《發(fā)酵工程課程設計》ppt課件(文件)
【正文】 而不能直接用堿滴定氨基酸的羧基。 大腸桿菌生長曲線測定 ? 一定量的微生物，接種在適合的新鮮液體培養(yǎng)基中，在適宜的溫度下培養(yǎng)，以菌數的對數作縱坐標，生長時間作橫坐標，做出的曲線叫生長曲線。 ? 測定微生物生長曲線的方法很多，有血球計數法、平板菌落計數法、稱重法、比濁法等。采用優(yōu)化后的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件，發(fā)酵 18h， 菌體密度 A600達到 12． 8，茵體干重為 4． 7 g(DCW)／ L，酶活力達到 210 U／ mL發(fā)酵液，分別為初始條件下的 3． 1和 14． 9倍 。同時用 25 %氨水自動調節(jié) p H 維持在 。由于本實驗缺少調節(jié)空氣流量的電子閥裝臵，對空氣流量只能采取手動設臵，隨著菌體的大量繁殖，溶氧濃度迅速下降，當溶氧低于 20%時，手動調節(jié)空氣流量直至最大， 18L/min。通過 PB實驗還可以看出各因素的作用效果，即是增加還是減少濃度會使響應值向最優(yōu)移動。為了盡快逼近最優(yōu)值，增加步長通常取最大 響應面分析 ? 常用的有中心復合法和 BB法（ BoxBehnken）。 發(fā)酵注意事項 發(fā)酵染菌的問題實在是個令人頭疼的問題，在這僅僅介紹一點簡單的方滕來判斷染菌： ?通過理化參數進行判斷，一般僅用于無菌培養(yǎng)檢查。 ⑤ .通過劃平板。 ?無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放臵，其它實驗用品用完即應移出，以利于空氣流通。盡量不要將瓶蓋蓋口朝上放臵桌面。實驗操作應在臺面之中央無菌區(qū)域，勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。 ?如果是大腸桿菌保種，甘油終濃度為15%. ? 實驗進行前，無菌室及無菌操作臺以紫外燈照射 3060 分鐘滅菌，以 70 %酒精擦拭無菌操作臺面，并開啟無菌操作臺風扇運轉 10分鐘后，才開始實驗操作。 ?.無菌培養(yǎng)時也可通過滿溫的突然消漲，罐壓的突然升高等現象來判斷。通過這步分析可以的回歸方程，進而得到最優(yōu)培養(yǎng)基。但是你要是不能確定或不相信這些取值那你就要進行最陡爬坡實驗。 最優(yōu)解 響應面分析 在眾多實驗因素中找出主要因素 ? 應用正交試驗（因素比較少）和 PB（ PlackettBurman）實驗。 ?隨著菌體的大量繁殖 ， 溶氧濃度迅速下降 ， 當溶氧低于 20%時 ， 手動調節(jié)空氣流量直至最大 ， 18L/min 反饋控制補料 ? 基于溶解氧恒定的反饋控制策略：當發(fā)酵液中底物幾乎耗盡時，氧消耗速率會下降，溶解氧會突然升高，因此，溶解氧的突然變化可以成為底物補料開始的標志 。 C保藏 保藏培養(yǎng)基 ? 固體培養(yǎng)基 一級平板 二級平板 ?液體培養(yǎng)基
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