【正文】 .....................41．2 對照品溶液的制備 ............................................................................................51．3 標準曲線的繪制 .................................................................................................51．4 超臨界二氧化碳流體萃取工藝流程 ......................................................51．5 萃取物中虎杖苷含量的測定 ......................................................................51．6 單因素試驗 ...........................................................................................................61．7 最佳萃取工藝條件實驗設(shè)計 .......................................................................62 結(jié)果與分析 ............................................................................................................................72．1 虎杖苷對照品標準曲線的繪制 ..................................................................72．2 單因素試驗結(jié)果 .................................................................................................82．3 正交試驗結(jié)果直觀分析 .................................................................................83 結(jié)論 ........................................................................................................................................15參考文獻 ...................................................................................................................................16致 謝 ......................................................................................................................................182HLPC 測 定 虎 杖 莖 中 虎 杖 苷 含 量 的 研 究邵陽學(xué)院 生物與化學(xué)工程系 08 級生物工程 422022 敖普章指導(dǎo)老師 蔣盛巖摘 要目的:研究超臨界CO 2萃取壓力、溫度、時間和攜帶劑甲醇的添加量對虎杖莖中虎杖苷提取的影響，探討虎杖莖中虎杖苷的最佳提取參數(shù)。 虎杖苷對心肌細胞的作用,金春華等 [ 3]報道,通過 PD 對大鼠心肌細胞的研究表明, 其強心作用可能是通過增加單個細胞中的游離鈣離子濃度而直接增強心肌收縮性；PD 的這種效應(yīng), 使其在理論上具有比洋地黃類強心苷更優(yōu)越的強心功能, 它不但使心肌收縮更有力, 而且使心肌舒張更徹底, 從而大大的提高心肌工作效率。 虎杖苷用于防治腦缺血，采用改良的線栓法制作大鼠大腦中動脈栓塞模型( MCAO)研究白藜蘆醇苷對大鼠局灶性腦缺血的保護機制, 結(jié)果發(fā)現(xiàn) PD 能減輕脂質(zhì)過氧化反應(yīng), 降低缺血腦組中丙二醛( MDA)含量、提高體內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化(GSHPX)及過氧化氫酶( CAT)活性, 抑制或減輕腦水腫形成, 保護細胞膜功能, 減輕缺血神經(jīng)元功能損害, 對局灶性腦缺血損傷具有明顯的保護作用, 這表明 PD 對大鼠局灶性腦缺血有明顯的保護作用,其機制可2能是通過有效的拮抗自由基損傷, 提高腦組織抗氧化能力來實現(xiàn)的 [ 6]。 虎杖苷具有收縮心肌細胞作用，用內(nèi)毒素(LPS)刺激心肌細胞使細胞搏動減弱, 收縮頻率變小, 甚至停跳, 表明 LPS 可在細胞水平直接引起心肌細胞的收縮力減弱。如此，則對外邪與痰、熱、瘀,皆可綰照，一藥而兼數(shù)長，皆深合肺炎病理者也。應(yīng)用虎杖外洗內(nèi)服，能減輕斷端疼痛,改善局部血液循環(huán)。 曹文等 [26]應(yīng)用復(fù)方虎杖清熱膠囊治療風(fēng)熱型急性上呼吸道感染30例，并與用感冒退熱沖劑治療的20例作對照觀察，臨床研究表明，復(fù)方虎杖清熱膠囊治療急性上呼吸道感染風(fēng)熱證療效好，對主癥起效快，并有明顯的改善白細胞異常及降低體溫的作用，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。本論文的研究目的：研究超臨界CO 2萃取壓力、溫度、時間和攜帶劑甲醇的添加量對虎杖莖中虎杖苷提取的影響，高效液相色譜、紫外分光光度法檢測虎杖苷的含量，并以虎杖苷的提取率為參考指標，通過正交實驗方法對超臨界萃取法萃取取虎杖莖中虎杖苷的最佳提取參數(shù)進行探討。1．6 單因素試驗1．6．1 攜帶劑甲醇的添加量對虎杖苷提取率的影響稱取虎杖莖粉100g，在萃取溫度25℃，萃取壓力10Mpa，萃取時間20min條件下，分別加入攜帶劑甲醇用量50mL、75mL、100mL，進行超臨界二氧化碳流體萃取，提取液用HPLC進行測定。2．2．3 萃取時間對虎杖苷提取率的影響實驗結(jié)果表明，萃取時間對萃取率有影響，萃取率隨萃取時間的延長而增大。根據(jù)表中 R 值的大小，排列出試驗因素的主次順序： 主　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　次 D(萃取劑) C(萃取時間) B(萃取溫度) A(萃取壓力)10，D因素Kn值中，K 1最大，說明其最優(yōu)水平為1[萃取劑醇的添加量是50mL]，同理C因素最優(yōu)水平為3[萃取時間是60min]，B因素最優(yōu)水平為2[ 萃取溫度是30℃] ， A因素最優(yōu)水平為2[壓力為 12Mpa]，從正交實驗結(jié)果可以得出：最佳組合為D 1C3 B2A2，即萃取劑甲醇的添加量為50mL，萃取時間是60min,萃取溫度30℃，萃取壓力是12Mpa。39。39。39。39。39。39。39。39。 0739。39。39。39。39。39。 39。39。39。39。39。39。039。439。感謝您在此期間大力鼓舞和幫助，特別是蔣老師嚴謹?shù)膶W(xué)術(shù)態(tài)度給了我很大的啟示，能夠在蔣老師您的門下學(xué)習(xí)是鄙人最大的榮幸。最佳條件為: 萃取劑甲醇的添加量50mL，萃取時間是60min，萃取溫度30℃，萃取壓力是12Mpa。139。839。39。39。39。39。39。39。39。39。39。39。39。39。39。39。39。39。39。0246810