植物組織培養(yǎng)第六章植物細(xì)胞培養(yǎng)(完整版)
【正文】 胞密度不斷增加。 為了加速細(xì)胞增殖， 有的甚至在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末就 進(jìn)行繼代。 五、影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素 細(xì)胞密度： 培養(yǎng)基的成分和起始細(xì)胞密度對(duì)單細(xì)胞培養(yǎng)成敗有影響。 細(xì)胞密實(shí)體積（ PCV）：以每 ml培養(yǎng)液中細(xì)胞總體積的 ml數(shù)表示。 目的：提高該種天然化合物在細(xì)胞中的產(chǎn)量。 如果細(xì)胞含有硝酸還原酶，在培養(yǎng)基中加入 2080mmol/L氯酸鹽，此濃度氯酸鹽雖不足以殺活細(xì)胞，但氯酸鹽可被還原成亞氯酸鹽，使這些細(xì)胞被殺死，存活下來(lái)的只有硝酸還原酶確實(shí)的突變細(xì)胞。 二、人工種子的制備技術(shù) （二）成熟與干燥 ⑴： 繁殖體必須同步增殖并達(dá)到成熟方可用于人工種子的制備。 三、人工種子的貯藏與萌發(fā) 思考： 說(shuō)明看護(hù)培養(yǎng)、平板培養(yǎng)的特點(diǎn) 什么是條件培養(yǎng)基？平板培養(yǎng)植板率怎樣計(jì)算 解釋：細(xì)胞懸浮培養(yǎng)、成批培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)、化學(xué)恒定法、濁度恒定法 說(shuō)明細(xì)胞株篩選的方法 。 成熟培養(yǎng)基特點(diǎn)： ①在培養(yǎng)基中減少或除去激素 ②加入 ABA ③ 加入 PEG 二、人工種子的制備技術(shù) （二）成熟與干燥 ⑵： 對(duì)繁殖體進(jìn)行干燥的研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過(guò)干燥的繁殖體，其人工種子的成株率可明顯提高，但在另一些植物中有降低的趨勢(shì)。 若能通過(guò)染色體加倍而恢復(fù)其育性，就能使雜種在育種工作中得到充分利用。還可以在很小的空間操作千百萬(wàn)潛在的植株。 細(xì)胞植板率 =每個(gè)平板形成的細(xì)胞團(tuán)數(shù) /每個(gè)平板接種的細(xì)胞總數(shù) 一、懸浮培養(yǎng)中細(xì)胞生長(zhǎng)的測(cè)定 第三節(jié) 植物細(xì)胞生長(zhǎng)和活力的測(cè)定 二、培養(yǎng)細(xì)胞活力的測(cè)定 TTC法 熒光素二乙酸法（ FDA法） 伊凡藍(lán)染色法 第四節(jié) 植物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用 一、植物次生代謝產(chǎn)物的生產(chǎn) 二、突變體選擇 三、誘導(dǎo)多變體 （一 ）生產(chǎn)天然的植物成分 通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)可得到大量合成的植物次生化合物，如生物堿 、 抗菌劑、抗血平、橡膠、類固醇、糖類衍生物、天然色素等很多物質(zhì) . 一、植物次生代謝產(chǎn)物的生產(chǎn) ● 海巴戟的植物體內(nèi) —— 蒽醌 ● 胡蘿卜愈傷組織 —— 紫紅色、橙紅色、綠色、黃白色 4種愈傷 組織株系 ● 紫草 —— 紫草色素 ● 長(zhǎng)春花細(xì)胞和愈傷組織培養(yǎng)物 —— 利血平和阿馬靈 ● 三七的愈傷組織培養(yǎng)物 —— 三七皂苷（含量達(dá)干重的 %） ● 三分三的愈傷組織中 —— 茛菪堿 （含量可達(dá)干重的 % 一、植物次生代謝產(chǎn)物的生產(chǎn) 問(wèn)題： ，有些細(xì)胞培養(yǎng)物不能產(chǎn)生天然化合物或者比正常的植株產(chǎn)量低 原因： （ 1） 培養(yǎng)細(xì)胞與完整植株不同，培養(yǎng)的細(xì)胞缺少完整植株 所有的那種進(jìn)行轉(zhuǎn)化反應(yīng)的能力 （ 2）對(duì)于能夠促成這類天然產(chǎn)物合成的營(yíng)養(yǎng)條件和其他培養(yǎng)條件缺乏了解 已知：在培養(yǎng)細(xì)胞中生物堿的產(chǎn)量受培養(yǎng)物的生長(zhǎng)階段、培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)條件（光照、溫度）及細(xì)胞基因型等的影響。 五、影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑： 細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)，常表現(xiàn)一種自然的聚集現(xiàn)象，加入 2， 4D，少量水解
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