據(jù)實驗方案配制適當?shù)幕瘜W消毒劑以及不同培養(yǎng)階段所需的培養(yǎng)基，并經高壓滅菌或過濾除菌后備用。 （ 5）生根培養(yǎng) 剛形成的芽苗往往比較弱小，多數(shù)無根，此時可降低或不加細胞分裂素濃度，提高生長素濃度，促進芽苗生根，提高其健壯度。 微量元素 — 植物所需元素的濃度小于 105～ 107mol/L， Fe、 Cu、 Zn、 Mn、 Mo、 B、 Cl。 用量一般 50100mg/L。離體培養(yǎng)中，促進不定芽的發(fā)生，與生長素協(xié)調作用可有效控制培養(yǎng)物的生長與分化。 常用量 %%，不是培養(yǎng)基必需成分。 二 、 常用培養(yǎng)基的種類 、 配方及特點 （ 一 ） 培養(yǎng)基種類 根據(jù)態(tài)相分： 固體培養(yǎng)基 加凝固劑的培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基 不加凝固劑的培養(yǎng)基 。 低鹽培養(yǎng)基 無機鹽濃度低，有機成分含量低，多數(shù)作為生根培養(yǎng)基、胚胎培養(yǎng)使用，常用 White培養(yǎng)基。 微量元素 可配成 100— 200倍混合母液 ， KI可單獨配 。 濃縮倍數(shù) 制備培養(yǎng)基數(shù)量 （ L） （ 二 ） 培養(yǎng)基制作程序 按大量元素 、 微量元素 、 鐵鹽 、 有機成分順序將 母液 取出 ， 混合 。 培養(yǎng)基是離體培養(yǎng)物賴以生存和生長的人工環(huán)境的重要組成部分 ， 常用的培養(yǎng)基依據(jù)其物理狀態(tài)的不同分為固態(tài)培養(yǎng)基和液態(tài)培養(yǎng)基 。 繼續(xù)加壓至 108kPa（ ， 即 121℃） 壓力至 108kPa（ ， 即 121℃ ） 時， 穩(wěn)壓 在此壓力 1520min。 培養(yǎng)基滅菌后如果出現(xiàn)過多沉淀或瓊脂不凝固等現(xiàn)象 ， 該培養(yǎng)基不能繼續(xù)使用 ， 應查明原因重新配制 。對于培養(yǎng)過程中可能出現(xiàn)內生菌污染的材料，應盡量取生長旺盛期的生長點部位作為起始培養(yǎng)的材料。 胚胎培養(yǎng)或脫毒在 。 （ 2） 操作期間雙手和臺面常用 70%酒精或消毒劑擦拭 。 （ 1）借助接種用工具將材料切割分離。 一 、 外植體的培養(yǎng)條件 光照 光照對植物生長發(fā)育有重要作用 ， 是離體培養(yǎng)中非常重要的環(huán)境因素 。 濕度 培養(yǎng)瓶內相對濕度通常是 100%，而環(huán)境中的相對濕度會直接影響培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)。 愈傷組織 莖 根 植株 。 （ 三 ） 外植體 直接形成根與芽 植株 。 接種時除去外部韌皮組織，只接內部的分生組織。 ⑶培養(yǎng)基的成分 過高的無機鹽濃度 生長調節(jié)物質使用不當， BA過多 分生能力強的材料，氧化受抑制，褐變也被抑制 培養(yǎng)條件不適宜，溫度過高或光照過強，褐變加速。 ⑵瓊脂濃度 瓊脂濃度低，玻璃化苗增加。⑸適溫生長，熱擊處理防止玻璃化發(fā)生。 ⑶弱光 試管瓶內光照一般比太陽光弱，幼苗生長也較弱，不能受太陽光直接照射。 嫁接移栽優(yōu)點： 移栽成活率高。 需時間短， 20天成活，緩苗期 1015天。 試管苗特點 ⑴試管苗生長細弱、莖葉表面角質層不發(fā)達 ⑵葉綠體的光合作用較差 ⑶葉片氣孔數(shù)目少，活性差 ⑷根的吸收功能差 ⑸對逆境的適應性和抵抗能力較差 二、試管苗的馴化 馴化的目的 提高試管苗對外界環(huán)境條件的適應性，提高光合能力，使試管苗健壯，提高試管苗移栽成活率。 ⑺培養(yǎng)基中加入間苯三酚、根皮苷或多效唑、矮壯素。 ⑷光照時間 一般要求 1012h，大于 15h玻璃苗增加。 褐變的防止措施 ⑴選擇適宜的外植體及最佳培養(yǎng)基。 ⑶器皿與金屬器械的滅菌 玻璃器皿可采用濕熱滅菌或干熱滅菌 金屬器皿一般火焰滅菌，也可干熱滅菌 ⑷布質制品的滅菌 濕熱滅菌 ⑸無菌操作室的滅菌 2%新捷爾滅或 70%酒精擦拭（噴霧），紫外燈照射，定期甲醛和高錳酸鉀熏蒸。 病原菌：細菌及真菌兩大類。 （ 二 ） 外植體 胚狀體 植株 。 氧氣 離體培養(yǎng)的試管苗是需要氧氣的 ， 在固體培養(yǎng)或液體靜置培養(yǎng)時 ， 如果組織完全浸入培養(yǎng)基中 ， 與氧氣隔絕 ， 就會停止生長 。除特殊要求外 ， 一般都采用日光燈作光源 ， 光照強度 10005000Lx， 根據(jù)不同植物或器官需要 ， 可以每天連續(xù)光照 1216小