【正文】 物安全柜 試劑、染液、質(zhì)控菌株、培養(yǎng)基 冰箱、酒精燈、接種環(huán)、游標卡尺、溫度計等 光學顯微鏡 ? 室內(nèi)質(zhì)控 室內(nèi)質(zhì)控內(nèi)容包括對各種實驗條件及實驗過程進行監(jiān)督 監(jiān)督的對象有儀器設(shè)備、培養(yǎng)基、鑒定系統(tǒng)等操作全過程 ? 室間質(zhì)評 臨床微生物室需建立室內(nèi)質(zhì)控 1 1 2 3 4 常規(guī)試驗室內(nèi)質(zhì)控 培養(yǎng)基質(zhì)控 藥敏試驗的質(zhì)控 自動化設(shè)備質(zhì)控 ：鑒定和藥敏、血培養(yǎng)系統(tǒng) ATCC：美國典型菌株保存中心 主要來源 NCTC：英國國家典型菌株保存中 實驗中用標準方法鑒定，鑒定值95％典型菌株，并經(jīng)多次傳代，特征衡定的菌株 質(zhì)控菌株 參考菌株 臨床分離菌 質(zhì)控必備菌株 細菌名稱 菌號 用途 金黃色葡萄球菌 ATCC 25923 紙片擴散質(zhì)控 金黃色葡萄球菌 ATCC 29213 MIC測定質(zhì)控 大腸桿菌 ATCC 25922 紙片和 MIC 綠膿假單胞菌 ATCC 27853 紙片和 MIC 糞腸球菌 ATCC 29212 胸腺嘧啶含量測定 淋病奈瑟菌 ATCC 49226 淋球菌藥敏 流感嗜血桿菌 ATCC 49247 嗜血桿菌藥敏 肺炎克雷伯菌 ATCC 700603 ESBL陽性菌 低溫速凍 苛養(yǎng)細菌 冷凍干燥 長期保留菌株 參考菌株保存方法 高層瓊脂 非苛養(yǎng)菌 瓊脂斜面 現(xiàn)用菌株 參考菌株保存方法 室間質(zhì)評 — 樣本的檢測操作程序 1. 測試環(huán)境、儀器、試劑的要求 ① 室溫： 20～ 25℃ ② 濕度： 80% ③ 試劑：所用試劑或試條均為儀器配套產(chǎn)品 ④ 質(zhì)控品：為儀器配套產(chǎn)品，并在使用效期內(nèi)，同時無變質(zhì)或污染。 5. 室間質(zhì)量控制： 是各地實驗室之間進行質(zhì)量控制的一種方式 ， 也是上一級實驗室對各實驗室進行質(zhì)量管理的手段 。目前，我們離 CLSI(臨床實驗室標準化協(xié)會 )標準化文件要求還相差很遠，我們應(yīng)進行規(guī)范操作，才可能應(yīng)對微生物向人類的挑戰(zhàn)，才能適應(yīng)臨床的需要。 臨床微生物檢驗 是對人體的各種物質(zhì)進行微生物學檢驗，整個檢驗過程包括病人樣品的采集、運送、處理，樣品中致病微生物的分離、培養(yǎng)、鑒定，藥物敏感試驗，出具檢驗報告。 6. 室內(nèi)質(zhì)量控制： 做好室內(nèi)質(zhì)控直接關(guān)系到日常檢驗工作的質(zhì)量 。 ② 根據(jù)標本種類，質(zhì)控菌株進行培養(yǎng)分離鑒定。單個項目的得分計算公式為： (該項目的合格結(jié)果數(shù) 247。 ②飲食：某些血液成分受飲食影響較大，護士在標本采集前要告訴患者明確的禁食時間及禁食內(nèi)容，以避免飲食因素影響檢驗結(jié)果的準確性。 ? 標本采前集的準備：向臨床提供標本采集手冊 ， 對收集和運送標本的容器控制 ，無菌 、 不易碎 、 足夠大 ， 避免用木質(zhì)的棉拭子 （ 由于棉中所含的脂肪酸以及從木棒中滲出的樹脂和甲醛對細菌有抑制作用 ） 對細菌有毒害 。 標本拒收的原則 ? 錯誤標簽 ? 標本泄露 ， 標本明顯被污染 ? 拭子上的標簽干掉或者標本量不夠 ? 標本不適合所要求的試驗 ? 運送標本的時間過長或所用運送培養(yǎng)基不合適 —有可靠的標本質(zhì)量評價方法 ? 痰標本中 10個上皮細胞 /LP、 25個 WBC/LP為不合格標本 ? 有培養(yǎng)價值的糞便標本：涂片鏡檢 WBC5個 /HP， 未經(jīng)抗菌藥物治療的持續(xù)性腹瀉患者糞便 ? 傷口標本：如出現(xiàn)上皮細胞 ， 提示標本已受皮膚菌群的污染 ， 高倍視野中超過 5個鱗狀上皮細胞的傷口標本不適合做厭氧培養(yǎng) 血液細菌培養(yǎng) 臨床上疑為敗血癥 、 膿毒血癥或其他血流感染的患者 ， 需做血液細菌培養(yǎng)以明確病原 。 ? 為防止污染正確的皮膚消毒特別重要！按照規(guī)范執(zhí)行。 ? 清潔中段尿 、 導尿?qū)Ч苣?、 經(jīng)恥骨上皮膚穿刺采集膀胱內(nèi)尿液 ， 送檢標本以晨起第一次尿液為佳 ? 尿量不宜太多 ， 試管塞子與尿液不應(yīng)直接接觸 ? 留取導尿管尿要排空導尿管內(nèi)陳舊尿液 ， 倘留置尿管超過三天應(yīng)避免采用 。 分泌物的培養(yǎng) 1. 對開放性病灶的采集：如眼結(jié)膜膿性分泌物 、 扁桃體 、 外耳道 、 手術(shù)后切口 、 導管治療感染 、 瘺管內(nèi)膿液 、 生殖道分泌物等均屬于開放性病灶 。 ② 厚度 ： 一般厚度在 3mm，但 MH平板厚度 ≥ 4mm。 試劑質(zhì)控 臨床微生物實驗室常用的試劑包括染色液 、 診斷血清以及各種生化反應(yīng)試劑等 。 為保證血清凝集反應(yīng)結(jié)果準確 ， 應(yīng)每 3個月對血清進行一次質(zhì)控 。 1 革蘭染色：革蘭染色報告必須包括染色反應(yīng)或微生物種類和類別 ， 描述物種的形態(tài)或結(jié)構(gòu) 。 ， 如 ?D葡聚糖的檢測 。 ?如果被測菌是葡萄球菌或腸球菌，則應(yīng)孵育 24小時，再在透射光下分別觀察苯唑西林或萬古霉素的透明抑菌圈內(nèi)有無耐甲氧西林或耐萬古霉素菌落的微弱生長，遇不敏感的結(jié)果需用稀釋法測定 MIC法確 ?變形桿菌 (遷移生長 )以及磺胺類藥物的紙片法藥敏忽略薄紗樣蔓延生長，微弱生長（ 20%或更少），克林霉素對葡萄球菌的抑菌圈內(nèi)如有薄霧狀菌苔應(yīng)報告細菌對克林霉素耐藥 ,不管其是否顯示“ D” 抑菌圈 五、實驗后質(zhì)量控制 藥敏結(jié)果結(jié)果的審核 ? S敏感（ Susceptible）：用常規(guī)用量治療有效，常規(guī)用藥時達到的平均血藥濃度超過細菌的 MIC 5倍以上。 常規(guī)報告 24h,危重報告 1h－ 2ｈ 。 2．鑒定試劑質(zhì)量控制：購入新的試劑；在更換批號；更換生產(chǎn)廠家；結(jié)果發(fā)生異常等情況時均應(yīng)進行質(zhì)量控制。 b. 臨床微生物實驗室室的工作是面向全院臨床醫(yī)生與患者。 i. 檢查差錯發(fā)生率應(yīng)小于 ％。 e. 本室所進行的試驗方法、量值可溯源，不準確度限制在國內(nèi)有關(guān)部分標準。 6．冰箱溫度記錄：按每一冰箱存放的物品不同設(shè)置不同的質(zhì)控范圍，特別對低溫冰箱；每天記錄一次。 ④ 錯誤報告 : 未見到致病菌 ：可在 24小時報告初始結(jié)果，包括菌落計數(shù)和可能細菌種類，如氧化酶陰性的革蘭陰性桿菌；金黃色葡萄球菌等。 ? 應(yīng)分兩種報告形式： A. 危重感染報告 : B. 常規(guī)報告 : 報告的規(guī)范化