牛奶中酪蛋白的分離與鑒定(存儲版)
【正文】 標(biāo)準(zhǔn)蛋白液：牛血清白蛋白（ ） 染液：考馬斯亮藍(lán) G250（ %） 樣品液：酪蛋白溶液 ? 器材 漩渦混合器 試管 吸管 容量瓶 量筒 電子分析天平 比色皿 722型分光光度計 四 、 操作方法 取 14支試管 ， 分兩組按下表平行操作 。 六 722型分光光度計使用方法 1．調(diào)整 （ 1） 將靈敏度旋鈕調(diào)至“ 1”檔（放大倍率最?。?。 （２） 濃度 c的測量。 （ 3） 儀器左側(cè)下角有一只干燥劑筒，應(yīng)保持其干燥，發(fā)現(xiàn)干燥劑變色應(yīng)立即更新或烘干后再用。 3．測定 （１） 吸光度Ａ的測量。 測定完后可用乙醇將藍(lán)色的比色杯洗干凈 ?？捡R斯亮藍(lán) G250的磷酸溶液呈棕紅色，最大吸收峰在 465nm。 ? 去脂 將粗制品中加入 10ml無水乙醇，攪拌片刻，將全部懸濁液轉(zhuǎn)移至布氏漏斗中，用乙醚 乙醇混合液洗滌沉淀兩次，最后用乙醚洗沉淀 2次，抽干。它還含有胱氨酸和蛋氨酸這兩種含硫氨基酸，但不含半胱氨酸。 ? 方法二 脂肪 (％ )＝ (m3m7) / m4 100 m3—— 未抽提濾紙包的質(zhì)量， g； m7—— 抽提后濾紙包的質(zhì)量， g； m4—— 樣品的質(zhì)量 (如為測定水分 后的 樣品質(zhì)量計 )， g。 用此法提取的脂溶性物質(zhì)除脂肪外 ，還含有游離脂肪酸 、 磷酸 、 固醇 、 芳香油及某些色素等 ， 故稱為 “ 粗脂肪 ” 。準(zhǔn)確稱取一定量牛奶m2，滴于濾紙上， 70 ℃ 烘干后稱重，記為m3。面包水分隨品種不同略有差異，一般為 3242% ? 水分測定法通?？煞譃?直接法 和 間接法 兩類 。例如，鮮果為 %%，鮮菜為 %%，鮮瘦肉 %，面粉1214%。 二 材料與儀器 ?材料 全脂牛奶 層析濾紙 ?器材 常壓電熱烘箱 干燥器 電子分析天平 三 操作步驟 ?取一張 12cm*12cm 70℃ 過夜烘干的層析濾紙，稱重，記為 m1。C的石油醚 。 六 結(jié)果處理 ? 方法一 脂肪 (％ )＝ (m6m5) / m4 100 m6—— 接受瓶和脂肪的質(zhì)量， g； m5—— 接受瓶的質(zhì)量， g； m4—— 樣品的質(zhì)量 (如為測定水分 后的 樣品質(zhì)量計 )， g。 八 、 思考題 (1) 本實驗制備得到的是粗脂肪 , 若要制備單一組分的脂類成分 , 可用什么方法進(jìn)一步處理 ？ (2) 本實驗樣品制備時烘干為什么要避免過熱 （ 3）酪蛋白的提取
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