【正文】 四、測(cè)定過(guò)程的自動(dòng)監(jiān)測(cè)各種自動(dòng)生化分析儀或多或少都具有對(duì)測(cè)定過(guò)程進(jìn)行各種監(jiān)測(cè)的功能，以便在沒(méi)有人監(jiān)督化學(xué)反應(yīng)的情況下提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。這種變化會(huì)影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，一般使結(jié)果偏高。一些分析儀在所選終點(diǎn)后再選一個(gè)測(cè)光點(diǎn)，比較這兩點(diǎn)吸光度的差異來(lái)判斷反應(yīng)是否到達(dá)終點(diǎn)。以臨床化學(xué)檢驗(yàn)的比色測(cè)定為例，常作三個(gè)檢測(cè)：空白、標(biāo)準(zhǔn)、測(cè)定。稱(chēng)取一定量的純品，然后將其溶解，在容量瓶?jī)?nèi)用溶劑稀釋至容積刻度，混勻，標(biāo)準(zhǔn)液配制完成。 為了克服基體效應(yīng)，推薦使用校準(zhǔn)品。須明確的，所有用于檢驗(yàn)中的檢測(cè)方法、儀器、試劑等都是用來(lái)檢測(cè)病人新鮮標(biāo)本的，不是用來(lái)檢測(cè)校準(zhǔn)品這樣的處理過(guò)樣品。實(shí)踐說(shuō)明，只有不斷地調(diào)整校準(zhǔn)值，直至用該校準(zhǔn)值校準(zhǔn)指定的檢測(cè)系列（加上具有校準(zhǔn)值的校準(zhǔn)品，即組合成檢測(cè)系統(tǒng)）后，檢測(cè)系統(tǒng)再檢測(cè)病人標(biāo)本，得到的測(cè)定值和病人標(biāo)本的參考方法測(cè)定值具有滿意的可比性（測(cè)定值和參考值間的偏倚≤2%）。2）制備一大批侯選校準(zhǔn)品。經(jīng)反復(fù)檢測(cè)和調(diào)整、統(tǒng)計(jì)，最終實(shí)現(xiàn)校準(zhǔn)目標(biāo)時(shí)的校準(zhǔn)值，為該校準(zhǔn)品的定值。此時(shí)這批校準(zhǔn)品可供市售。而這類(lèi)試劑廠商專(zhuān)門(mén)針對(duì)客戶(hù)不同檢測(cè)系統(tǒng)，在替用他們的試劑時(shí)強(qiáng)調(diào)了替換后必須用他們的校準(zhǔn)品，而且必須按校準(zhǔn)品說(shuō)明書(shū)上原系統(tǒng)名稱(chēng)下指定的校準(zhǔn)值校準(zhǔn)新系統(tǒng)，可使新系統(tǒng)對(duì)病人樣品的檢測(cè)結(jié)果和原系統(tǒng)結(jié)果具可比性。 一、傳統(tǒng)的方法的缺點(diǎn) 　　傳統(tǒng)的檢驗(yàn)項(xiàng)目，要使得檢驗(yàn)結(jié)果可靠或者有依據(jù)，往往會(huì)使用一個(gè)已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品同樣品一同測(cè)定。將符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的純品使用稱(chēng)量法和容量法配制成溶液。 ： 　　校準(zhǔn)品中被檢分析物的含量無(wú)法由稱(chēng)量法和容量法確定，只能依賴(lài)于分析方法。也即用新鮮病人樣品是校準(zhǔn)系統(tǒng)的最佳校準(zhǔn)品。此時(shí)如果將該質(zhì)控品應(yīng)用于另一個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)，由于方法學(xué)的不同，可能得出同廠商給出值有較大差異的值。若仍不能排除纖維蛋白可能堵塞吸樣針，停機(jī)并用專(zhuān)用軟鋼絲疏通吸樣針。處理：加足量1D1和1D2清洗液和HIALKLID堿液。在維護(hù)畫(huà)面上按Wash做清洗并做杯空白檢測(cè)。 反應(yīng)槽水不干凈：由于長(zhǎng)期使用細(xì)菌滋生，使反應(yīng)槽水不干凈。在取下清洗機(jī)構(gòu)1和清洗機(jī)構(gòu)2時(shí)要非常注意不要碰到旁邊的小白塊，以免小白塊移位后劃傷和磨損反應(yīng)杯。1 故障一、SAMPLE（樣品不足）當(dāng)未放標(biāo)本（或標(biāo)本不足），標(biāo)本中混有纖維蛋白或混有氣泡時(shí)，儀器會(huì)出現(xiàn)SAMPLE報(bào)警。 二、質(zhì)控品定值 1. 質(zhì)控品的來(lái)源：　　質(zhì)控品的來(lái)源同校準(zhǔn)品大致相同，廠商可能會(huì)更具自己的要求添加了很多物質(zhì)，此時(shí)有些物質(zhì)的添加量常常達(dá)到病理狀態(tài)的高濃度，在應(yīng)用于某一項(xiàng)目時(shí)，對(duì)這個(gè)項(xiàng)目來(lái)說(shuō)基質(zhì)效應(yīng)將更大。 　　如先使用公認(rèn)的參考方法檢測(cè)病人樣品，再以具有參考值的病人樣品去校準(zhǔn)某檢測(cè)系統(tǒng)。 四、校準(zhǔn)品的定值 ：　　校準(zhǔn)品大多來(lái)源為人樣品的混合物，如混合血清。 　　是否能使用標(biāo)準(zhǔn)液取決于檢測(cè)方法學(xué)，干擾極小的決定性方法或者某些已知干擾的參考方法可直接使用標(biāo)準(zhǔn)品。臨床上常常有很多錯(cuò)誤的應(yīng)用，例如將不同廠商的校準(zhǔn)品應(yīng)用于檢測(cè)系統(tǒng)；使用給定值的質(zhì)控品評(píng)價(jià)檢測(cè)系統(tǒng)；使用質(zhì)控品來(lái)校準(zhǔn)檢測(cè)系統(tǒng)等等。說(shuō)明書(shū)告訴客戶(hù)，使用他們的校準(zhǔn)品，按公司指定校準(zhǔn)您原系統(tǒng)的校準(zhǔn)值去校準(zhǔn)系統(tǒng)，可以使新組合的檢測(cè)系統(tǒng)（原儀器、方法、檢測(cè)程序，新試劑和新校準(zhǔn)品）的病人標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果和原配套檢測(cè)系統(tǒng)的病人標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果具可比性。若能實(shí)現(xiàn)校準(zhǔn)目標(biāo)，校準(zhǔn)確認(rèn)，則新校準(zhǔn)品的定值為它的校準(zhǔn)值。由于侯選校準(zhǔn)品和病人樣品間的基體差異，以它的參考實(shí)驗(yàn)室定值對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)校準(zhǔn)后，檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)病人樣品的檢測(cè)結(jié)果必然和這些血清已有的參考值有偏倚。由參考實(shí)驗(yàn)室用公認(rèn)的參考方法和標(biāo)準(zhǔn)品或參考品，對(duì)這些血清檢測(cè)定值。以初始校準(zhǔn)值反過(guò)來(lái)再校準(zhǔn)組合的檢測(cè)系列后，該檢測(cè)系列又去檢測(cè)病人的新鮮標(biāo)本。若使用公認(rèn)的參考方法去標(biāo)化測(cè)定校準(zhǔn)品，測(cè)定程序是嚴(yán)密的，測(cè)定值是可靠的。檢定不合格即報(bào)廢，決不可將實(shí)測(cè)值替代修正。一、標(biāo)準(zhǔn)液的定值一般而言，檢驗(yàn)工作使用的標(biāo)準(zhǔn)品屬應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)。見(jiàn)圖796．方法線性范圍監(jiān)測(cè) 每種待測(cè)物分析都有一個(gè)可測(cè)定的濃度或活性范圍，樣品結(jié)果若超過(guò)此范圍，分析儀將顯示測(cè)定結(jié)果超過(guò)線性范圍的提示，多數(shù)分析儀會(huì)自動(dòng)將樣品減量或增量重新測(cè)定。然后在結(jié)果計(jì)算時(shí)自動(dòng)減去這部分干擾，這將有利于提高分析結(jié)果的可靠性。②每個(gè)樣品測(cè)定前均檢測(cè)試劑空白吸光度，適用于先加試劑后取樣品的分析儀。如血清ALT測(cè)定，血清中的內(nèi)源性丙酮酸及其它酮酸也可與試劑中的指示酶（乳酸脫氫酶）起反應(yīng)，使結(jié)果偏高。 （三）次波長(zhǎng)的確定方法當(dāng)被測(cè)物的主波長(zhǎng)確定之后，再選擇次波長(zhǎng)。在吸光度檢測(cè)中，使用一個(gè)主波長(zhǎng)和一個(gè)次波長(zhǎng)的稱(chēng)雙波長(zhǎng)方式。因此對(duì)這類(lèi)檢測(cè)項(xiàng)目最大試劑量非常重要。5．試劑空白速率 連續(xù)監(jiān)測(cè)法中使用，是試劑本身在監(jiān)測(cè)過(guò)程中沒(méi)有化學(xué)反應(yīng)時(shí)的變化速率。17．小數(shù)點(diǎn)位數(shù) 檢測(cè)結(jié)果的小數(shù)點(diǎn)位數(shù)（decimal point digit）。11．孵育時(shí)間 孵育時(shí)間（incubate time）在終點(diǎn)法是樣品與試劑混勻開(kāi)始至反應(yīng)終點(diǎn)為止的時(shí)間，在兩點(diǎn)法是第一個(gè)吸光度選擇點(diǎn)開(kāi)始至第二個(gè)吸光度選擇點(diǎn)為止的時(shí)間。5．次波長(zhǎng) 次波長(zhǎng)（secondary wavelength）是在使用雙波長(zhǎng)時(shí)，要指定一個(gè)與主波長(zhǎng)、干擾物質(zhì)光吸收有關(guān)的波長(zhǎng)。各種測(cè)定項(xiàng)目的分析參數(shù)（analysis　paramete）大部分也已設(shè)計(jì)好，存于磁盤(pán)中，供用戶(hù)使用；目前大多數(shù)生化分析儀為開(kāi)放式，用戶(hù)可以更改這些參數(shù)。4．透射比濁法　透射比濁法可用于測(cè)定產(chǎn)生濁度反應(yīng)的項(xiàng)目，多數(shù)屬免疫比濁法，載脂蛋白、免疫球蛋白、補(bǔ)體、抗O、類(lèi)風(fēng)濕因子，以及血清中的其他蛋白質(zhì)如前白蛋白、結(jié)合珠蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等均可用此法。該法須做多點(diǎn)校準(zhǔn)，再經(jīng)非線性回歸，求出抗原或抗體的含量。② 4NP標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液(，)。葡萄糖有標(biāo)準(zhǔn)純制品，又有國(guó)家批準(zhǔn)文號(hào)的葡葡糖標(biāo)準(zhǔn)液。C ，甚至僅35176。連續(xù)監(jiān)測(cè)法的優(yōu)點(diǎn)即是可以確定線性期并計(jì)算ΔA/min，根據(jù)此值再準(zhǔn)確地計(jì)算酶活性，因而使自動(dòng)生化分析儀在酶活性測(cè)定方面顯著地優(yōu)于手工法。其計(jì)算公式與兩點(diǎn)終點(diǎn)法相同，為CU=(A2A1)K。計(jì)算公式為CU=（待測(cè)吸光度A2－待測(cè)吸光度A1）K。分析儀通常在反應(yīng)終點(diǎn)附近連續(xù)選擇兩個(gè)吸光度值，求出其平均值計(jì)算結(jié)果，并可根據(jù)兩點(diǎn)的吸光度差來(lái)判斷反應(yīng)是否到達(dá)反應(yīng)終點(diǎn)。 電子系統(tǒng)的正確使用和維護(hù) 自動(dòng)化分析儀的發(fā)展離不開(kāi)微機(jī)的應(yīng)用。Liasys即采用了新的激流式單向沖洗及多步驟沖洗，較之原來(lái)的涌流式?jīng)_洗更干凈、徹底。 　　3 保養(yǎng)　　 蒸餾水應(yīng)勤更換 最好3天更換1次，并且沖洗用蒸餾水不得有雜質(zhì)，防止桶內(nèi)生長(zhǎng)細(xì)菌。 　　2 環(huán)境因素　　 防塵 平時(shí)灰塵進(jìn)入儀器的電子系統(tǒng)、管道系統(tǒng)、散熱系統(tǒng)、光路系統(tǒng)而影響吸光度值，造成結(jié)果誤差。但應(yīng)注意的是，用5%次氯酸液浸泡時(shí)間不能太長(zhǎng)，一般10min后用自來(lái)水沖洗，再用蒸餾水沖洗即可。實(shí)際上有一些小故障完全可以通過(guò)正確使用和維護(hù)加以避免或自行排除。第一章使用全自動(dòng)生化分析儀的體會(huì)　　近二十年來(lái)，隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的飛速發(fā)展，各種全自動(dòng)分析儀的引進(jìn)和普及極大地?cái)U(kuò)展了檢驗(yàn)項(xiàng)目的數(shù)量，提高了檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，并因其高效、快速而逐漸成為醫(yī)院硬件建設(shè)的重點(diǎn)投入項(xiàng)目。 　　 常見(jiàn)故障　　 吸光度重復(fù)性差 這里指的吸光度是指空白吸光度，用蒸餾水做空白試驗(yàn)。 測(cè)試結(jié)果偏高或偏低 除造成空白吸光度重復(fù)性偏差的原因外，加樣注射器漏氣或其他塑料管道漏水。我們的做法是，門(mén)窗始終處于關(guān)閉狀態(tài)，儀器室工作人員進(jìn)入儀器室應(yīng)更換專(zhuān)用拖鞋，并且備有專(zhuān)用于儀器除塵的微型吸塵器。 試劑杯應(yīng)常清洗 試劑杯不能長(zhǎng)期使用而不清洗，更防止產(chǎn)生沉淀和生長(zhǎng)細(xì)菌，以免堵塞采樣針和污染試劑。因此，需要定期對(duì)后管道系統(tǒng)進(jìn)行疏通處理。其次，新儀器投入使用前，應(yīng)培訓(xùn)操作人員，掌握儀器性能特點(diǎn)，并正規(guī)操作。②根據(jù)被測(cè)物反應(yīng)終點(diǎn)，結(jié)合干擾物的反應(yīng)情況來(lái)確定，如在血清白蛋白的溴甲酚綠法測(cè)定中，白蛋白與溴甲酚綠在10s內(nèi)很快完成反應(yīng)，之后α球蛋白和β球蛋白與溴甲酚綠發(fā)生 慢反應(yīng)，使反應(yīng)曲線上吸光度在10s后仍繼續(xù)緩慢上升，持續(xù)約達(dá)10min，因此終點(diǎn)時(shí)間應(yīng)采用10～30s，而不應(yīng)選擇10min。但指示反應(yīng)初期吸光度無(wú)明顯變化的化學(xué)反應(yīng)較少，如單試劑方式測(cè)定總蛋白、白蛋白、鈣、磷、鎂等的終點(diǎn)法分析項(xiàng)目，及雙試劑方式測(cè)定葡萄糖、總膽固醇、甘油三酯等的終點(diǎn)法分析項(xiàng)目，因反應(yīng)初期吸光度已有明顯變化，因而均難以用上述方式設(shè)置兩點(diǎn)終點(diǎn)法。例如：苦味酸法測(cè)定肌酐，反應(yīng)的最初30s內(nèi)，血清中快反應(yīng)干擾物（如微生物、丙酮酸、乙酰乙酸等）能與堿性苦味酸反應(yīng)；在第二個(gè)30s時(shí)堿性苦味酸主要與肌酐反應(yīng)，且此段時(shí)間－吸光度曲線的線性較好（故也可用連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定肌酐）；在80～120s及其以后，堿性苦味可與蛋白質(zhì)以及其它慢反應(yīng)干擾物反應(yīng)。關(guān)于理論K