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18全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范要點(diǎn)(存儲(chǔ)版)

  

【正文】 圖 5 替代策略 Ⅲ (一般人群 VCT策略)的檢測(cè)及結(jié)果報(bào)告流程圖 ? HIV感染診斷 ( 根據(jù)替代策略制定 ) ? 嬰兒隨訪和檢測(cè)服務(wù)流程 ? 納入當(dāng)?shù)匕滩【C合防治系統(tǒng) ? 嬰兒 9~12月齡進(jìn)行 HIV抗體檢測(cè) ? 視為 HIV抗體( )常規(guī)兒童保健 ? 18月齡時(shí)再進(jìn)行 HIV抗體檢測(cè) ? 結(jié)果( +) ? 用另一種檢測(cè)試劑再次檢測(cè) ? 結(jié)果( ) ? 結(jié)果( +) ? 結(jié)果( ) ? 對(duì) HIV( +)產(chǎn)婦進(jìn)行咨詢,指導(dǎo)人工喂養(yǎng) 對(duì) H I V ( + )產(chǎn)婦進(jìn)行咨詢,指導(dǎo)人工喂養(yǎng) 嬰兒 9~ 12 月齡進(jìn)行 H I V 抗體檢測(cè) 結(jié)果( + ) 結(jié)果( ) 視為 H I V 抗體( )常規(guī)兒童保健 18 月齡時(shí)再進(jìn)行 H I V 抗體檢測(cè) 用另一種檢測(cè)試劑再次檢測(cè) 結(jié)果( ) 結(jié)果( + ) 結(jié)果( ) 結(jié)果( ) 結(jié)果( ) 結(jié)果( + ) 用另一種檢測(cè)試劑再次檢測(cè) 結(jié)果( + ) 確認(rèn)試驗(yàn) 結(jié)果( + ) 納入當(dāng)?shù)匕滩【C合防治系統(tǒng) HIV感染診斷 ( 根據(jù)替代策略制定 ) 嬰兒隨訪和檢測(cè)服務(wù)流程 3. HIV RNA定量測(cè)定(病毒載量測(cè)定) ( 1) 實(shí)驗(yàn)室功能分區(qū) 實(shí)驗(yàn)室原則上應(yīng)分為 4個(gè)獨(dú)立工作區(qū) ? 1) 試劑準(zhǔn)備區(qū) 、 樣品處理區(qū) 、 擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū) , 并設(shè)在不同房間 。 ? 4) 在滿足下列操作和清潔處理要求的前提下樣品處理區(qū)和試劑準(zhǔn)備區(qū)可設(shè)在同一房間內(nèi): ? ① 在生物安全柜內(nèi)操作 。 ? ② 樣品處理區(qū):冰箱 、 生物安全柜 、 離心機(jī) 、 加樣器 、 振蕩器 、 恒溫水浴 、 上下水設(shè)備 、 廢棄物容器 。 ? 不同病毒載量檢測(cè)方法的比較見表 2 ( John 、 Joel ,Medical Management of HIV Infection 2023 Edition p15) 表 2 不同病毒載量檢測(cè)方法的比較 Roche Bayer b i o M e r i e u x 商品名 A m p l i c o r Versant N u c l i S e n s 技術(shù)原理 RT PCR bDNA NASBA 結(jié)果比較 RT PCR 試驗(yàn)的結(jié)果近似于 或 版 b D N A 試驗(yàn)的結(jié)果 bDNA 2 . 0 版或 3 . 0 版的試驗(yàn)結(jié)果與 R o c h e R T PCR實(shí)驗(yàn)的結(jié)果具有可比性 結(jié)果與 RT P C R 和 b D N A 具有可比性,但支持性資料少于前者 優(yōu)點(diǎn) / 缺點(diǎn) 與 Bayer 的方法相比假陽(yáng)性較少。 動(dòng)態(tài)范圍 標(biāo)準(zhǔn):( 版) 400 750 , 0 0 0 c / m l 超敏:( 版) 50 75 , 0 0 0 c / m l bDNA 3 . 0 版: 75 500 , 0 0 0 c / m l N u c l i s e n s H I V 1 Q T : 176 3 , 5 0 0 , 0 0 0 c / m l 取決于標(biāo)本量 擴(kuò)增的亞型 版:只有 B 亞型 版: B G A H A G 標(biāo)本量 A m p l i c o r 0 . 2 m l 超敏 0 . 5 m l 1ml 10 μ l 2 ml 抗凝劑 EDTA EDTA EDTA 、肝素、全血、任何體液、PBMC 、精液、組織等 要求 6 小時(shí)之內(nèi)分離血漿,運(yùn)輸前在 20 ℃或 70 ℃冷凍。 而在感染早期 , 在抗原峰出現(xiàn)前后通常出現(xiàn)一個(gè)病毒載量的高峰 , 此高峰通常高于發(fā)病時(shí)的血漿病毒水平 , 并且有證據(jù)表明這個(gè)時(shí)期的病毒具有很高的感染能力 。 ? 4) 指導(dǎo)治療方案及療效判定 ? 臨床實(shí)踐證明 , 并非在任何情況下 HIV感染者都應(yīng)該進(jìn)行抗病毒治療 。10, 001?30,000c/ml時(shí) %。 ? 2) 設(shè)施和設(shè)備 ? ① 樣品處理區(qū):生物安全柜 、 離心機(jī) 、 冰箱 、水浴箱 、 旋轉(zhuǎn)振蕩器 、 精確移液器( 5 μ l ? 50μ l 、 20μ l ? 2 0 0 μ l 、200μ l?1000μ l) 。 靜脈采血收集血樣,將血液注入一個(gè)事先加入適當(dāng)抗凝劑的試管(有條件者最好用真空試管)。天氣熱時(shí),需要用一個(gè)隔熱的容器裝樣品,并且把這個(gè)容器放于另一個(gè)有冰袋和吸熱物質(zhì)的容器中。不要馬上加熱和冷凍樣品以使其達(dá)到室溫,因?yàn)檫@樣會(huì)對(duì)免疫表型檢測(cè)的結(jié)果產(chǎn)生不利的影響,散射光模式的不正常會(huì)顯示出所受到的影響。 ③ 不可檢測(cè)凝血的樣品 。 正確的報(bào)告 CD4+ T細(xì)胞應(yīng)該是那些 CD4+ 和 CD3+ 雙陽(yáng)性的細(xì)胞 。 5) 單平臺(tái)一步法由計(jì)算機(jī)軟件直接出結(jié)果并打印出報(bào)告單 , 報(bào)告單的內(nèi)容包括如下結(jié)果: CD45+ Abs Cnt; CD3+ Abs Cnt; CD3+ CD4+ %T Lym; CD3+CD4+ Abs Cnt;CD3+CD8+ %T Lym; CD3+CD8+ Abs Cnt; Th/Ts及其正常參考值范圍 (BD公司建立的正常參考值范圍見表 3),檢測(cè)人員簽字 。 ? 2)長(zhǎng)期監(jiān)測(cè) CD4+ T淋巴細(xì)胞絕對(duì)數(shù)的變化,有助于了解患者的病情發(fā)展,決定正確的治療方案,并觀察對(duì)治療的反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)室:福爾馬林和水的體積根據(jù)實(shí)驗(yàn)室大小而定】。如皮膚有傷口,應(yīng)當(dāng)反復(fù)輕輕擠壓,盡可能擠出損傷處的血液?;螂p汰芝 ( AZT 與 3TC 聯(lián)合制劑) 300mg/ 次,每日 2 次。 ②暴露后 72h內(nèi)應(yīng)當(dāng)考慮對(duì)暴露者進(jìn)行重新評(píng)估,尤其是獲得了新的暴露 情況或源患者資料時(shí)。當(dāng)?shù)丶部刂行膽?yīng)與當(dāng)?shù)赜嘘P(guān)專家聯(lián)系根據(jù)情況共同進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估,確定用藥的必要性、確定預(yù)防藥物和用藥程序,并將處理情況向主管行政部門報(bào)告。小型事故可在緊急處理后,立即將事故情況和處理措施報(bào)告主管領(lǐng)導(dǎo)和有關(guān)專家,以及時(shí)發(fā)現(xiàn)處理中的疏漏之處,使處理盡量完善妥當(dāng)。 ③各省和各系統(tǒng)籌建的貯備點(diǎn),需在中國(guó)疾控中心性艾中心備案。 19:00:5619:00:5619:00Tuesday, March 7, 2023 ? 1乍見翻疑夢(mèng),相悲各問年。 19:00:5619:00:5619:003/7/2023 7:00:56 PM ? 1成功就是日復(fù)一日那一點(diǎn)點(diǎn)小小努力的積累。 下午 7時(shí) 0分 56秒 下午 7時(shí) 0分 19:00: ? 楊柳散和風(fēng),青山澹吾慮。 2023年 3月 下午 7時(shí) 0分 :00March 7, 2023 ? 1業(yè)余生活要有意義,不要越軌。 :00:5619:00:56March 7, 2023 ? 1意志堅(jiān)強(qiáng)的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 2023年 3月 下午 7時(shí) 0分 :00March 7, 2023 ? 1少年十五二十時(shí),步行奪得胡馬騎。 下午 7時(shí) 0分 56秒 下午 7時(shí) 0分 19:00: ? 沒有失敗,只有暫時(shí)停止成功!。 19:00:5619:00:5619:003/7/2023 7:00:56 PM ? 1以我獨(dú)沈久,愧君相見頻。 7) 安全藥品儲(chǔ)備點(diǎn)的建立及管理機(jī)制 ①各省應(yīng)將職業(yè)暴露安全藥物儲(chǔ)備點(diǎn)(下稱儲(chǔ)備點(diǎn))的工作納入省衛(wèi)生行政部門的艾滋病防治工作規(guī)劃,盡快籌建貯備點(diǎn),組建由疾病預(yù)防控制專家和臨床專家組成的專家組,根據(jù)本省需求儲(chǔ)備適量的職業(yè)暴露預(yù)防藥品。結(jié)果填寫在報(bào)來的“艾滋病職業(yè)暴露人員個(gè)案登記表”(附表 7)內(nèi)。詳細(xì)記錄職業(yè)暴露發(fā)生的時(shí)間、地點(diǎn)及經(jīng)過;暴露方式;損傷的具體部位、程度;暴露物種類(培養(yǎng)液、血液或其它體液)和含有 HIV的情況;處理方法及處理經(jīng)過(包括赴現(xiàn)場(chǎng)專家或領(lǐng)導(dǎo)活動(dòng));是否采用暴露后預(yù)防藥物,并詳細(xì)記錄用藥情況、首次用藥時(shí)間(暴露后幾小時(shí)或幾天)、藥物毒副作用情況(包括肝腎功能化驗(yàn)結(jié)果)、用藥的依從性狀況。 2 有關(guān) HIV暴露后預(yù)防的一些具體建議:美國(guó) PEP失敗至少 21例,其原因包括:①大劑量病毒接種;②開始治療過晚;③用藥療程過短;④用藥劑量不足;⑤暴露源患者是否已用抗病毒藥物治療。 ? 暴露級(jí)別( E x po su r e C od e )的評(píng)估,分為 1 、 2 、 3 級(jí)。 ? HIV/AIDS的職業(yè)暴露后預(yù)防( Postexposure Prophylaxis, PEP)應(yīng)包括急救、對(duì)暴露級(jí)別的評(píng)估、暴露源嚴(yán)重程度的評(píng)估、預(yù)防性用藥的推薦處理方案、報(bào)告與保密。在“意外和事故的緊急處理措施”中新增了“低溫蒸汽甲醛氣體消毒”: ? 如果實(shí)驗(yàn)室一旦發(fā)生了重大潑濺事故,應(yīng)按嚴(yán)重情況處理,并采取以下措施: ? ①?gòu)奈廴咎幨枭⑷藛T,但要防止污染擴(kuò)散; ? ②控制污染 —— 鎖門并防止進(jìn)一步進(jìn)入; ? ③通知實(shí)驗(yàn)室主管領(lǐng)導(dǎo)、安全負(fù)責(zé)人等,以便查清情況,確定消毒處理的程序; ? ④如果認(rèn)為合適,可進(jìn)行生物安全柜和 /或?qū)嶒?yàn)室的低溫蒸汽甲醛氣體消毒,但生物安全柜和 /或?qū)嶒?yàn)室必須有可靠的密閉性能,人員必須完全離開。 因而 , 對(duì) HIV感染者和 AIDS病人定期進(jìn)行 CD4+、 CD8+T淋巴細(xì)胞 檢測(cè)具有十分重要的意義 。 ? ① 用淋巴細(xì)胞的總數(shù) ( 來自于 WBC及分類 ) 乘以淋巴細(xì)胞亞群的百分率 ( 從流式細(xì)胞儀的數(shù)據(jù)中得到 ) , 計(jì)算絕對(duì)數(shù)值 。 ? 2) 根據(jù) CD命名標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告數(shù)據(jù) , 用一個(gè)簡(jiǎn)短的描述解釋命名的意義 。不要馬上加熱和冷凍樣品以使其達(dá)到室溫 , 因?yàn)檫@樣會(huì)對(duì)免疫表型檢測(cè)的結(jié)果產(chǎn)生不利的影響 , 散射光模式的不正常會(huì)顯示出所受到的影響 。 ?3)樣品接收 ?樣品到達(dá)以后立即檢查試管及其所裝的血樣。 ?2)樣品運(yùn)輸 ?①在室溫下( 18?23℃ )保存和運(yùn)輸樣品,避免極端溫度(冷凍或過熱)。 在血球分析儀生產(chǎn)商允許的時(shí)間范圍內(nèi)檢測(cè) , 不超過 30h, 不檢測(cè)超出抗凝時(shí)間范圍的樣品 。 在 CD4+ 細(xì)胞數(shù)相同的情況下 ,年紀(jì)大的比年輕患者發(fā)展至 AIDS的危險(xiǎn)更大( AIDS 2023; 18: 5158.) 。501?3, 000c/ml時(shí) %。 因此定期進(jìn)行病毒載量的檢測(cè)有助于確定疾病發(fā)展的階段 , 以確定相應(yīng)的治療方案 。因此 , 使用此指標(biāo)應(yīng)綜合其它檢測(cè)數(shù)據(jù)和樣品背景情況進(jìn)行綜合判斷 。 動(dòng)態(tài)范圍最大。 ? 核酸序列擴(kuò)增試驗(yàn) ( NASBA) 。 ? 2)各區(qū)域的設(shè)施和設(shè)備應(yīng)為區(qū)域性專用,開展特定試驗(yàn)時(shí)應(yīng)根據(jù)要求在相應(yīng)區(qū)域放置專用設(shè)備。 ? 2) 擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開 , 須使用不同的房間 , 兩區(qū)之間最好有一定的間隔 。 ? ② 第二種篩查試劑檢測(cè)陰性則用第三種篩查試劑( 另一種高特異性試劑 ) 檢測(cè);第二種篩查試劑檢測(cè)為陽(yáng)性則按疑似陽(yáng)性咨詢 , 建議進(jìn)一步做確認(rèn)試驗(yàn) , 按確認(rèn)試驗(yàn)的結(jié)果報(bào)告 。 ? ② 兩種試劑復(fù)測(cè)均為陽(yáng)性 , 且其中第三代 ELISA試劑復(fù)測(cè)樣品 OD值與臨界值 ( Cutoff) 的比值( S/CO) ≥ , 上報(bào)疫情 ( 附表 4) 。 ? ① 廢棄物缸: %次氯酸鈉 。 ? 各級(jí)實(shí)驗(yàn)室血清庫(kù) /毒種庫(kù)的設(shè)置按有關(guān)規(guī)定執(zhí)行 。 ? 3) 建立嚴(yán)格的保密制度并定期檢查 ? ① 與 HIV/AIDS相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的所有資料均應(yīng)嚴(yán)格保密 , 包括送檢單與檢測(cè)記錄的保管 、 報(bào)告單的發(fā)放和工作人員年度采血檢測(cè)等 。 實(shí)驗(yàn)室的安全責(zé)任人要對(duì)工作和環(huán)境的安全負(fù)責(zé) , 所
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