【正文】 八頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。 duān)的測(cè)定,常用(ch225。)水解,胰蛋白酶(y237。,層析鑒定就可N端開(kāi)始(kāishǐ)確定被測(cè)肽段的氨基酸排列順序,第四步 肽段氨基酸順序(sh249。,第五步 肽鏈一級(jí)結(jié)構(gòu)(ji233。,四、肽與蛋白質(zhì)的人工合成(r233。hu224。,本章(běn zhānɡ)小節(jié),蛋白質(zhì)的生物學(xué)作用：功能蛋白、結(jié)構(gòu)蛋白 蛋白質(zhì)的組成〔元素組成、化學(xué)組成〕及蛋白質(zhì)含量的測(cè)定 二十種氨基酸的結(jié)構(gòu)、分類及名稱〔三字(sān z236。ir243。纖維蛋白質(zhì)——分子狀如纖維，其長(zhǎng)軸。,。nɡ)。 名詞解釋 等電點(diǎn)〔pI〕 肽鍵和肽鏈 肽平面及二面角 一級(jí)結(jié)構(gòu) 二級(jí)結(jié)構(gòu) 三級(jí)結(jié)構(gòu) 四級(jí)結(jié)構(gòu) 超二級(jí)結(jié)構(gòu) 結(jié)構(gòu)域 蛋白質(zhì)變性與復(fù)性 肽,第一百三十一頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。,2.二維磁共振技術(shù),3. 蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的預(yù)測(cè),〔1〕根據(jù)分子力學(xué)、分子動(dòng)力學(xué)、物理化學(xué)原理，從理論上計(jì)算推測(cè)蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu),〔2〕從蛋白空間結(jié)構(gòu)規(guī)律，從一級(jí)結(jié)構(gòu)推測(cè)空間結(jié)構(gòu)。ch233。)九肽,測(cè)得N端氨基酸殘基為Thr,又分別(fēnbi233。由于在不同部位斷鏈，只要(zhǐy224。d236。,第三步 肽鏈的局部(j duān)的測(cè)定,b. 二硝基苯氟法 ：過(guò)時(shí)，不用,第一百一十九頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。,一般(yībān)過(guò)程：,肽鏈分子中氨基酸殘基數(shù)=肽鏈的分子量247。,(六) 超速離心,第一百一十七頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。,分子篩層析(c233。,透析工作(gōngzu242。)，從而 到達(dá)分析和別離蛋白質(zhì)的目的。n xī)和有機(jī)溶劑沉淀,(二) 電泳(di224。,〔五〕蛋白質(zhì)的紫外吸收光譜(xī shōu ɡuānɡ pǔ),蛋白質(zhì)在遠(yuǎn)紫外光區(qū)〔200230nm〕有較大的吸收，在280nm有一特征吸收峰，可利用這一特性對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行定性定量(d236。,雙縮脲反響(fǎny236。)作用實(shí)際上是蛋白質(zhì)變性后進(jìn)一步開(kāi)展的不可逆結(jié)果。,(4) 生物堿試劑(sh236。nx236。,(2) 有機(jī)溶劑沉淀法,使蛋白質(zhì)脫去水化層,又能降低溶液的介電常數(shù)使蛋白質(zhì)外表(biǎomi224。ini224。nx236。nxi224。g242。,概念:,第九十二頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。n)形成水化層,外表同種電荷的斥力,〔二〕蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì),在溶液中能形成穩(wěn)定的膠體,第九十一頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。ng)主要取決于溶液的pH值。i)與氧結(jié)合的正協(xié)同效應(yīng),氧飽和度,靜脈血,動(dòng)脈血,氧分壓,P50,100% ,Hb,Mb,第八十八頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。h233。,O2,〔二〕血紅蛋白(xu232。nb225。ng d224。)來(lái)源的細(xì)胞色素c中不變的AA殘基,35個(gè)不變的AA殘基，是Cyt C 的生物功能所不可缺少的。)順序 1 2 3 4 5 6 7 8 HbA〔正常人〕 ValHisLeuThrProGluGluLys… HbS〔患 者〕 ValHisLeuThrProValGluLys…,第七十七頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。),Β亞基第6位氨基酸,正常人：Glu,患者(hu224。g242。,牛胰核糖核酸酶的變性(bi224。)具有獨(dú)立三級(jí)結(jié)構(gòu)肽鏈,稱為亞基,亞基(subunit),2.維持(w233。u) (quaternary structure),是指亞基間的空間排布、亞基間相互作用與接觸部位的布局，不包括(bāoku242。,疏水相互作用,由非極性基團(tuán)(jī tu225。i ji224。u)穩(wěn)定的因素,親水區(qū)： 親水區(qū)多位于分子(fēnzǐ)外表， 故球 形蛋白質(zhì)水溶性較好。xiē)結(jié)構(gòu)域締合成 具有三級(jí)結(jié)構(gòu)的分子或亞基,蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)(ji233。g242。n),一條多肽鏈中所有原子在三維空間的整體排布包含了主鏈構(gòu)象和側(cè)鏈構(gòu)象的內(nèi)容,第五十八頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。u)類型,βββ,αα,ββ,1 2 3 4 5,5 2 3 4 1,Β鏈,βαβ,β 迂回(yūhu237。u)域,(2) 結(jié)構(gòu)域〔structure domain〕,蛋白質(zhì)中相鄰的二級(jí)結(jié)構(gòu)單位〔即單個(gè)α－螺旋或β－折疊(zh233。n qǔ),細(xì)胞色素(s232。n),2.結(jié)構(gòu)特征,*第一個(gè)殘基的C=O與第四個(gè) 殘基的NH形成氫鍵.,*常見(jiàn)于球狀蛋白質(zhì)分子外表.,第五十三頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。,(２) ２～５條肽段平行排列構(gòu)成(g242。ngmi224。)片或β－片層。,(4)肽鍵(t224。n)為單位,以α－碳原子為轉(zhuǎn)折盤旋形成右手螺旋,第四十六頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。i ji224。u)類型,α－螺旋(lu243。φ和ψ稱作二面角，亦稱構(gòu)象角。ngmi224。i),第四十頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。)測(cè) 定根本戰(zhàn)略,第三十八頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。,一級(jí)結(jié)構(gòu)(ji233。u),蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的概念： 蛋白質(zhì)分子中所有氨基酸的排列順序(sh249。g242。,第二節(jié) 蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)(fēn zǐ ji233。n)分為：,單純蛋白質(zhì)——全部(qu225。)，其功能是促進(jìn)腺垂體釋放促甲狀腺素(調(diào)節(jié)糖代謝)。nɡ)的三肽,(1)組成,(2) 功能,GSH是體內(nèi)重要的復(fù)原劑,第二十七頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。,氨基酸在形成肽鏈時(shí)喪失(diūsī)了一分子水，肽鏈中的氨基酸分子已不完整，,氨基酸殘基,稱為(chēnɡ w233。n)中，與Ｃ－Ｎ相連的氧原子和氫原子呈反式構(gòu)型,〔反式〕,〔順式〕,肽鍵(t224。,肽和肽鍵(t224。,肽,氨基酸借肽鍵(t224。ng) 〔Edman反響〕,PITC〔phenylisothiocyanate〕,+,苯乙內(nèi)酰硫脲衍生物(PTHAA) （phenylisothiohydantionAA）,第十八頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。 苯丙氨酸的?max＝257nm，?257=2.0x102。ngy232。nɡ)解離和堿性解離的程度相等，,分子所帶的凈電荷為零，此時(shí)溶液(r243。,4. 堿性(jiǎn x236。n yǒu)極性基團(tuán)；中性,酪氨酸(Tyr),生理pH條件(ti225。)氨基(脯氨酸除外),3. α碳原子為不對(duì)稱(手性)碳原子(甘氨酸除外〕,一 氨基酸(amino acid) ——蛋白質(zhì)的根本構(gòu)成,氨基酸結(jié)構(gòu)通式,第五頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。)20種常見(jiàn)氨基酸外，從少數(shù)蛋白質(zhì)中還別離出一些稀有氨基酸，它們都是相應(yīng)常見(jiàn)氨基酸的衍生物。ngpǐn)Pr含量,硫(S) 0% ~ 4%,少量(shǎoli224。o)生理功能,蛋白質(zhì)〔protein〕是生活細(xì)胞內(nèi)含量最豐富、功能最復(fù)雜(f249。第一節(jié) 蛋白質(zhì)的化學(xué)(hu224。,蛋白質(zhì)的主要(zhǔy224。,碳(C) 50% ~ 55%,氫(H) 6% ~ 8%,氧(O) 19% ~ 24%,氮(N) 13% ~ 19%,~16%；N(g)6.25 = 樣品(y224。ngsh249。 zhǒnɡ)aa的R側(cè)鏈各不相同,2. α －碳原子上均連有一個(gè)(yī ɡ232。,2. 極性氨基酸,R基含有(h225。nɡ)氨基酸,R基有COOH(COO),帶負(fù)電荷,第十頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。,等電點(diǎn)(pI)：,氨基酸酸性(suān x236。,據(jù)此可以通過(guò)測(cè)定蛋白質(zhì)溶液(r243。 酪氨酸的?max＝275nm，?275=1.4x103。,氨基酸與苯異硫氰酯〔PITC〕的反響(fǎny236。)氨基酸的α羧基與,另一個(gè)氨基酸的α氨基,肽鍵的概念：,稱肽鍵(peptide bond),第二十頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。n),二肽,苯丙氨丙氨酸,第二十二頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。i ji224。n)為0.127nm,具有局部雙鍵性質(zhì),不能自由旋轉(zhuǎn),肽鍵中Ｃ－Ｎ鍵長(zhǎng)為0.132nm,第二十五頁(yè)，共一百三十二頁(yè)。ng)第一個(gè)肽鍵的羧基是谷氨酸的γ－羧基,由谷氨酸(Glu)、半胱氨酸(Cys)和甘氨酸(Gly)組成(zǔ ch233。,由下丘腦分泌(fēnm236。ng f232。i)蛋白質(zhì)——分子狀如纖維，其長(zhǎng)軸 比縱軸大于10：1,球狀蛋白質(zhì)——分子(fēnzǐ)狀如球形或橢圓形,常難溶于水，常作為細(xì)胞支架和細(xì)胞連接，如大量存在于結(jié)締組織中,?？扇苡谒?，如酶、