【正文】 ,但不能直接鑒定 H5亞型禽流感病毒 ,而國內(nèi)僅有用 ELISA 檢測病毒抗體的報(bào)道。甲肝、乙肝和丙肝患者均可重疊感染戊型肝炎病毒。 快速進(jìn)行免疫反應(yīng)，較酶聯(lián)免疫法大大縮短了時(shí)間，提高了工作效率。電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)采用電促化學(xué)發(fā)光，使用非同位素金屬三聯(lián)吡啶釕作為標(biāo)記物，由電極激發(fā) ，在三丙胺的參與下，迅速穩(wěn)定發(fā)光，使得檢測結(jié)果穩(wěn)定可靠。 目 的：電化學(xué)發(fā)光與酶聯(lián)免疫檢測血清甲胎蛋白的比較 方 法： 標(biāo)本：隨機(jī)抽取 165份臨床送檢血清標(biāo)本，包括正常和異常標(biāo)本。對 HBV研究和檢測近年來有了迅速發(fā)展 ,但仍有許多現(xiàn)象無法解釋清楚。對于一些免疫功能亢進(jìn)的患者 ,由于抗 HBS產(chǎn)生過早 ,中和了 HBsAg,使之無法檢測出 ,而呈現(xiàn) HBeAg陽性。在這 6例血清中 ,當(dāng)我們送至上級醫(yī)院用 RIA法檢測時(shí) ,有 3例 HBsAg陽性。 臨床資料及方法： 6例血清均來自 1997年 3月至 1998年 8月門診收檢的疑為乙型肝炎的患者。 （摘自：現(xiàn)代診斷與治療 2020年 3月第 15卷第 3期） １８ 血清反復(fù)凍融對 HBsAg 和抗 HBs 抗體檢測的影響 徐美艷 一、引言 :對 183份血清標(biāo)本凍融前、凍融 3次、凍融 6次后的 HBsAg和抗 HBs進(jìn)行了檢測和分析比較。 如果對現(xiàn)今有關(guān) SIV和 HIV的研究作仔細(xì)的探討，總結(jié)它的地理分布、蔓延的歷史、對人類和猿猴不同的致病性以及 HIV— O的存在，可以設(shè)想還有其他 HIV變異株在傳播，發(fā)現(xiàn)引起免疫 缺陷病的 HIV變異株，在 HIV1和 HIV— 2試驗(yàn)陰性的病人技術(shù)上是簡單的，可以將這類變異株稱之為HIV— U，如果變異株不引起典型的臨床癥狀，其發(fā)現(xiàn)則甚困難。 展望 根據(jù)長期保留的非洲的血清分析， H1V是一新近的傳染病，人類的傳播在扎伊爾始于 1959年，烏千達(dá)始于 1972年，馬拉維始于 1974年， HIV— 2似乎在相同的時(shí)間出現(xiàn)相應(yīng)流行， 1988年之后在象牙海岸的首府阿比讓， 265例艾滋病病人中至少 11例，確診為單純 HIV— 2感染，與 H1V相似的病毒也在猿猴中傳播， 例如 SIV— 1在黑猩猩， SIV— 2在白面猴或長尾猴中傳播，這些種系是自然感染的，而不是在與人類接觸后或在飼養(yǎng)過程中被感染的，但是獼猴是一個(gè)例外，是在飼養(yǎng)后感染SIV— 2的。 競爭 ELISA 有兩種試劑，采用自然和重組 HIV— 1抗原，競爭歐洲和美國感染者的抗 HIV。比利時(shí)已有 5例，法國 14例。另外，間接法在操作上采用兩步加樣，而夾心法為一步加樣，避免了加樣誤差。 3 結(jié)論 進(jìn)行獻(xiàn)血者 HTLV感染的篩查必須具備合適的檢測試劑盒。 血清盤考核 為進(jìn)一步驗(yàn)證比較試劑質(zhì)量 ,分別用 Genelabs試劑和北京試劑檢測美國BBI HTLV參比血清。 單克隆抗體的進(jìn)一步篩選。但是需要注意的是如何避免和降低標(biāo)本中出現(xiàn)的假陽性） 問題。 在技術(shù)流程方面，主要包括樣本采集和制備，反應(yīng)體系準(zhǔn)備，熒光定量 PCR反應(yīng)及檢測等幾個(gè)部分?？蓹z測的標(biāo)本包括排泄物、口鼻腔分泌物、雞胚培養(yǎng)的完整病毒或裂解病毒等。 （二）禽流感的預(yù)防 (1)管理傳染源： ① 加強(qiáng)禽類疫情監(jiān)測； ② 對受感染動物應(yīng)立即銷毀，對疫源地進(jìn)行封鎖，徹底消毒； ③ 患者應(yīng)隔離治療，轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)應(yīng)戴口罩。 禽流感的 宿主： （ 1）帶 H5N1病毒的家禽和患禽流感的家禽：目前肯定的是雞，而火雞、鴨和鵪鶉等尚未見報(bào)道。福爾馬林、 丙內(nèi)酯、氧化劑、稀酸、乙醚、脫氧膽酸鈉、羥胺、十二烷基硫酸鈉和銨離子能迅速破 壞其傳染性。幾種碳水化合物包括核糖 (在 RNA中 )、半乳糖、甘露糖、墨角藻糖和氨基葡糖，在病毒粒子中主要以糖蛋白或糖脂的形式存在。這 8個(gè)片段編碼 10個(gè)病毒蛋白，其中 8個(gè)是病毒粒子的組成成分 (HA、 NA、 NP、 M M PB PB2和 PA)，另兩個(gè)是分子質(zhì)量最小的 RNA片段，編碼兩個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白 —— NS1和 NS2。前三種狀態(tài)是可逆的 ,最后一種是不可逆的。除此之外， AFP還有以下結(jié)構(gòu) 特征： AFP電荷異質(zhì)性：由于 AFP上的糖基化和其結(jié)合的配體差異，造成具有相同的免疫學(xué)特性的AFP單體，所帶電荷量表現(xiàn)不均一。 在實(shí)際生產(chǎn)中， AFP試劑表現(xiàn)出了與其他雙抗體夾心法試劑不同的特點(diǎn)，比如對生產(chǎn)工藝要求高，標(biāo)準(zhǔn)品活性易下降，不同來源 AFP標(biāo)本定量差異大等。它不是自命精英和自我膨脹的，不是高高在上的救世主的，不是超人式的霸主式的，而是寧可低調(diào)的 。我愿意從學(xué)生做起，從學(xué)習(xí)思考實(shí)驗(yàn)考察判斷做起。 以往的文獻(xiàn)大多關(guān)于診斷和應(yīng)用 方面，很少論述到 AFP結(jié)構(gòu)特性與功能的分子機(jī)制。 AFP的免疫化學(xué)異質(zhì)性：免疫親和電泳層析確定的 AFP分子的表位有暴露的和隱藏的兩種形式。不可逆性的變性主要是因?yàn)獒尫诺呐潴w不可恢復(fù)。 NS1與胞漿包含體有關(guān)，但對NS1和 NS2的功能目前尚不清楚。 病毒蛋白及潛在的糖基化位點(diǎn)是病毒基因組特異的，但病毒膜的糖蛋白或糖類鏈的脂質(zhì)和碳水化合物鏈的成分，是由宿主細(xì)胞確定的。禽流感病毒沒有超常的穩(wěn)定性，因此對病毒本身的滅活并不困難。 （ 2）帶 H5N1病毒的野禽和患禽流感的野禽：如野雞、水禽和海鳥等。 (2)切斷傳播途徑： ① 接觸患者或患者分泌物后應(yīng)洗手； ② 處理患者血液或分泌物時(shí)應(yīng)戴手套； ③ 被患者血液或分泌物污染的醫(yī)療器械應(yīng)消毒； ④ 發(fā)生疫情時(shí)，應(yīng)盡量減少與禽類接觸，接觸禽類時(shí)應(yīng)戴上手套和口罩，穿上防護(hù)衣。 H5型流感病毒 HA抗體原理： 采用競爭法檢測血清標(biāo)本中的 H5型流感病毒 HA抗原特異性抗體。 免疫熒光法 免疫熒光技術(shù)就是熒光抗體技術(shù)（ FAT）。間接免疫熒光技術(shù)也可以用來檢測核蛋白（ NP）基質(zhì)蛋白（ MP）抗原與抗體的反應(yīng)，其敏感性很高。 （部分內(nèi)容摘自國家農(nóng)業(yè)部《 H5N1高致病性禽流感防治手冊》） 4 種 ELISA 試劑篩查獻(xiàn)血人群抗 HTLV 結(jié)果評價(jià) 康麗娜 人類 T淋巴細(xì)胞白血病病毒（ HTLVⅠ /Ⅱ）在全球廣泛存在，主要流行于日本西南部、加勒比海和中、南非洲、巴布亞新幾內(nèi)亞等部分地區(qū)。 主要儀器 美國伯樂 550酶標(biāo)儀，美國寶特 Elx50洗板機(jī)。既往國內(nèi)僅 有間接免疫熒光法（ IFA）試劑供應(yīng)，該法由于操作相對復(fù)雜，尤其是結(jié)果的判斷需要昂貴的熒光顯微鏡，而且受主觀因素影響大，因此難以作為篩選試劑，而進(jìn)口的 ELISA試劑或明膠微粒凝集法（ GPA）試劑價(jià)格昂貴，這也從客觀上阻礙了我國 HTLV相關(guān)研究的進(jìn)行及篩檢策略的實(shí)施。因此 在方法學(xué)上夾心法比間接法具有一定的優(yōu)勢。巴黎報(bào)道的 HIV— O感染者的性伴研究表明 HIV— O與 HIV— 1的傳播感染性相似，致病機(jī)制亦無區(qū)別， HIV— O的致病性并不亞于 HIV— l. 診斷 ELISA 估計(jì)約 80％一 90％含有 HIV— O抗體血清，可用抗 HIV— l十 2ELISA試劑 檢出，反應(yīng)可用 HIV— 2抗原的交叉反應(yīng)解釋。競爭 ELISA顯示高度特異性，抗 HIV— O用此試劑僅儉出臨界值，或不能檢出，這種試劑識別抗 HIV— O的缺點(diǎn)，正如在 HIV— 2出現(xiàn)的問題，可通過加入 HIVO抗原而被排除。如將猿猴病毒與人類的病毒相比較， H1V— l與 SIV— 1有很大的相似性， SIV— l似乎是H1V— l和 HIVO之間最早的聯(lián)親。 結(jié)論：今后對 HIV的診斷，必須針對那些已有的或新傳播的 HIV變異株，研究確診的方法。 二、材料和方法： 材料：西京醫(yī)院門診乙肝 5項(xiàng)檢測血清 183份，年齡、性別、診斷不限。 試劑及方法試劑盒均由上海科華公司提供 (ELISA),嚴(yán)格按說明書操作。 血清中類風(fēng)濕因子 (RF)干擾。 HBsAg主要以小球形顆粒存在 ,HBeAg僅存在于 Dane顆粒上 ,在 HBsAg消失與 HBsAb出現(xiàn)后 ,仍有部分 HBV遺留在血液中 ,其 Dane顆粒表面的 HBsAg被抗體包 裹 ,故檢測結(jié)果陰性。在全國各大小醫(yī)院里 ,ELISA法以其經(jīng)濟(jì)、簡便、易于開展和掌握已成為確診乙型肝炎最直接的實(shí)驗(yàn)診斷方法 ,其結(jié)果具有相當(dāng)?shù)目尚判浴? 儀器與試劑：全自動酶免疫分析系統(tǒng) ES300 和全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)Elecsys2020 及其配套試劑，質(zhì)控品，羅氏公司提供。磁性微珠包被技術(shù)的應(yīng)用提高了檢測的靈敏度。一次性加樣頭的使用及流動沖洗過程，徹底避免了交叉污染。各型肝炎之間無交叉免疫，當(dāng)出現(xiàn)重疊感 染時(shí)可加重病情及延長病程；乙肝與戊肝重疊感染者癥狀持續(xù)時(shí)間長、肝功能損害明顯。本研究在已制備的抗 H5 亞型 AIV 單克隆抗體的基礎(chǔ)上 ,建立檢測 H5 亞型禽流感病毒的單抗介導(dǎo)、生物素放大的捕獲 ELISA ,期望進(jìn)一步研制出用于禽流感臨床診斷和病原學(xué)監(jiān)測的、特異、簡便和易于推廣的免疫學(xué)技術(shù)。 每孔加入 100 μ l 1∶ 1 000稀釋的 HRP 標(biāo)記單抗 ,37 ℃孵育 90 min ,PBST洗板 5 次 ,顯色 15 min ,測定 A450值。 結(jié)論 初步建立了檢測 H5 亞型禽流感病毒的單抗 — 生物素捕獲 ELISA 方法 ,為研制試劑盒和進(jìn)一步應(yīng)用試驗(yàn)提供了基礎(chǔ)。 2．腫瘤標(biāo)志物測定標(biāo)準(zhǔn)曲線參數(shù)的監(jiān)測結(jié)果：在 RIA中，常用的標(biāo)準(zhǔn)曲線參數(shù)有零標(biāo)準(zhǔn)結(jié)合率 (Ｂ 0%),非特異性結(jié)合率 (ＮＳＢ %)以及（ＥＤ 80、ＥＤ 50、ＥＤ 20） 3個(gè)有效劑量值共 5個(gè)參數(shù)。 分析 : AFP,還包括其他產(chǎn)品 ,我們同樣要建立完善的室內(nèi)質(zhì)控品。 (3)用高免型特異兔抗血清將滅活的 FMDV抗原捕獲到 ELISA板上。 （摘自： Ivonne 國外獸醫(yī)學(xué) — 畜禽傳染病 第 15卷第 4期 1995年 11月） ELISA 檢測結(jié)核 IgG 抗體對結(jié)核病的診斷價(jià)值 趙昱 一． 目的 應(yīng)用 ELISA 法檢測抗結(jié)核分支桿菌抗體，對結(jié)核病的診斷具有一定的意義。 四． 結(jié)論 血清抗 PPDIgG 檢測是活動性結(jié)核病一項(xiàng)有價(jià)值的診斷方法，并可用于評價(jià)結(jié)核病治療的轉(zhuǎn)歸。 HPV 特異性強(qiáng)，單一型別的疫苗保護(hù)率低，一種有效的 HPV疫苗可能需要多種不同的基因型，才能預(yù)防乳頭瘤病毒引起的多種癌癥， HPV 的 4 價(jià)疫 苗（ HPV 1 16 和 18）保護(hù)率在 80%以上。 目的： 模擬體外溶血造成血清中不同血紅蛋白濃度 ,來探討溶血對ＥＬＩＳＡ法檢測抗體的影響。Ｌ 1Ｈｂ液 50μｌ ,制成Ｈｂ濃度 16ｇ 1ｇＬ 1 的情況下未出現(xiàn)假陽性 , 核心抗體檢測原倍溶血血清在一定Ｈｂ濃度范圍內(nèi)出現(xiàn)假陽性。因而，使用單純檢測 HIV 抗體的診斷試劑進(jìn)行 HIV 感染 篩查，必定會造成部分患者漏診。利用純化的抗原抗體進(jìn)行標(biāo)記，對39 份已知血清進(jìn)行檢測 ，與荷蘭 Organon公司 HIV1+2 抗體、 p24 抗原、 ELISA 診斷試劑同時(shí)檢測結(jié)果進(jìn)行比較，證實(shí)有較強(qiáng)的特異性及敏感性。第 4 天后擴(kuò)增量明顯增多。 討 論 目前，第四代 HIV診斷試劑已 在歐洲通過注冊。 HIV 感染的婦女分娩后，新生兒從母體獲得 HIV 抗體可持續(xù)一年之久，而自身抗體的出現(xiàn)在 18個(gè)月之后，在這一時(shí)期，HIV抗體檢測結(jié)果并不能代表機(jī)體的感染狀況。利用桿狀病毒 /昆蟲細(xì)胞系統(tǒng)，表達(dá)的重組蛋白生物活性及空間結(jié)構(gòu)，與利用哺乳動物細(xì)胞表達(dá)的蛋白相近，且容易掌握，耗時(shí)較少。 ： ：初次免疫用 p24 蛋白（ 100ug/只）與完全福氏佐劑混勻后，背部及腹股溝多點(diǎn)皮下免疫 BALB/c 小鼠。 mAb 的效價(jià)測定：間接 ELISA 法。經(jīng) 3 次克隆化后獲得 2 株陽性細(xì)胞株。 （摘自：細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志， 2020年第 20卷第 6期 侯俊等） ３３ 丙型和庚型肝炎病毒混合感染母嬰傳播的研究 韓博 丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ )或庚型肝炎病毒 (ＨＧＶ )均可通過母嬰傳播途徑造成胎、嬰兒感染 ,已得到許多研究證實(shí)。所觀察的新生兒均無輸血及使用血液制品史。 2。我們在對單純 ＨＣＶ 或 ＨＧＶ 母嬰傳播研究 [1]的基礎(chǔ)上 ,進(jìn)一步探索普通孕婦 ＨＣＶ 和 ＨＧＶ 混合感染母嬰傳播的發(fā)生情況及影響因素 ,現(xiàn)報(bào)道如下。亞類為 IgG1。 ： ELISA間接法測定。 1 個(gè)月后，鼠尾靜脈采血，間接 ELISA 法測定特異性抗體的產(chǎn) 生。檢測時(shí)加入人血清后，20nmol/L 膠體金顆?？谷?IgG抗體結(jié)合物同時(shí)加入，經(jīng)過 5min孵育后，洗去未結(jié)合的膠體金顆粒，可分別讀取結(jié) 果。 P24 抗原在感染早期出現(xiàn)，當(dāng)機(jī)體 P24 抗體產(chǎn)生后，抗原抗體復(fù)合的形成使 P24抗原滴度下降。 HIV1 跨膜基因 gp41抗原性較強(qiáng)，因而，通常用于診斷試劑的標(biāo)記。經(jīng)特異性抗體 Western blot 檢３１ 測，確認(rèn)為 gp41抗原及 gp36 抗原。 結(jié) 果 HIV1 gp41基因重組桿狀病毒及 HIV2 gp36基因重組桿狀病毒感染 High Five 昆蟲細(xì)胞后的改變第 2天部分細(xì)胞變型，核仁增大，細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則。 目 的 研制可同時(shí)檢測 HIV HIV2 抗體及 p24 抗原快速診斷試劑。大約 5%～ 10%的紅細(xì)胞破壞標(biāo)本中Ｈｂ濃度才能達(dá)到 16ｇＬ 1 溶血血清有 3 例陽性 ,10 例陰性 ,且Ａ值均在臨界值附近。再用同一