檢驗(yàn)科微生物室-文庫(kù)吧在線文庫(kù)
【正文】 物安全柜 試劑、染液、質(zhì)控菌株、培養(yǎng)基 冰箱、酒精燈、接種環(huán)、游標(biāo)卡尺、溫度計(jì)等 光學(xué)顯微鏡 ? 室內(nèi)質(zhì)控 室內(nèi)質(zhì)控內(nèi)容包括對(duì)各種實(shí)驗(yàn)條件及實(shí)驗(yàn)過程進(jìn)行監(jiān)督 監(jiān)督的對(duì)象有儀器設(shè)備、培養(yǎng)基、鑒定系統(tǒng)等操作全過程 ? 室間質(zhì)評(píng) 臨床微生物室需建立室內(nèi)質(zhì)控 1 1 2 3 4 常規(guī)試驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控 培養(yǎng)基質(zhì)控 藥敏試驗(yàn)的質(zhì)控 自動(dòng)化設(shè)備質(zhì)控 ：鑒定和藥敏、血培養(yǎng)系統(tǒng) ATCC：美國(guó)典型菌株保存中心 主要來(lái)源 NCTC：英國(guó)國(guó)家典型菌株保存中 實(shí)驗(yàn)中用標(biāo)準(zhǔn)方法鑒定，鑒定值95％典型菌株，并經(jīng)多次傳代，特征衡定的菌株 質(zhì)控菌株 參考菌株 臨床分離菌 質(zhì)控必備菌株 細(xì)菌名稱 菌號(hào) 用途 金黃色葡萄球菌 ATCC 25923 紙片擴(kuò)散質(zhì)控 金黃色葡萄球菌 ATCC 29213 MIC測(cè)定質(zhì)控 大腸桿菌 ATCC 25922 紙片和 MIC 綠膿假單胞菌 ATCC 27853 紙片和 MIC 糞腸球菌 ATCC 29212 胸腺嘧啶含量測(cè)定 淋病奈瑟菌 ATCC 49226 淋球菌藥敏 流感嗜血桿菌 ATCC 49247 嗜血桿菌藥敏 肺炎克雷伯菌 ATCC 700603 ESBL陽(yáng)性菌 低溫速凍 苛養(yǎng)細(xì)菌 冷凍干燥 長(zhǎng)期保留菌株 參考菌株保存方法 高層瓊脂 非苛養(yǎng)菌 瓊脂斜面 現(xiàn)用菌株 參考菌株保存方法 室間質(zhì)評(píng) — 樣本的檢測(cè)操作程序 1. 測(cè)試環(huán)境、儀器、試劑的要求 ① 室溫： 20～ 25℃ ② 濕度： 80% ③ 試劑：所用試劑或試條均為儀器配套產(chǎn)品 ④ 質(zhì)控品：為儀器配套產(chǎn)品，并在使用效期內(nèi)，同時(shí)無(wú)變質(zhì)或污染。 5. 室間質(zhì)量控制： 是各地實(shí)驗(yàn)室之間進(jìn)行質(zhì)量控制的一種方式 ， 也是上一級(jí)實(shí)驗(yàn)室對(duì)各實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行質(zhì)量管理的手段 。目前，我們離 CLSI(臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì) )標(biāo)準(zhǔn)化文件要求還相差很遠(yuǎn)，我們應(yīng)進(jìn)行規(guī)范操作，才可能應(yīng)對(duì)微生物向人類的挑戰(zhàn)，才能適應(yīng)臨床的需要。 臨床微生物檢驗(yàn) 是對(duì)人體的各種物質(zhì)進(jìn)行微生物學(xué)檢驗(yàn)，整個(gè)檢驗(yàn)過程包括病人樣品的采集、運(yùn)送、處理，樣品中致病微生物的分離、培養(yǎng)、鑒定，藥物敏感試驗(yàn)，出具檢驗(yàn)報(bào)告。 6. 室內(nèi)質(zhì)量控制： 做好室內(nèi)質(zhì)控直接關(guān)系到日常檢驗(yàn)工作的質(zhì)量 。 ② 根據(jù)標(biāo)本種類，質(zhì)控菌株進(jìn)行培養(yǎng)分離鑒定。單個(gè)項(xiàng)目的得分計(jì)算公式為： (該項(xiàng)目的合格結(jié)果數(shù) 247。 ②飲食：某些血液成分受飲食影響較大，護(hù)士在標(biāo)本采集前要告訴患者明確的禁食時(shí)間及禁食內(nèi)容，以避免飲食因素影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 ? 標(biāo)本采前集的準(zhǔn)備：向臨床提供標(biāo)本采集手冊(cè) ， 對(duì)收集和運(yùn)送標(biāo)本的容器控制 ，無(wú)菌 、 不易碎 、 足夠大 ， 避免用木質(zhì)的棉拭子 （ 由于棉中所含的脂肪酸以及從木棒中滲出的樹脂和甲醛對(duì)細(xì)菌有抑制作用 ） 對(duì)細(xì)菌有毒害 。 標(biāo)本拒收的原則 ? 錯(cuò)誤標(biāo)簽 ? 標(biāo)本泄露 ， 標(biāo)本明顯被污染 ? 拭子上的標(biāo)簽干掉或者標(biāo)本量不夠 ? 標(biāo)本不適合所要求的試驗(yàn) ? 運(yùn)送標(biāo)本的時(shí)間過長(zhǎng)或所用運(yùn)送培養(yǎng)基不合適 —有可靠的標(biāo)本質(zhì)量評(píng)價(jià)方法 ? 痰標(biāo)本中 10個(gè)上皮細(xì)胞 /LP、 25個(gè) WBC/LP為不合格標(biāo)本 ? 有培養(yǎng)價(jià)值的糞便標(biāo)本：涂片鏡檢 WBC5個(gè) /HP， 未經(jīng)抗菌藥物治療的持續(xù)性腹瀉患者糞便 ? 傷口標(biāo)本：如出現(xiàn)上皮細(xì)胞 ， 提示標(biāo)本已受皮膚菌群的污染 ， 高倍視野中超過 5個(gè)鱗狀上皮細(xì)胞的傷口標(biāo)本不適合做厭氧培養(yǎng) 血液細(xì)菌培養(yǎng) 臨床上疑為敗血癥 、 膿毒血癥或其他血流感染的患者 ， 需做血液細(xì)菌培養(yǎng)以明確病原 。 ? 為防止污染正確的皮膚消毒特別重要！按照規(guī)范執(zhí)行。 ? 清潔中段尿 、 導(dǎo)尿?qū)Ч苣?、 經(jīng)恥骨上皮膚穿刺采集膀胱內(nèi)尿液 ， 送檢標(biāo)本以晨起第一次尿液為佳 ? 尿量不宜太多 ， 試管塞子與尿液不應(yīng)直接接觸 ? 留取導(dǎo)尿管尿要排空導(dǎo)尿管內(nèi)陳舊尿液 ， 倘留置尿管超過三天應(yīng)避免采用 。 分泌物的培養(yǎng) 1. 對(duì)開放性病灶的采集：如眼結(jié)膜膿性分泌物 、 扁桃體 、 外耳道 、 手術(shù)后切口 、 導(dǎo)管治療感染 、 瘺管內(nèi)膿液 、 生殖道分泌物等均屬于開放性病灶 。 ② 厚度 ： 一般厚度在 3mm，但 MH平板厚度 ≥ 4mm。 試劑質(zhì)控 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室常用的試劑包括染色液 、 診斷血清以及各種生化反應(yīng)試劑等 。 為保證血清凝集反應(yīng)結(jié)果準(zhǔn)確 ， 應(yīng)每 3個(gè)月對(duì)血清進(jìn)行一次質(zhì)控 。 1 革蘭染色：革蘭染色報(bào)告必須包括染色反應(yīng)或微生物種類和類別 ， 描述物種的形態(tài)或結(jié)構(gòu) 。 ， 如 ?D葡聚糖的檢測(cè) 。 ?如果被測(cè)菌是葡萄球菌或腸球菌，則應(yīng)孵育 24小時(shí)，再在透射光下分別觀察苯唑西林或萬(wàn)古霉素的透明抑菌圈內(nèi)有無(wú)耐甲氧西林或耐萬(wàn)古霉素菌落的微弱生長(zhǎng)，遇不敏感的結(jié)果需用稀釋法測(cè)定 MIC法確 ?變形桿菌 (遷移生長(zhǎng) )以及磺胺類藥物的紙片法藥敏忽略薄紗樣蔓延生長(zhǎng)，微弱生長(zhǎng)（ 20%或更少），克林霉素對(duì)葡萄球菌的抑菌圈內(nèi)如有薄霧狀菌苔應(yīng)報(bào)告細(xì)菌對(duì)克林霉素耐藥 ,不管其是否顯示“ D” 抑菌圈 五、實(shí)驗(yàn)后質(zhì)量控制 藥敏結(jié)果結(jié)果的審核 ? S敏感（ Susceptible）：用常規(guī)用量治療有效，常規(guī)用藥時(shí)達(dá)到的平均血藥濃度超過細(xì)菌的 MIC 5倍以上。 常規(guī)報(bào)告 24h,危重報(bào)告 1h－ 2ｈ 。 2．鑒定試劑質(zhì)量控制：購(gòu)入新的試劑；在更換批號(hào)；更換生產(chǎn)廠家；結(jié)果發(fā)生異常等情況時(shí)均應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制。 b. 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室室的工作是面向全院臨床醫(yī)生與患者。 i. 檢查差錯(cuò)發(fā)生率應(yīng)小于 ％。 e. 本室所進(jìn)行的試驗(yàn)方法、量值可溯源，不準(zhǔn)確度限制在國(guó)內(nèi)有關(guān)部分標(biāo)準(zhǔn)。 6．冰箱溫度記錄：按每一冰箱存放的物品不同設(shè)置不同的質(zhì)控范圍，特別對(duì)低溫冰箱；每天記錄一次。 ④ 錯(cuò)誤報(bào)告 : 未見到致病菌 ：可在 24小時(shí)報(bào)告初始結(jié)果，包括菌落計(jì)數(shù)和可能細(xì)菌種類，如氧化酶陰性的革蘭陰性桿菌；金黃色葡萄球菌等。 ? 應(yīng)分兩種報(bào)告形式： A. 危重感染報(bào)告 : B. 常規(guī)報(bào)告 : 報(bào)告的規(guī)范化
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