【正文】 ring of Gene Expression Patterns with a Complementary DNA Microarray. Science,1995,270(20):467470. 1 Qackenbush J. Genomics Microarraysguilt by association science,20xx, 302(5643):24955. 1 Yim SH, Ward JM, Dragan Y, et analysis using amplified mRNA from laser capture microdissection of microscopic hepatocellular precancerous lesions and frozen hepatocellular carcinomas reveals unique and consistent gene expression Pathol. 20xx MayJun。 研究目標： 本研究擬通過體內外實驗，探討從骨形成到骨破壞這個質的變化過程中骨系細胞基因表達的差異，從整體角度分析“生理”負荷促進骨形成和“超”負荷導致骨破壞的基因調控機制，明確相關的特異性基因表達，探討 OB 和 OC 在力學刺激下的耦聯(lián)機制，探索未知的相關調控基因或信號轉導相關基因，從而為與骨生物力學相關的臨床學科提供分子水平的理論基礎以及臨床應用的指導。 2）、隨機分為 5 組， Zwick1454 自動材料萬能試驗機分別以 0N， 5N， 10N， 20N，40N 力值、 2HZ 的頻率給種植體軸向加載，每天 3 次，每次 1 小時，連續(xù) 3 周。 三）、體內 骨組織不同負荷和時間下成骨細胞和破骨細胞基因表達譜基因芯片檢測 1）、 90 只 SD 大鼠動物模型，隨機分為三組，每組各 30 只。 五）、統(tǒng)計學分析處理 統(tǒng)計學分析各項實驗結果，明確間斷壓力下的骨形成和骨破壞過程中，成骨細胞和破骨細胞特異性基因的表達和時序變化，通過體內外實驗的對比，探討成骨細胞和破骨細胞在間斷力學刺激下的耦聯(lián)機制。 項目申請者多年從事生物力學、分子生物學的相關的研究，在臨床和科研 上有著多年的組織和實踐經驗。 4）通過本課題的研究可能引出的思考： A）不同類型的應力，不同的作用方式和時間均有可能 影響基因的表達，本課題為簡化實驗，突出重點，選用間斷力學刺激作為力的作用形式。 完成研究方法技術路線中的第四部分：即采用半定量RTPCR 檢測不同負荷下表達差異明顯的基因。 6）、通過體內試驗，明確無負荷、生理負荷和超負荷狀況下，骨組織基因表達的差異。 課題類別 衛(wèi)生廳編號 湖南省醫(yī)藥衛(wèi)生科學技術研究課題計劃（合同） 申 請 書 課題名稱：腦脊液中 β 淀粉樣蛋白和 tau 蛋白的正常值及臨床意義的研究 湖南省衛(wèi)生廳 一九九三年十月制 簡 表 研究課題 名稱 (25 字內 ) 腦脊液中 β 淀粉樣蛋白和 tau 蛋白的正常值 及臨床意義的研究 類別 申請金額 2 萬元 起止年月 起 20xx 年 10 月 止 20xx 年 9 月 申請者 姓名 性別 男 出生年月 1966 年 7 月 專業(yè)技術職務 主治醫(yī)師 學位 博士 所在部門 工作單位 名稱 所在地 性質 課題組 總人數 高級 中級 初級 輔助人員 博士 碩士 學士 參加單位 數 5 2 2 1 2 2 1 1 課題組主要成員∧ 含負責人∨ 姓名 年齡 專業(yè)技術 職務 年參加月數 工作單位 項目中的分工 簽章 35 主治醫(yī)師 全程 負責 44 副主任醫(yī)師 全程 協(xié)作 40 主任醫(yī)師 全程 負責 31 主管技師 全程 協(xié)作 28 醫(yī)師 全程 協(xié)作 1 研究內容和意義摘要 ∧ 200字內∨ 腦脊液中 β 淀粉樣蛋白（β Amyloid Protein, β AP， Aβ）是淀粉樣前體蛋白（ APP）在分泌酶的作用下裂解出來的含有 4043 個氨基酸的蛋白質， 腦脊液中 Aβ有 Aβ 40和 Aβ 42兩種形式；兩者在正常老年人和Alzheimer ?。?AD） 腦脊液中 均存在， Aβ 42與 AD 老年斑形成密切相關。 AD 的研究具有重要的經濟意義和社會意義。界定國人的 腦脊液 Tau蛋白和 Aβ的參考正常值可為 Alzheimer 病的診斷提供可靠的實驗室依據。 Alzheimer 病血清和腦脊液 β 淀粉樣蛋白的測定。 擬解決的問題： 理論上說，只有癡呆患者（包括 AD 性 和非 AD 性）的腦脊液 Aβ和 Tau 蛋白異常，正常人、非神經系統(tǒng)疾病患者和非癡呆神經系統(tǒng)疾病患者 腦脊液中 Aβ Aβ 42和 Tau 蛋白含量是一致的。根據癡呆的臨床診斷標準分為癡呆組和非癡呆組，然后再分亞組。 7 研究工作的總體安排及進度： （ 1） 20xx 年 10 月 20xx 年 3 月 規(guī)范實驗程序，收集標本。 主任或副主任委員（簽字） 年 月 日 七、申報單位領導審核意見 （一） 同意學術委員會的意見并做到以下幾點： 保證研究計劃實施所需的人力，物力和工作時間等條件； 督促課題負責人嚴格執(zhí)行計劃進度安排 督促課題負責人按時報送有關報表資料 （二） 需要說明的其它問題 單位領導（簽章） 單位（公章） 年 月 日 13 八、推薦意見（申請青年基金課題需填寫此欄由兩名同行高級科技人員填寫，推薦意見要說明課題的意義和取得預期成果的可能性，申請者和課題組的學術水平及研究能力，現有工作條件等） 推薦人（簽字） 專業(yè)技術職務 專長 單位 推薦人（簽字） 專業(yè)技術職務 專長 單位 14 主管部門審核意見 委托單位組織同行評議或情報咨 詢意見： 衛(wèi)生廳審批意見： 15 合 同 條 款 1．本研究課題為期 年。 4．合同執(zhí)行過程中，如因不可抗拒的客觀原因，確需調整合同期限和內容時，乙方必須及時提出書面報告，報請甲方審批備案，方能生效。 簽定合同各方簽字 委托單位（甲方） 負責人 年 月 日 委托單位（乙方）： 單位負責人： 課題負責人 年 月 日 保證單位（丙方）：（系指各附屬醫(yī)院及地市所屬單位的主管部門） 負責人 年 月 日 16 合同執(zhí)行過程中有關事項記載 時 間 內容摘要 17 。申請任何一項科研成果獎勵時，有關文件、資料應注明為 方合同課題。實驗、臨床、現場等研究工作結束后二至三個月內， 乙 方應向 方提出科研總結或申請成果 的完總資料。 （ 3） 20xx 年 7 月 20xx 年 9 月 實驗數據處理，結果分析，撰寫論文。 —— AD 癡呆組 —— 非 AD