23--分解纖維素的細(xì)菌的分離-文庫(kù)吧在線文庫(kù)
【正文】 培養(yǎng)基的多糖底物，但分解纖維素的細(xì)菌可以產(chǎn)生纖維素酶，能分解這個(gè)多糖底物成為單糖，這樣剛果紅就不能結(jié)合上去了，氯化鈉溶液就可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去，這樣就留下大大小小的透明圈，大的透明圈當(dāng)然分解纖維素的能就強(qiáng)！ 在 產(chǎn)生明顯的透明圈 的菌落，挑取并接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上，在 300C－ 370C培養(yǎng)，可獲得 純化培養(yǎng) 。 在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些能夠 適應(yīng) 這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到 迅速繁殖 ，而那些 不適應(yīng) 這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁殖被 抑制 ，因此可以起到“濃縮”的作用。 選擇培養(yǎng) ② 制備選擇培養(yǎng)基： A、旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基？為什么？ 是液體培養(yǎng)基，原因是配方中無(wú)凝固劑（瓊脂） B、這個(gè)培養(yǎng)基對(duì)微生物是否具有選擇作用？如果具有，是如何進(jìn)行選擇的？ 有選擇作用，本配方中纖維素作為主要碳源，只有能分解纖維素的微生物可以大量繁殖。一般應(yīng)將濾紙埋于深約 10cm左右的土壤中。 纖維二糖 C1酶、 Cx酶 葡萄糖苷酶 葡萄糖 纖維素 ①取二支 20mL的試管 實(shí)驗(yàn)：纖維素酶分解纖維素的實(shí)驗(yàn) ②各加入一張濾紙條 ③各加入 ，物質(zhì)量為 的醋酸－醋酸鈉緩沖液 11ml和 10ml 甲 乙 ④在乙試管中加入 1mL纖維素酶 ⑤兩支試管固定在錐形瓶中，放在 140r/min的搖床上振蕩 1h ⑥ 結(jié)果：乙試管的濾紙條消失 討論 ：乙試管的濾紙條為什么會(huì)消失？甲試管的作用是什么？ 提示： 本實(shí)驗(yàn)的自變量是纖維素酶的有無(wú)，自變量的操縱方法是：在一支試管中添加適量（ 1mL）的纖維素酶溶液，在另一支試管不添加纖維素酶，但需加入等量的緩沖液，不能加入蒸餾水，否則會(huì)影響溶液的 pH。此外，木材、作物秸稈等也富含纖維素。 土壤取樣 選擇培養(yǎng) 梯度稀釋 將樣品涂布在鑒別纖 維素分解菌的培養(yǎng)基上 篩選產(chǎn)生透 明圈的菌落 ①分布環(huán)境 土壤取樣： 富含纖維素的環(huán)境中 操作步驟 由于生物適應(yīng)一定的環(huán)境，環(huán)境對(duì)生物有選擇作用，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對(duì)提高，因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。7H2O KH2PO4 MgSO4 課題 2是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培養(yǎng)基上，直接分離得到菌落。 方法二：在 時(shí)就加入剛果紅。 為了確定分離得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行 _____________實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有 ______ 發(fā)酵和 ______ 發(fā)酵。7H2O KCl 酵母膏、水解酪素 g g 適量 葡萄糖 明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù) ?(3)接種微生物最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，本實(shí)驗(yàn)宜采用 ________ 法， ? 原因是____
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