發(fā)酵工程課程設(shè)計ppt課件(存儲版)
【正文】 分析 在眾多實驗因素中找出主要因素 ? 應(yīng)用正交試驗（因素比較少）和 PB（ PlackettBurman）實驗。通過這步分析可以的回歸方程，進而得到最優(yōu)培養(yǎng)基。 ?如果是大腸桿菌保種，甘油終濃度為15%. ? 實驗進行前，無菌室及無菌操作臺以紫外燈照射 3060 分鐘滅菌，以 70 %酒精擦拭無菌操作臺面，并開啟無菌操作臺風扇運轉(zhuǎn) 10分鐘后，才開始實驗操作。盡量不要將瓶蓋蓋口朝上放臵桌面。 ⑤ .通過劃平板。為了盡快逼近最優(yōu)值，增加步長通常取最大 響應(yīng)面分析 ? 常用的有中心復(fù)合法和 BB法（ BoxBehnken）。由于本實驗缺少調(diào)節(jié)空氣流量的電子閥裝臵，對空氣流量只能采取手動設(shè)臵，隨著菌體的大量繁殖，溶氧濃度迅速下降，當溶氧低于 20%時，手動調(diào)節(jié)空氣流量直至最大， 18L/min。采用優(yōu)化后的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件，發(fā)酵 18h， 菌體密度 A600達到 12． 8，茵體干重為 4． 7 g(DCW)／ L，酶活力達到 210 U／ mL發(fā)酵液，分別為初始條件下的 3． 1和 14． 9倍 。 大腸桿菌生長曲線測定 ? 一定量的微生物，接種在適合的新鮮液體培養(yǎng)基中，在適宜的溫度下培養(yǎng)，以菌數(shù)的對數(shù)作縱坐標，生長時間作橫坐標，做出的曲線叫生長曲線。為降低培養(yǎng)基中代謝副產(chǎn)物的積累，可采用流加補料的措施，或保持適當?shù)谋壬L速率，或在培養(yǎng)基中添加某些氨基酸。 ? 葡萄糖是高密度發(fā)酵中常用的碳源，但濃度過高，會產(chǎn)生乙酸，因此要保證較低的葡萄糖濃度。 連續(xù)發(fā)酵可分為單罐連續(xù)發(fā)酵和多罐串聯(lián)連續(xù)發(fā)酵等方式。甚至普通的清潔劑都可以輕易地殺滅這類菌株。這些菌株由于失去的細胞壁的重要組分，所以在自然條件下已無法生長。 連續(xù)發(fā)酵 ? 連續(xù)發(fā)酵 是指以一定的速度向發(fā)酵罐內(nèi)添加新鮮培養(yǎng)基，同時以相同速度流出培養(yǎng)液，從而使發(fā)酵罐內(nèi)的液量維持恒定的發(fā)酵過程。 影響大腸桿菌高密度發(fā)酵的因素 ? 培養(yǎng)基 ? 溶氧濃度 ? PH ? 溫度 ? 代謝副產(chǎn)物 ? 培養(yǎng)基 ? 高密度發(fā)酵對基質(zhì)中營養(yǎng)源的種類和含量比要求較高，如碳源和氮源的比例偏小，會導致菌體生長旺盛，造成菌體提前衰老自溶；比例偏大，則菌體繁殖數(shù)量少，細胞代謝不平衡，不利于產(chǎn)物積累。 ? 代謝副產(chǎn)物 ? 乙酸 二氧化碳 ? 葡萄糖的濃度超過某一閾值，會產(chǎn)生乙酸，或者比生長速率過高，供氧不足，也會產(chǎn)生乙酸。若樣品中含有多種氨基酸（如蛋白質(zhì)水解液），則不能由此法算出氨基酸的含量。 ? 查閱相關(guān)資料確定最佳培養(yǎng)基組成為 成分 葡萄糖 酵母膏 蛋白胨 (魚粉 ) (NH4)2S04 K2HP043H2O
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