蛋白組學(xué)翻譯后修飾-文庫吧在線文庫
【正文】 發(fā)出針對特異磷酸化位點的單克隆抗體， ?pTyr， ?pSer， ?pThr ? 利用這些單克隆抗體進行親和純化，可以分離和富集特定磷酸化的蛋白 固定金屬鰲和親和層析 (Immobilized metal affinity chromatography ， IMAC) ? IMAC技術(shù)是用于富集磷酸化的肽段，對磷酸化蛋白質(zhì)的富集是無效的。 ? 磷酸化位點產(chǎn)生丟失 80kD或者 98kD的子離子。 ? 絲氨酸和蘇氨酸磷酸化肽段的質(zhì)量變化可能是 80Da，也可能是 98Da；酪氨酸磷酸化肽段只有 80Da的質(zhì)量數(shù)變化 PSD－ MALDI－ TOF－ MS ? PSD：源后衰變（ postsource decay），母離子在飛行中發(fā)生斷裂，丟失一個中性分子。 ? 糖基化 在許多生物過程中如免疫保護、病毒的復(fù)制、細胞生長、炎癥的產(chǎn)生等起著重要的作用 。 ? 化學(xué)修飾的類型也很多，包括 磷酸化 （如核糖體蛋白的 Ser， Tyr和 Trp殘基常被磷酸化）； 糖基化 （如各種糖蛋白）； 泛素化 （要進入蛋白酶體降解的蛋白）； 甲基化 （如組蛋白，肌蛋白），乙酰化 （如組蛋白）， 羥基化 （如膠原蛋白）等。 ? 利用了磷酸基團的負電性，與 IMAC柱上的帶正電的金屬離子結(jié)合，從而起到純化的作用。 糖基化的蛋白質(zhì)組學(xué)研究 糖基化蛋白的生物學(xué)意義 ? 在真核細胞中，有一半以上的蛋白質(zhì)被糖基化 ? 蛋白質(zhì)糖基化在蛋白質(zhì)折疊、蛋白質(zhì)定位和轉(zhuǎn)運、蛋白質(zhì)溶解性、抗原性以及細胞與細胞的相互作用等方面都有著重要的作用 ? 細胞膜的許多蛋白質(zhì)是以糖蛋白形式存在 ? 糖低聚物在細胞間信號傳遞中也起了重要的作用 ? 成為免疫系統(tǒng)調(diào)控和癌
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