高二生物dna和蛋白質(zhì)技術(shù)(存儲版)
【正文】 l/L的磷酸緩沖液中(pH為 )，透析 12小時。 【 例 2】 關(guān)于 DNA的復(fù)制，下列敘述正確的是 ( ) A. DNA 聚合酶不能從頭開始合成 DNA，只能從引物的 5′端延伸 DNA 鏈 B. DNA 復(fù)制不需要引物 C. 引物與 DNA 母鏈通過堿基互補配對進行結(jié)合 D. DNA 的合成方向總是從子鏈的 3′端向 5′端延伸 【 解析 】 由于 DNA 聚合酶只能從引物的 3′端延伸 DNA 鏈；由于 DNA 分子是反向平行的，子鏈?zhǔn)且罁?jù)堿基互補配對原則，在 DNA 聚合酶作用下合成的，其合成方向是從子鏈 5′端向 3′端延伸。 3. 擴增方向： DNA的合成方向總是從子鏈的 5′端向 3′端延伸。 4. 用高鹽濃度的溶液溶解 DNA，能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì)；用低鹽濃度的溶解使 DNA析出，能除去不能溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。 三、血紅蛋白的提取和分離實驗 1. 樣品處理：紅細(xì)胞洗滌 →________釋放 →分離血紅蛋白溶液 ↓ 2. 粗分離：用 ______法除去血紅蛋白溶液中相對分子質(zhì)量______的雜質(zhì) ↓ 3. 純化：用 ________法分離相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì) 【自我校對】一 、 1. 溶解度 耐受性 2. ? 1 ? 較高 ? 2 ? 紗布 ? 3 ? N a Cl? 4 ? 酒精 95 ? 5 ? 二苯胺試劑 藍(lán)色二 、 1. 冷卻 2. ? 1 ? 90 ? 2 ? 50 引物 ? 3 ? 72 DNA 聚合三 、 1. 血紅蛋白 2. 透析 較小 3. 凝膠色譜 DNA的粗提取與鑒定 一、 DNA與蛋白質(zhì)理化性質(zhì)的區(qū)別 DNA 蛋白質(zhì) 蛋白酶 沒影響 水解 高溫 80℃ 以上才會變 性 60～ 80℃ 會變性 洗滌劑 沒影響 瓦解細(xì)胞膜 (破壞膜中的蛋白質(zhì)分 子 ) 二、實驗設(shè)計流程 制備雞血細(xì)胞液 (加檸檬酸鈉，靜置或離心 ) ↓ 破碎細(xì)胞，釋放 DNA(加蒸餾水，沿同一方向快速攪拌 ) ↓→過濾，除去細(xì)胞壁、細(xì)胞膜等 溶解核內(nèi) DNA(加入 NaCl至 2 mol/L，同一方向緩慢攪拌 ) ↓ DNA析出 (加蒸餾水至 NaCl濃度為 mol/L，過濾，再溶解到 2 mol/L的 NaCl溶液中 ) ↓→除去細(xì)胞質(zhì)中的大部分物質(zhì) DNA初步純化 (與等體積 95%冷卻酒精混合，析出白色絲狀物 ) ↓→除去核蛋白、 RNA、多糖等 DNA鑒定 (二苯胺，沸水浴，呈現(xiàn)藍(lán)色 )
醫(yī)療健康相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1