生物制藥工藝學(xué)-生物制藥工藝技術(shù)基礎(chǔ)-醫(yī)藥保健-文庫吧在線文庫
【正文】 m，在同一條件下選好 2~5點(diǎn)土樣混在一起包好，表明采樣地點(diǎn)及日期備用。如有報(bào)道，則根據(jù)文獻(xiàn)收集可能性最大的的微生物進(jìn)行篩選。 (抗性基因 ) （ 1）菌種的退化與防止 生產(chǎn)菌種本來在自然環(huán)境下生長，所以在人工培養(yǎng)條件下，任何菌株通過一系列的轉(zhuǎn)接傳代都可能發(fā)生退化。根據(jù)具體情況，間隔一定時(shí)間后轉(zhuǎn)接。 冷凍干燥法：將菌種懸浮于脫脂消毒牛奶中，快速冷凍，真空干燥。 （六）細(xì)胞器的分離 為獲得結(jié)合在細(xì)胞器上的一些生化成分或酶系，常常要先得到細(xì)胞器再進(jìn)一步分離有效成分。 （ 2）添加保護(hù)劑 防止某些生理活性物質(zhì)的活性基團(tuán)及酶的活性中心受到破壞，如巰基是許多活性蛋白質(zhì)和酶催化活性基團(tuán)，極易被氧化，故提取時(shí)，常添加某些還原劑如半胱氨酸， ?－巰基乙醇。 (二 )酸堿度 多數(shù)生化物質(zhì)在中性條件下較穩(wěn)定， pH值一般應(yīng)控制在 4～ 9范圍內(nèi)，為了增加目的物的溶解度，往往要避免目的物的等電點(diǎn)附近進(jìn)行提取。分配系數(shù)和溶劑用量 溶劑萃取的注意事項(xiàng)： （ 1） pH 在萃取操作中正確選擇 pH值很重要。 （ 2）選用的溶劑，在萃取后，溶質(zhì)與溶劑要容易分離與回收。 表面水，毛細(xì)管中的水，細(xì)胞內(nèi)的水 （一）減壓干燥 （二）噴霧干燥 （三）冷凍干燥 第四節(jié) 生化物質(zhì)的分離純化方法 一、生物制藥中分離制備方法的特點(diǎn) 生物制藥中分離、制備方法有以下特點(diǎn)： （ 1）生物材料組成非常復(fù)雜。親和層析分離具有分離的專一性，高效性。 （ 4）根據(jù)物質(zhì)吸附性質(zhì)的不同進(jìn)行分離。 （ 5）產(chǎn)物均一性測定。因此，在相同或相似條件下連續(xù)使用同一種分離方法就不太適宜。（純度鑒定） 生物分子純度的鑒定方法很多，常用的有溶解度法、化學(xué)組成分析法，電泳法，免疫學(xué)方法，離心沉降分析法，各種色譜法，生物功能測定法，以及質(zhì)譜法。有些反應(yīng)對工藝條件要求很嚴(yán)，超過一定限度后，就會造成重大損失。 （ 10）消耗定額，原料成本，操作工時(shí)與生產(chǎn)周期計(jì)算。經(jīng)驗(yàn)放大法主要憑借經(jīng)驗(yàn)通過逐級放大（實(shí)驗(yàn)裝置，中間裝置，中型裝置和大型裝置）來摸索反應(yīng)器的特征。 在考查工藝條件的研究階段中，必須注意和解決： （ 1）原輔材料規(guī)格的過渡試驗(yàn) 在小試時(shí)，一般采用的原輔材料（如原料，試劑，溶劑，純化載體）規(guī)格較高，目的是為了排除原料中所含雜質(zhì)的不良影響，從而保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 四、分離純化方法步驟優(yōu)劣的綜合評價(jià) 每一個分離純化步驟的好壞，除了從分辨能力和重現(xiàn)性兩方面考慮，還要注意方法本身的回收率，特別是制備某些含量很少的物質(zhì)時(shí)，回收率的高低十分重要。早期分離純化用萃取，沉淀，吸附等一些分辨力低的方法較為有利，這些方法負(fù)荷能力大，分離量多兼有分離提純和濃縮的作用，為進(jìn)一步分離純化創(chuàng)造良好的基礎(chǔ)。 （ 1）確定制備物的研究目的及建立相應(yīng)的分析鑒定方法。 （ 2）根據(jù)分子電離性質(zhì)的差異性進(jìn)行分離。因此，分離操作步驟多，不易獲得高收率。 （三）用葡聚糖凝膠（ Sephadex）濃縮 （四）用聚乙二醇透析濃縮 （五）超濾濃縮 （六）真空減壓濃縮與薄膜濃縮 真空減壓濃縮在藥物生產(chǎn)中使用較為普遍，具有生產(chǎn)規(guī)模較大，蒸發(fā)溫度較低，蒸發(fā)速度較快等優(yōu)點(diǎn)。 （ 3）溫度 一般在室溫下或低溫下進(jìn)行萃取操作。離子型表面活性劑作用強(qiáng)，但是易引起蛋白質(zhì)等生物大分子的變性，非離子表面活性劑變性作用小，適合于用水、鹽系統(tǒng)無法提取的提取的蛋白質(zhì)或酶的提取。水合作用促使蛋白質(zhì)、核酸、多糖等生物大分子與水形成了水合分子或水合離子從而促使它們?nèi)芙庥谒蛩芤褐小? 生物材料及其目的物與提取有關(guān)的一些性狀包括溶解性質(zhì)、分子量、等電點(diǎn)、存在方式、穩(wěn)定性、比重、粒度、粘度，目的物含量，主要雜質(zhì)種類及溶解性質(zhì)，有關(guān)酶的特征等。 （ 2）壓力法 有壓榨法、高壓法和減壓法，滲透壓法。 砂土管法 — 取普通黃沙，洗凈過 60目篩，曬干，另取普通圓土研碎，過篩，曬干。 菌種退化防止措施：①防止基因突變，基因突變是菌種退化的一個主要原因，低溫保藏法可以減少突變得產(chǎn)生。選育方法基本上可以分成兩類：隨機(jī)選擇突變體；根據(jù)代謝的調(diào)節(jié)機(jī)制選擇各種突變體。有時(shí)用能分解的
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