【正文】 四、測定過程的自動監(jiān)測各種自動生化分析儀或多或少都具有對測定過程進行各種監(jiān)測的功能，以便在沒有人監(jiān)督化學反應的情況下提高檢測的準確性。這種變化會影響測定結果的準確性，一般使結果偏高。一些分析儀在所選終點后再選一個測光點，比較這兩點吸光度的差異來判斷反應是否到達終點。以臨床化學檢驗的比色測定為例，常作三個檢測：空白、標準、測定。稱取一定量的純品，然后將其溶解，在容量瓶內(nèi)用溶劑稀釋至容積刻度，混勻，標準液配制完成。 為了克服基體效應，推薦使用校準品。須明確的，所有用于檢驗中的檢測方法、儀器、試劑等都是用來檢測病人新鮮標本的，不是用來檢測校準品這樣的處理過樣品。實踐說明，只有不斷地調(diào)整校準值，直至用該校準值校準指定的檢測系列（加上具有校準值的校準品，即組合成檢測系統(tǒng)）后，檢測系統(tǒng)再檢測病人標本，得到的測定值和病人標本的參考方法測定值具有滿意的可比性（測定值和參考值間的偏倚≤2%）。2）制備一大批侯選校準品。經(jīng)反復檢測和調(diào)整、統(tǒng)計，最終實現(xiàn)校準目標時的校準值，為該校準品的定值。此時這批校準品可供市售。而這類試劑廠商專門針對客戶不同檢測系統(tǒng)，在替用他們的試劑時強調(diào)了替換后必須用他們的校準品，而且必須按校準品說明書上原系統(tǒng)名稱下指定的校準值校準新系統(tǒng)，可使新系統(tǒng)對病人樣品的檢測結果和原系統(tǒng)結果具可比性。 一、傳統(tǒng)的方法的缺點 　　傳統(tǒng)的檢驗項目，要使得檢驗結果可靠或者有依據(jù)，往往會使用一個已知濃度的標準品同樣品一同測定。將符合質量標準的純品使用稱量法和容量法配制成溶液。 ： 　　校準品中被檢分析物的含量無法由稱量法和容量法確定，只能依賴于分析方法。也即用新鮮病人樣品是校準系統(tǒng)的最佳校準品。此時如果將該質控品應用于另一個檢測系統(tǒng)，由于方法學的不同，可能得出同廠商給出值有較大差異的值。若仍不能排除纖維蛋白可能堵塞吸樣針，停機并用專用軟鋼絲疏通吸樣針。處理：加足量1D1和1D2清洗液和HIALKLID堿液。在維護畫面上按Wash做清洗并做杯空白檢測。 反應槽水不干凈：由于長期使用細菌滋生，使反應槽水不干凈。在取下清洗機構1和清洗機構2時要非常注意不要碰到旁邊的小白塊，以免小白塊移位后劃傷和磨損反應杯。1 故障一、SAMPLE（樣品不足）當未放標本（或標本不足），標本中混有纖維蛋白或混有氣泡時，儀器會出現(xiàn)SAMPLE報警。 二、質控品定值 1. 質控品的來源：　　質控品的來源同校準品大致相同，廠商可能會更具自己的要求添加了很多物質，此時有些物質的添加量常常達到病理狀態(tài)的高濃度，在應用于某一項目時，對這個項目來說基質效應將更大。 　　如先使用公認的參考方法檢測病人樣品，再以具有參考值的病人樣品去校準某檢測系統(tǒng)。 四、校準品的定值 ：　　校準品大多來源為人樣品的混合物，如混合血清。 　　是否能使用標準液取決于檢測方法學，干擾極小的決定性方法或者某些已知干擾的參考方法可直接使用標準品。臨床上常常有很多錯誤的應用，例如將不同廠商的校準品應用于檢測系統(tǒng)；使用給定值的質控品評價檢測系統(tǒng)；使用質控品來校準檢測系統(tǒng)等等。說明書告訴客戶，使用他們的校準品，按公司指定校準您原系統(tǒng)的校準值去校準系統(tǒng)，可以使新組合的檢測系統(tǒng)（原儀器、方法、檢測程序，新試劑和新校準品）的病人標本檢測結果和原配套檢測系統(tǒng)的病人標本檢測結果具可比性。若能實現(xiàn)校準目標，校準確認，則新校準品的定值為它的校準值。由于侯選校準品和病人樣品間的基體差異，以它的參考實驗室定值對檢測系統(tǒng)校準后，檢測系統(tǒng)對病人樣品的檢測結果必然和這些血清已有的參考值有偏倚。由參考實驗室用公認的參考方法和標準品或參考品，對這些血清檢測定值。以初始校準值反過來再校準組合的檢測系列后，該檢測系列又去檢測病人的新鮮標本。若使用公認的參考方法去標化測定校準品，測定程序是嚴密的，測定值是可靠的。檢定不合格即報廢，決不可將實測值替代修正。一、標準液的定值一般而言，檢驗工作使用的標準品屬應用標準。見圖796．方法線性范圍監(jiān)測 每種待測物分析都有一個可測定的濃度或活性范圍，樣品結果若超過此范圍，分析儀將顯示測定結果超過線性范圍的提示，多數(shù)分析儀會自動將樣品減量或增量重新測定。然后在結果計算時自動減去這部分干擾，這將有利于提高分析結果的可靠性。②每個樣品測定前均檢測試劑空白吸光度，適用于先加試劑后取樣品的分析儀。如血清ALT測定，血清中的內(nèi)源性丙酮酸及其它酮酸也可與試劑中的指示酶（乳酸脫氫酶）起反應，使結果偏高。 （三）次波長的確定方法當被測物的主波長確定之后，再選擇次波長。在吸光度檢測中，使用一個主波長和一個次波長的稱雙波長方式。因此對這類檢測項目最大試劑量非常重要。5．試劑空白速率 連續(xù)監(jiān)測法中使用，是試劑本身在監(jiān)測過程中沒有化學反應時的變化速率。17．小數(shù)點位數(shù) 檢測結果的小數(shù)點位數(shù)（decimal point digit）。11．孵育時間 孵育時間（incubate time）在終點法是樣品與試劑混勻開始至反應終點為止的時間，在兩點法是第一個吸光度選擇點開始至第二個吸光度選擇點為止的時間。5．次波長 次波長（secondary wavelength）是在使用雙波長時，要指定一個與主波長、干擾物質光吸收有關的波長。各種測定項目的分析參數(shù)（analysis　paramete）大部分也已設計好，存于磁盤中，供用戶使用；目前大多數(shù)生化分析儀為開放式，用戶可以更改這些參數(shù)。4．透射比濁法　透射比濁法可用于測定產(chǎn)生濁度反應的項目，多數(shù)屬免疫比濁法，載脂蛋白、免疫球蛋白、補體、抗O、類風濕因子，以及血清中的其他蛋白質如前白蛋白、結合珠蛋白、轉鐵蛋白等均可用此法。該法須做多點校準，再經(jīng)非線性回歸，求出抗原或抗體的含量。② 4NP標準應用液(，)。葡萄糖有標準純制品，又有國家批準文號的葡葡糖標準液。C ，甚至僅35176。連續(xù)監(jiān)測法的優(yōu)點即是可以確定線性期并計算ΔA/min，根據(jù)此值再準確地計算酶活性，因而使自動生化分析儀在酶活性測定方面顯著地優(yōu)于手工法。其計算公式與兩點終點法相同，為CU=(A2A1)K。計算公式為CU=（待測吸光度A2－待測吸光度A1）K。分析儀通常在反應終點附近連續(xù)選擇兩個吸光度值，求出其平均值計算結果，并可根據(jù)兩點的吸光度差來判斷反應是否到達反應終點。 電子系統(tǒng)的正確使用和維護 自動化分析儀的發(fā)展離不開微機的應用。Liasys即采用了新的激流式單向沖洗及多步驟沖洗，較之原來的涌流式?jīng)_洗更干凈、徹底。 　　3 保養(yǎng)　　 蒸餾水應勤更換 最好3天更換1次，并且沖洗用蒸餾水不得有雜質，防止桶內(nèi)生長細菌。 　　2 環(huán)境因素　　 防塵 平時灰塵進入儀器的電子系統(tǒng)、管道系統(tǒng)、散熱系統(tǒng)、光路系統(tǒng)而影響吸光度值，造成結果誤差。但應注意的是，用5%次氯酸液浸泡時間不能太長，一般10min后用自來水沖洗，再用蒸餾水沖洗即可。實際上有一些小故障完全可以通過正確使用和維護加以避免或自行排除。第一章使用全自動生化分析儀的體會　　近二十年來，隨著檢驗醫(yī)學的飛速發(fā)展，各種全自動分析儀的引進和普及極大地擴展了檢驗項目的數(shù)量，提高了檢驗結果的準確性，并因其高效、快速而逐漸成為醫(yī)院硬件建設的重點投入項目。 　　 常見故障　　 吸光度重復性差 這里指的吸光度是指空白吸光度，用蒸餾水做空白試驗。 測試結果偏高或偏低 除造成空白吸光度重復性偏差的原因外，加樣注射器漏氣或其他塑料管道漏水。我們的做法是，門窗始終處于關閉狀態(tài)，儀器室工作人員進入儀器室應更換專用拖鞋，并且備有專用于儀器除塵的微型吸塵器。 試劑杯應常清洗 試劑杯不能長期使用而不清洗，更防止產(chǎn)生沉淀和生長細菌，以免堵塞采樣針和污染試劑。因此，需要定期對后管道系統(tǒng)進行疏通處理。其次，新儀器投入使用前，應培訓操作人員，掌握儀器性能特點，并正規(guī)操作。②根據(jù)被測物反應終點，結合干擾物的反應情況來確定，如在血清白蛋白的溴甲酚綠法測定中，白蛋白與溴甲酚綠在10s內(nèi)很快完成反應，之后α球蛋白和β球蛋白與溴甲酚綠發(fā)生 慢反應，使反應曲線上吸光度在10s后仍繼續(xù)緩慢上升，持續(xù)約達10min，因此終點時間應采用10～30s，而不應選擇10min。但指示反應初期吸光度無明顯變化的化學反應較少，如單試劑方式測定總蛋白、白蛋白、鈣、磷、鎂等的終點法分析項目，及雙試劑方式測定葡萄糖、總膽固醇、甘油三酯等的終點法分析項目，因反應初期吸光度已有明顯變化，因而均難以用上述方式設置兩點終點法。例如：苦味酸法測定肌酐，反應的最初30s內(nèi)，血清中快反應干擾物（如微生物、丙酮酸、乙酰乙酸等）能與堿性苦味酸反應；在第二個30s時堿性苦味酸主要與肌酐反應，且此段時間－吸光度曲線的線性較好（故也可用連續(xù)監(jiān)測法測定肌酐）；在80～120s及其以后，堿性苦味可與蛋白質以及其它慢反應干擾物反應。關于理論K