【正文】 .....................41．2 對(duì)照品溶液的制備 ............................................................................................51．3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 .................................................................................................51．4 超臨界二氧化碳流體萃取工藝流程 ......................................................51．5 萃取物中虎杖苷含量的測(cè)定 ......................................................................51．6 單因素試驗(yàn) ...........................................................................................................61．7 最佳萃取工藝條件實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) .......................................................................62 結(jié)果與分析 ............................................................................................................................72．1 虎杖苷對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 ..................................................................72．2 單因素試驗(yàn)結(jié)果 .................................................................................................82．3 正交試驗(yàn)結(jié)果直觀分析 .................................................................................83 結(jié)論 ........................................................................................................................................15參考文獻(xiàn) ...................................................................................................................................16致 謝 ......................................................................................................................................182HLPC 測(cè) 定 虎 杖 莖 中 虎 杖 苷 含 量 的 研 究邵陽學(xué)院 生物與化學(xué)工程系 08 級(jí)生物工程 422022 敖普章指導(dǎo)老師 蔣盛巖摘 要目的:研究超臨界CO 2萃取壓力、溫度、時(shí)間和攜帶劑甲醇的添加量對(duì)虎杖莖中虎杖苷提取的影響，探討虎杖莖中虎杖苷的最佳提取參數(shù)。 虎杖苷對(duì)心肌細(xì)胞的作用,金春華等 [ 3]報(bào)道,通過 PD 對(duì)大鼠心肌細(xì)胞的研究表明, 其強(qiáng)心作用可能是通過增加單個(gè)細(xì)胞中的游離鈣離子濃度而直接增強(qiáng)心肌收縮性；PD 的這種效應(yīng), 使其在理論上具有比洋地黃類強(qiáng)心苷更優(yōu)越的強(qiáng)心功能, 它不但使心肌收縮更有力, 而且使心肌舒張更徹底, 從而大大的提高心肌工作效率。 虎杖苷用于防治腦缺血，采用改良的線栓法制作大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞模型( MCAO)研究白藜蘆醇苷對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)機(jī)制, 結(jié)果發(fā)現(xiàn) PD 能減輕脂質(zhì)過氧化反應(yīng), 降低缺血腦組中丙二醛( MDA)含量、提高體內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化(GSHPX)及過氧化氫酶( CAT)活性, 抑制或減輕腦水腫形成, 保護(hù)細(xì)胞膜功能, 減輕缺血神經(jīng)元功能損害, 對(duì)局灶性腦缺血損傷具有明顯的保護(hù)作用, 這表明 PD 對(duì)大鼠局灶性腦缺血有明顯的保護(hù)作用,其機(jī)制可2能是通過有效的拮抗自由基損傷, 提高腦組織抗氧化能力來實(shí)現(xiàn)的 [ 6]。 虎杖苷具有收縮心肌細(xì)胞作用，用內(nèi)毒素(LPS)刺激心肌細(xì)胞使細(xì)胞搏動(dòng)減弱, 收縮頻率變小, 甚至停跳, 表明 LPS 可在細(xì)胞水平直接引起心肌細(xì)胞的收縮力減弱。如此，則對(duì)外邪與痰、熱、瘀,皆可綰照，一藥而兼數(shù)長，皆深合肺炎病理者也。應(yīng)用虎杖外洗內(nèi)服，能減輕斷端疼痛,改善局部血液循環(huán)。 曹文等 [26]應(yīng)用復(fù)方虎杖清熱膠囊治療風(fēng)熱型急性上呼吸道感染30例，并與用感冒退熱沖劑治療的20例作對(duì)照觀察，臨床研究表明，復(fù)方虎杖清熱膠囊治療急性上呼吸道感染風(fēng)熱證療效好，對(duì)主癥起效快，并有明顯的改善白細(xì)胞異常及降低體溫的作用，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本論文的研究目的：研究超臨界CO 2萃取壓力、溫度、時(shí)間和攜帶劑甲醇的添加量對(duì)虎杖莖中虎杖苷提取的影響，高效液相色譜、紫外分光光度法檢測(cè)虎杖苷的含量，并以虎杖苷的提取率為參考指標(biāo)，通過正交實(shí)驗(yàn)方法對(duì)超臨界萃取法萃取取虎杖莖中虎杖苷的最佳提取參數(shù)進(jìn)行探討。1．6 單因素試驗(yàn)1．6．1 攜帶劑甲醇的添加量對(duì)虎杖苷提取率的影響稱取虎杖莖粉100g，在萃取溫度25℃，萃取壓力10Mpa，萃取時(shí)間20min條件下，分別加入攜帶劑甲醇用量50mL、75mL、100mL，進(jìn)行超臨界二氧化碳流體萃取，提取液用HPLC進(jìn)行測(cè)定。2．2．3 萃取時(shí)間對(duì)虎杖苷提取率的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，萃取時(shí)間對(duì)萃取率有影響，萃取率隨萃取時(shí)間的延長而增大。根據(jù)表中 R 值的大小，排列出試驗(yàn)因素的主次順序： 主　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　次 D(萃取劑) C(萃取時(shí)間) B(萃取溫度) A(萃取壓力)10，D因素Kn值中，K 1最大，說明其最優(yōu)水平為1[萃取劑醇的添加量是50mL]，同理C因素最優(yōu)水平為3[萃取時(shí)間是60min]，B因素最優(yōu)水平為2[ 萃取溫度是30℃] ， A因素最優(yōu)水平為2[壓力為 12Mpa]，從正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以得出：最佳組合為D 1C3 B2A2，即萃取劑甲醇的添加量為50mL，萃取時(shí)間是60min,萃取溫度30℃，萃取壓力是12Mpa。39。39。39。39。39。39。39。39。 0739。39。39。39。39。39。 39。39。39。39。39。39。039。439。感謝您在此期間大力鼓舞和幫助，特別是蔣老師嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶W(xué)術(shù)態(tài)度給了我很大的啟示，能夠在蔣老師您的門下學(xué)習(xí)是鄙人最大的榮幸。最佳條件為: 萃取劑甲醇的添加量50mL，萃取時(shí)間是60min，萃取溫度30℃，萃取壓力是12Mpa。139。839。39。39。39。39。39。39。39。39。39。39。39。39。39。39。39。39。39。0246810