【正文】 ............................... 15 實驗儀器 .......................................................................................... 15 實驗藥品 .......................................................................................... 15 實驗過程 ..................................................................................................... 16 實驗流程及裝置圖 .......................................................................... 16 實驗方案 .......................................................................................... 18 實驗過程中主要事項 ...................................................................... 20 第 3 章 結果與討論 ................................................................................................. 21 蘆丁標準曲線的制作 ................................................................................. 21 黃酮含量及提取率 ..................................................................................... 22 單因素實驗結果 ......................................................................................... 22 提取劑的影響 .................................................................................. 22 提取劑濃度的影響 .......................................................................... 23 提取溫度的影響 .............................................................................. 25 提取時間的影響 .............................................................................. 26 料液比的影響 .................................................................................. 27 正交實驗結果 ............................................................................................. 28 第 4 章 結 論 ............................................................................................................ 30 IV 參 考 文 獻 .............................................................................................................. 31 致 謝 ........................................................................................................................ 32 附 錄 A 英文譯文 .................................................................................................. 33 附 錄 B 英文原文 .................................................................................................. 44 5 第 1章 緒論 研究背景與研究意 義 決明子是我國傳統(tǒng)中藥，具有清肝明目、潤腸遁便的作用，用于治療各種眼科疾病。同時，決明子又可作食用中藥，是保健飲料的良好原料。 實驗結果表明乙醇提取法 效果最佳。決明種子膠是又良好的懸浮劑和乳化劑，既可作甘汞、重質(zhì)陶土的懸浮劑，亦可作橄欖油、液體石蠟和松節(jié)油的乳化劑．決明半乳甘露聚糖可作食品，藥品和化妝品的增調(diào)劑及印染色素的載 體，以上這些都使得決明予具有極其廣泛的開發(fā)利用前途。其性味甘、苦、咸、微寒，具有清肝明目，潤腸通便之功效，是國家衛(wèi)生部公布的 69種藥食同源的物質(zhì)之一 1。蒽醌糖苷是決明子降血脂的主 要成分之一，其能減少腸道對膽固醇的吸收。 (3) 減肥作用 6％濃度的決明子水煎劑能明顯抑制營養(yǎng)性肥胖大鼠體重增加，升高機體總抗氧化能力水平，且不影響食欲．無致腹瀉作用。 7 化學成分 研究 決明子為豆科植物決明 (Cassia obtusifolia L． )和小決明 (Cassia tora L． )的干燥成熟種子，主要含蒽醌類、萘駢一吡咯酮類、脂肪酸類、氨基酸和無機元素等成分。結果 SCAG體外給藥可明顯促進小鼠 T及 B淋巴細胞的增殖，增強巨噬細胞吞噬中性紅的能力，提高 NK細胞活性及分泌 TNF活性，并可促進 MLR，拮抗絲裂霉素 c對淋巴細胞增殖的抑制作用。 黃酮類物質(zhì)是本次研究的主要對象，其結構、性質(zhì)、功效以及提取方法將在下節(jié)重點介紹。一般黃酮、黃酮醇及其甙類多顯灰黃～黃色，查耳酮為黃一橙色，而雙氫黃酮、雙氫黃酮醇、異黃酮類不顯色或微顯黃色。 表 11黃酮類化合物的主要結構 名稱 三碳鏈部分結構 名稱 三碳鏈部分結構 黃酮類 花色素類 （續(xù)表） 名稱 三碳鏈部分結構 名稱 三碳鏈部分結構 酮蠢 異黃酮類 二氫黃酮類 查耳酮類 10 二氫黃酮醇 橙酮類 黃 2烷 3醇類 黃烷一 3,4二醇類 決明子中黃酮類功效 近幾十年來隨著生物學、生物化學、生理學的日 新月異的發(fā)展，黃酮類化合物的生物活性的研究引起了國內(nèi)外的重視。 (2) 抗癌抗腫瘤作用 許多黃酮類化合物具有抗腫瘤抗癌功能。 (6) 抑菌抗病毒 黃酮類化合物抗菌抗病毒作用已經(jīng)得到醫(yī)藥界的肯定。麥胚黃酮卷柏黃酮可降低糖尿病大鼠血清過氧化脂含量，增強谷光甘肽過氧化酶的活力。 12 決明子中黃酮類化合物為極性較大的甘元，所以主要用有機溶劑提取法 、微波提取法等方法。石灰水可以使～些鞣質(zhì)和水溶性雜質(zhì)沉淀生成鈣鹽沉淀，但浸出效果不如氫氧化鈉水溶液效果好，同時有些黃類化合物能與鈣結合成不溶性物質(zhì)，不被溶出。本方法經(jīng)常與液—— 液萃取法、吸附洗脫法相結合，能得到更高純度的精制物。同時，還可以通過控制臨界溫度和壓力達到選擇性提取和分離純化的目的。 研究的目的與內(nèi)容 本文的研究目的是應用有機溶劑萃取 方法，提取決明子中黃酮類化合物。 (7) 料液比對決明子 中 黃酮浸提效果的影響 。 16 表 22 實驗藥品 名稱 分子式 純度 生產(chǎn)廠家 蘆丁標準物質(zhì) C27H30O16 西安旭煌生物技術有限公司 95%乙醇 CH3CH2OH 天津永晟精細化工有限公司 無水甲醇 CH3OH 天津光復精細化工研究所 丙酮 CH3COCH 天津風船化學試劑科技有限公司 石油醚 天津永晟精細化工有限公司 亞硝酸鈉 NaNO2 天津永晟精細化工有限公司 硝酸鋁 Al2(NO3)3取待測液 10mL于 50mL容量瓶中，用 30％乙醇定容，取 10mL容量瓶中，以下按照測定蘆丁標準液吸光度的方法測定吸光度 A。 (3) 料液比對浸提效果的影響 分別采用 1: 1: 1:2 1: 1:35(g:mL)的料液比例按 3的操作步驟進行試驗，以濃度為 75%的乙醇為提取劑，回流提取時間為 ，提取溫度為 80℃ 時，提取決明子中黃酮類化合物的試驗，得出料液比對提取效果的影響。 (5) 配置黃 酮標準液時， 加入顯色劑后，需靜止一段時間，再加下一種藥品。 選取溶劑的要求是 : (1) 溶劑對所需成分的溶解度要大，對雜質(zhì)的溶解度要小，或反之?？紤]到提取效果、提取溶劑成本以及殘留等因素，以乙醇提取劑為最佳?；蛘呤窃诖藴囟认?，黃酮發(fā)生氧化分解。同理可知 B以 B2， C以 C3， D以 D3。 再 蘆丁為標準物質(zhì)， 繪制其吸光度標準曲線，以此標準曲線計算決明子中黃酮含量 。 再次感謝您們 !!! 最后要感謝在家鄉(xiāng)辛勤耕耘的父母，給予了無私的關懷與厚愛，您們對我的啟蒙與教導是我有生以來最大的財富。平均回收率為 %，相對標準偏差為 %（ n=5）。 Palaniswamya et al. 2021)。 Keith et al. 2021)。作為一個新興的提取方法，超聲提取法已經(jīng)被用作提取黃酮類化合物。系統(tǒng)的溫度能被 控制在一定范圍內(nèi)，因此，能夠避免熱分解。應用紫外 — 可見分光光度法 ，以 NaNO2–Al(NO3)3–NaOH顯色來測定馬齒莧中黃酮類化合物的含量。 所有的試劑和藥品均為分析純。應用索氏提取器，以石油醚為溶解進行脫脂， 直到顏色 消失。 準確地稱量 ，至于索氏提取器中，加入 80mL70%乙醇，隨后提取 ，濃縮提取液，然后按照上述所作 (按照 對微波萃取 的 描述 )。上層清夜至于 25mL容量瓶中，用 70%乙醇標定。多功能植物粉碎機 (FW100、北京、中國 )，用于樣品分碎。我們也在 2021年 6月，從湖南長沙郊區(qū) (中國 )收集了三個樣品的野生馬齒莧。紫外 — 可見分光光度法是應用最廣泛測定黃酮含量的方法。因此，這需要去發(fā)展更有效的和可靠的提取方法。 Zhang et al. 2021)。 34 Su et al. 2021。在的中國，馬齒莧作為一種食品和藥用植物被使用了數(shù)千年，它含有豐富的營養(yǎng)與蛋白質(zhì)、碳水化合物、 Ca, K, Zn, and Na (Aberoumand 2021)。結果表明：微波輔助提取法為最適合的提取馬齒莧中黃酮類化合物，因為其高效、提取時間短。 (4). 正交實驗選取四因素三水平方案，結果 表明決明子中黃酮的提取實驗中，黃酮提取率最高的實驗方案為 A2B2C3D3， 即以 75％乙醇為提取劑， 80℃ 下提取，提取時間 ，料液比 1:30； 各因素提取效果的影響程度依次為 C(料液比 )D(提取時間 )A(乙醇濃度 )B(固液比 ) (5). 在最佳提取工藝條件下， 得提取液吸光度為 ，黃酮濃度為 ，提取率為 %。 30 第 4章 結 論 我所 研究的題目決明子 黃酮提取工藝條件的研究。所以認為提取時間在 。因此，確定乙醇的體積濃度以 75％為好 因此，以濃度為 75％的乙醇作為提取劑時，決明子中黃酮類化合物的提取率達到最高。 圖 32 提取劑的影響 提取劑種類 吸光度 A 提取率 (%) 黃酮濃度 (μg/mL) 沸水 堿性水溶液（ PH=9） 13 75%乙醇 75%甲醇 75%丙酮 提取溶劑種類 對 黃酮的提取率的影響效果見圖 32 23 0 1 2 3 4 5 60102030405060708090100 黃酮提取率/%黃酮濃度/μm/mL 黃酮提取率 /% 黃酮濃度 / μ m /m L沸水 堿性水溶液 乙醇 甲醇 丙酮提取劑種類01020304050607080 圖 32 提取劑種類的影響 從圖 21以看出，在提取時間，提取料液比和一定的情況下，以水為提取劑的提取效果最差。 (++)/3=，由圖 31 的，黃酮的濃度為 。