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高中生物同步課件:53血紅蛋白的提取和分離6人教版選修1-文庫(kù)吧在線文庫(kù)

  

【正文】 凝膠電泳法 電泳 帶電粒子在電場(chǎng)作用下發(fā)生遷移的過程。鹽水洗滌:用五倍體積的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 %的氯化鈉 溶液洗滌。 實(shí)驗(yàn)操作 ② 原理:透析袋能使小分子自由進(jìn)出,而大分子保留在袋內(nèi)。 裝填凝膠柱時(shí)不得有氣泡存在: 因?yàn)闅馀輹?huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果 。 ⑤收集: 待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí),用試管收集流出液,每 5ml收集一試管,連續(xù)收集。 ( 2)凝膠色譜柱的裝填 50cm高 裝配好的凝膠柱 ( 3)樣品加入與洗脫 ① 調(diào)節(jié)緩沖液面: 打開下端出口,使柱內(nèi)緩沖液緩慢下降到與凝膠面平齊,關(guān)閉出口。 ② 凝膠的前處理: 配置凝膠懸浮液: 計(jì)算并稱取一定量的凝膠浸泡于蒸餾水或洗脫液中充分溶脹后,配成凝膠懸浮液。 ②試管中溶液層次: 第 1層(最上層):甲苯層( 無色 透明 );第 2層(中上層):脂溶性物質(zhì)沉淀層( 白 色薄層固體 );第 3層(中下層):血紅蛋白的水溶 液層( 紅色透明液體 );第 4層(最下層):雜質(zhì)沉 淀層( 暗紅色 )。 (1)紅細(xì)胞的洗滌 : ① 洗滌目的 : 去除雜蛋白,以利于后續(xù)血紅蛋白的 分離純化。 ②
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