分子生物學(xué)緒論7468584239(存儲版)
【正文】 ECORI轉(zhuǎn)化 連接酶細(xì)菌基因工程重組 DNA技術(shù)操作的主要步驟載體質(zhì)粒 噬菌體 病毒目的基因（外源基因）基因組 DNA cDNA 人工合成 PCR產(chǎn)物限制酶消化開環(huán)載體 DNA 目的基因連接酶重組體轉(zhuǎn)化 體外包裝，轉(zhuǎn)染帶重組體的宿主篩選表型篩選 酶切電泳鑒定 菌落原位雜交重組 DNA技術(shù)操作過程可形象歸納為 分 分離目的基因 切 限制酶切目的基因與載體接 拼接重組體 轉(zhuǎn) 轉(zhuǎn)入受體菌 篩 篩選重組體 基因工程是創(chuàng)造奇跡的科學(xué)，有著驚人的發(fā)展?jié)摿蜆O其廣闊的應(yīng)用前景o “我們建議像縫紉一樣，把基因連接到工業(yè)微生物中，促使它們生產(chǎn)大量的生命所需的蛋白質(zhì) ……這是生物和醫(yī)學(xué)的真正大革命。在個體生長發(fā)育過程中生物遺傳信息的表達(dá)按一定的時序發(fā)生變化，并隨著內(nèi)外環(huán)境的變化而不斷加以修正。o 巨大的基因組信息給科學(xué)家?guī)砹饲八从械奶魬?zhàn)。復(fù)習(xí)題o 分子生物學(xué)歷史上，具有重要意義的理論上和技術(shù)上的三大發(fā)現(xiàn)分別是什么？o 證明生物的遺傳物質(zhì)是 DNA的經(jīng)典實驗有哪些？其主要過程是怎樣的？o DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的意義是什么？o 限制性內(nèi)切酶具有什么特點(diǎn)？在基因工程中有什么意義？o 什么是克隆載體和表達(dá)載體？o 重組 DNA技術(shù)的基本過程是怎樣的？謝謝觀看 /歡迎下載BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH。基因組、功能基因組與生物信息學(xué)研究o 測定基因組序列只是了解基因的第一步，基因組計劃并不能直接闡明基因的功能，更不能預(yù)測該基因所編碼蛋白質(zhì)的功能和活性，所以，并不能指導(dǎo)人們充分準(zhǔn)確地利用這些基因的產(chǎn)物。無論是對啟動子的研究，還是對轉(zhuǎn)錄因子的克隆與分析，都離不開重組 DNA技術(shù)。這一發(fā)現(xiàn)改變了傳統(tǒng)的分子生物學(xué)關(guān)于 DNA ? RNA ? 蛋白質(zhì)的概念 ,因而獲得 Nobel Prize。末端Klenow片段 又名 DNA聚合酶 I大片段，具有完整 DNA聚合酶 I的 5??3?聚合、 3??5?外切活性，而無 5??3?外切活性。(The largest fragment) (The smallest fragment)o 采用幾種限制性內(nèi)切酶組合可以使 DNA分子產(chǎn)生特定的片段 . n . EcoRI + HindIIIDNA連接酶 (DNA ligase )o 1967年在三個實驗室同時發(fā)現(xiàn)的。o 確定了遺傳信息的傳遞方式n 1961 年 Monod 和 Jacob 提出了操縱子學(xué)說；n 1964 年 Nirenberg 等提出了 “三聯(lián)體密碼說 ”；n Crick 提出了遺傳信息流向和表達(dá)的 中心法則o 這三大發(fā)現(xiàn)大大促進(jìn)了生命科學(xué)的迅速發(fā)展，為基因工程的誕生奠定了重要的理論基礎(chǔ)． Gene Expressiono 中心法則 (central dogma)闡述了生物世代、個體以及從遺傳物質(zhì)到性狀的遺傳信息流向，即遺傳信息在遺傳物質(zhì)復(fù)制、性狀表現(xiàn)過程中的 信息流向o 最初由 Crick提出，并經(jīng)過了多次修正 o 基因操作的工具酶的發(fā)現(xiàn)n 限制性核酸內(nèi)切酶的發(fā)現(xiàn)與限制性核酸內(nèi)切酶的發(fā)現(xiàn)與 DNA的切割的切割n DNA連接酶的發(fā)現(xiàn)與連接酶的發(fā)現(xiàn)與 DNA片段的連接片段的連接 GGATCCCCTAGGGCCTAGGATCC G+Bam HⅠ限制性核酸內(nèi)切酶o 限制性核酸內(nèi)切酶 (restriction endonuclease, RE)是 識別 DNA
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