【正文】 ylase activity is very low in the first three days, four days increases rapidly fourth, sixth day maximum, the maximum is , then decreased gradually。杏鮑菇春末至夏初腐生兼寄生于傘形花科植物刺芹等的根上和周圍土中，它是高山、草原、沙漠地帶的一種品質優(yōu)良的大型肉質傘菌。 已測 17 種 氨基 酸 總量 為％。栽培杏鮑菇的原料很廣泛，棉子殼、闊葉木屑以及棉稈粉、玉米心等均可，輔之以麥麩等即可正常出菇。 河南科技大學畢業(yè)設計（論文） 3 三、周期更短 。 七、出菇 整齊上市早 。自 80 年代至 20 世紀來，我國許多科研院所的專家教授前輩開始對食用菌深層發(fā)酵、液體菌種及中小型發(fā)酵設備進行了反復、深入和刻苦的研究 ， 為今天我國液體菌種的社會化推廣應用，不論在發(fā)酵設備、工藝技術還是在栽培應用 上，都提供了寶 貴的經 驗，奠 定了堅實 的基礎 [10]。 3． 液體菌種菌絲球懸浮于液體培養(yǎng)基中，營養(yǎng)易于吸收，菌絲生長快，老化也快，液體菌種一旦生產出來應該及早使用，在接種時間上 缺乏周轉余地，一次性投資大。 液體菌種培養(yǎng)時間短則菌種活力不足，培養(yǎng)時間 長則菌種老化，所以確定適宜的培養(yǎng)周期非常關鍵。用四層紗布過濾，杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期的研究 6 加熱，再據(jù)實際實驗需要加瓊脂，繼續(xù)加熱攪拌混勻，待瓊脂融完后，加入葡萄糖，攪拌均勻，稍冷卻后再補足水分至 1000 毫升，分裝試管，加塞，包扎，滅菌 20 分鐘取出，試管擺斜面，冷卻后貯存?zhèn)溆?。但是一定要注意?3， 5二硝基水楊酸和 NaOH 的加入時間一定要很近，或者是先加入 NaOH。 曲線的繪制：以培養(yǎng)時間（天）為橫坐標 ， 淀粉酶活性 OD 值 為縱坐標，繪制曲線。（設置三個重復）。培養(yǎng)前期，培養(yǎng)基內物理化學性狀較適合菌種生長菌種迅速分裂增殖直徑變小。 隨著培養(yǎng)時間的延長，由于營養(yǎng)物質的消耗和代謝廢物的增多，使得菌種競爭加劇，生長環(huán)境變惡劣，培養(yǎng)基越來越不適合菌種的生長，菌種生長逐漸變弱甚至停止。所以第八天以后培養(yǎng)基已不適合菌種生長了。 羧甲基纖維素酶（ CMC 酶）活性 變化 從液體菌種培養(yǎng)第三天起每天上午用分光光度計 在 520nm 處 測定羧甲基纖維素酶活性，以 OD 值表示 ，試驗結果見圖 5。 多酚氧化物酶活 性 變化 從液體菌種培養(yǎng)第三天 起每天上午用分光光度計 在 400nm 處 測定多酚氧化酶活性，以 OD 值表示。 03 4 5 6 7 8 9Trianing daysOD values 圖 7 杏鮑菇漆酶活性變化曲線 Figure 7 Pleurotus eryngii laccase activity curve 由圖 7 可知： 杏鮑菇漆酶活性呈倒 V 型。 綜上所述，杏鮑菇液體菌種 在第六天最適合河南科技大學畢業(yè)設計（論文） 15 接種。對培養(yǎng)過程中各指標的變化情況分析如下：在培養(yǎng)前 3 天內有少量新生菌球形成，為原轉接的菌球脫落體；培養(yǎng) 4 天，新生菌球增多，菌球邊緣有大量絨毛狀菌絲形成；第 6 天新生小菌球大量增加，是由于振蕩使大量絨毛狀菌絲脫落形成，所以數(shù)目急劇增多，菌球直徑達到最小；第 8 天菌球數(shù)目減少，可能是由于一些小菌球聚合成大的菌絲體，所以直徑變大； 9 天之后由于菌球開始老化自溶。國內一些食用菌生產企業(yè)設備簡陋，衛(wèi)生條件差，甚至有人用不法手段生產，這樣的產品嚴重損害了食用菌產業(yè)聲譽。許多發(fā)達國家已經形成了杏鮑菇的工廠化、周年化生產。其二，勞動力素質問題。 感謝在我實驗過程中給過我 極大 幫助的 候軍老師、 劉保國老師等。 遇到困難時，你們給予了極大的幫助，老師 對我們的耐心，認真負責的態(tài)度， 平易近人的優(yōu)秀品格給我留下了深刻的印象，也讓我為 大學生活畫上圓滿的句號。綜合上述因素，再加上杏鮑菇市場價格普遍偏高的利益誘惑，廣大菇農對杏鮑菇規(guī)模化、工廠化生產工藝創(chuàng)新提出了新的要求，他們急需一種容易掌握、操作方便、培養(yǎng)周期短、適宜大規(guī)模工廠化管理、生產的杏鮑菇栽培方式來取代現(xiàn)有的傳統(tǒng)栽培方式。這嚴重制約了我國杏鮑菇的生產和出口。我國生產食用菌使用的品種絕大多數(shù)是未經審定、認定或登記的，導致穩(wěn)定性和一致性差，質量參差不齊。采用杏鮑菇液體菌種進行生產具有菌種流動性好、接種后易于分散、污染幾率小、菌絲萌發(fā)快、發(fā)菌點多、出菇時間整齊等特點。 通過對菌球直徑的測定得出第 六天菌球直徑最小 ，最小為 ；通過對菌球密度的測定得出第六天菌球密度最大 ，最大為 128 個 /ml；通過對培養(yǎng)基 pH 的測定得出前七天內較適合菌種生長；通過對四種胞外酶活性的測定得出第六天酶活性 均 較高。 對于杏鮑菇液體菌種來講，胞外酶活性越大，說明菌種的活性越強，接種后菌絲萌發(fā)越快 [22]。 03 4 5 6 7 8 9Trianing daysOD values0 0 圖 6 杏鮑菇多酚氧化酶活性變化曲線 Figure 6 Pleurotus eryngii polyphenol oxidase activity curve 由圖 6 可知： 杏鮑菇多酚氧化酶活性變化曲線呈 S 型。 在前四天內羧甲基纖維素 酶活性 很低，到第五天急劇分泌，第六天達到最大， 最大為 ， 之后又迅速下降。 03 4 5 6 7 8 9Trianing daysOD values0 0 圖 4 杏鮑菇淀粉酶活性變化曲線 Figure 4 Pleurotus eryngii amylase activity curve 杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期的研究 12 由圖 4 可知： 杏鮑菇淀粉酶活性變化曲線呈拋物線型。 杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期的研究 10 0204060801001201403 4 5 6 7 8 9Trianing daysFungus ball density 圖 2 杏鮑菇液體菌種菌球密度變化曲線 Figure 2 Pleurotus eryngii liquid bacteria bacteria density curve ball 不同培養(yǎng)時間下的液體培養(yǎng)基 pH 變化 從液體菌種培養(yǎng)第三天起每天上午用精密 pH 試紙測量液體培養(yǎng)基 pH。河南科技大學畢業(yè)設計（論文） 9 另外有些小菌球聚合成大菌球也使菌球直徑變大。 數(shù)據(jù)處理 采用 Excel 等統(tǒng)計分析軟件進行分析。 曲線的繪制：以培養(yǎng)時間（天）為橫坐標 ， 羧甲基纖維素酶（ CMC酶）活性 OD 值 為縱坐標，繪制曲線。且配置過程中，溶液加熱溫度不宜超過 50℃ 。配制方法如下：將 黃豆粉 加水煮沸 30min 后，用 80 目的篩網過濾，取其濾液，加入其他成分，補足水分，分裝在 250ml 的三角瓶中 ， 121℃ 濕熱滅菌 30min。 設備儀器 電熱鼓風干燥箱， 霉菌培養(yǎng)箱 ， 立式電 ， 熱壓力蒸汽滅 菌器， 雙數(shù)顯汽浴恒溫振蕩器，離心機，分光光度計。 研究目的與意義 杏鮑菇的栽培，是以收獲子實體為目的的，并通過市場渠道而獲得經濟效益，菌種雖然不是最終目的，但是重要的中間手段。但杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期的研究 4 對于液體菌種存在的保存期短，易失活，易污染，不便運輸?shù)葐栴}，還未見提出有效的解決辦法。此外，采用液體菌種的栽培袋菌齡短，出菇整齊一致，適合出口要求，在價格上占優(yōu)勢。 四、成本更低 。液體指的是培養(yǎng)基物理狀態(tài)，液體深層培養(yǎng)就是發(fā)酵工程技術 [12]。鉀、磷人體必需元素在杏鮑菇子實體內含量也相當高。 杏鮑菇的作用和價值 杏鮑菇的營養(yǎng)價值 杏鮑菇菌肉肥厚，質地脆嫩，特別是菌柄組織致密、結實、乳白，可全部食用，且菌柄比菌蓋更脆滑、爽口，被稱為 “ 平菇王 ” 、 “ 干貝菇 ” ，具有杏仁香味和如鮑魚的口感，適合保鮮、加工，深得人們的喜愛。 polyphenol oxidase activity gradually increased in the first five days, the seventh day maximum, the maximum is , and later dropped 。試驗以黃豆粉液體培養(yǎng)基為基礎，在溫度 25℃ ﹑振蕩速率 150 轉 /分鐘 、裝液量 100ml、接種量 10%的條件下培養(yǎng)，分別在第 9 天取樣，測定液體培養(yǎng)基中的菌球直徑、菌球密度、培養(yǎng)基 pH 以及 淀粉酶、羧甲基纖維素酶、多酚氧化酶和漆酶等 四種胞外酶活性。 2． 不同培 養(yǎng)時間 對 液體 菌種 四 種胞外酶 活性的 影響（ 淀粉酶、羧甲基纖維素酶、多酚氧化酶、漆酶）。 關鍵詞 ： 杏鮑菇； 液體培養(yǎng)； 培養(yǎng)時間； 液體菌種 杏鮑菇液體菌種最佳培養(yǎng)周期的研究 OPTIMAL CULTURE PERIOD OF LIQUID SPAWN OF PLEUROTUS ERYNGII ABSTRACT Pleurotus eryngii at home and abroad in recent years