【正文】 已被多種化學物質污染，進而可能轉染動物，從而影響試驗結果。例如： 一個雌性大鼠每 4? 5天一個發(fā)情期 ， 在發(fā)情期每天的夜晚它要跑 10? 15 km。 飼養(yǎng)密度 —— 每籠動物數(shù) （ Number of animals per cage） 飼養(yǎng)密度 飼養(yǎng)密度 ? 身處狹小籠中，實驗小鼠精神失常。 影響動物生物學穩(wěn)定性的因素 ?物理化學的因素 ?心理的因素 ?飼養(yǎng)管理因素 ?動物本身的遺傳特性 年齡和體重 ?動物的解剖生理特征和反應性隨年齡而有明顯的變化。 對非營養(yǎng)研究的影響 營養(yǎng)因素的影響 3. 對生理生化指標的影響 ? 低蛋白水平降低血紅蛋白、血清總蛋白、血清白蛋白和血清肽類激素水平。如 Pb在純養(yǎng)分日糧中比天然組分日糧表現(xiàn)較強的毒性。 ? 原則： ? 動物背部朝上 頭頂 右前肢 右側腰部 右后肢 4 、 尾跟部 左后肢 左側腰部 左前肢 背部 不標號 0或 10 ? 后面的數(shù)字永遠大于前 面的數(shù)字，如 1 2 5 8 12 345等等；而 沒有 1 2 4 65等等。 tail cliping Bleeding (cont.) ? Maximum amount of blood that can be safely removed for blood collection = 1% of body blood volume is approximately 6% of body weight – kg rabbit X 1% = 50 ml blood ? Animal produce ml/kg/day of blood – 5 kg rabbit, 1ml/kg = X ml/5kg, X = 5 ml/day – It will takes 10 days for the animals to replace the 50 ml that were with drawn Adult Blood Volume A n ima l A d u lt t o t a lb lo o dv o lu m e ( m l)S in g le s a m p lev o lu m e ( 1 0 %B V , m l)E x s a n g u in a t io nv o lu m e ( m l)R a b b it 1 6 0 4 8 0 2 0 4 0 6 0 1 6 0G u in e a p ig 4 0 8 0 4 8 1 5 3 0H a m s t e r 6 . 8 1 2 0 . 5 1 . 2 3 5G e r b il 4 . 4 8 0 . 5 1 2 4Mo u s e 1 . 6 3 . 2 0 . 2 0 . 3 1 1 . 5R a t 2 0 4 0 2 3 8 1 2Ophthalmic venous plexus Cardiac puncture 實驗動物的采尿方法 ? 代謝籠法：能將尿液和糞便分開而達到收集動物尿液目的的特殊裝置。 。 ?一次性使用的注射器、針頭、手套等物品使用后經消毒劑浸泡清洗，毀形后按要求統(tǒng)一進行無害化處理。 確認必要性 “ 3R” 原則 動物實驗倫理和動物福利 作好實驗設計 對照原則 隨機化原則 重復原則 均衡性原則 如何做好動物實驗？ 選擇適宜的實驗動物 實驗動物遺傳特性的選擇 實驗動物微生物等級的選擇 實驗動物數(shù)量、規(guī)格和性別的選擇 做好實驗操作和實驗條件保障工作 作好動物實驗結果的統(tǒng)計、分析和資料的 整理、歸檔工作 研究論文中有關實驗動物的描述 (1)品種、品系描述清楚； (2)來源明確； (3)體重明確； (4)等級明確； (5)飼養(yǎng)環(huán)境和實驗環(huán)境明確； (6)性別明確； (7)有對飼養(yǎng)方式的描述 (如飼料類型、營養(yǎng)水平、 照明方式、溫度、濕度要求 )； (8)所用動物數(shù)量準確； (9)對動物的健康狀況的描述詳細； (10)對動物實驗的處理方式有單獨清楚的交代； (11)動物福利倫理審查情況。 動物名稱 遺傳背景 動物數(shù)量和體重 性別 動物來源 實驗飼養(yǎng)條件 處死方法 動物質量資料 論文中關于動物描述舉例 Materials and methods . Animals Male and female breeder mice of SAMP and SAMR strains were a gift from the Biologic Laboratory of Takeda Chemical Industries (Osaka, Japan). The offspring of these breeders were used in the current study. Because of the low yield of pups (average of and pups/litter for SAMP8 and SAMR1, respectively) from each mating, both males and females were included in the experiments. A total of 164 mice were used in these studies. The Animal Research Committee of the Kochi Medical School approved all research protocols. Mice were housed under conditions free of specific pathogens at a temperature of 24 176。 Memorial Tower for Laboratory animal 如何做好動物實驗？ 明確目的及必要性 首先 要弄清其目的是什么 ,動物實驗也不例外。 Euthanasia (cont.)Rodents ? Acceptable – Inhalant anesthetic overdose – CO – CO2 – Barbiturate overdose – Microwave irraditation ? Conditionally acceptable – N2 (sedated or anesthetized) – Argon – Cervical dislocation (BW200g) – Decapitation Euthanasia (cont.)Unacceptable ? Humane concerns – Depression – Drowning – Strychnine ? For use in conscious animals – Exsanguination – Rapid freezing – Air embolism ? Sole method – Nicotine – Magnesium sulfate – Potassium chloride – All curariform agents – Stunning ? Hazardous to humans – Chloroform – Cyanide 常用脊椎動物安樂死方法 小于125g嚙齒動物 125g—1kg嚙齒動物 /兔 15kg嚙齒動物 /兔 狗 貓 非人靈長類 反芻動物、馬、豬 二氧化碳 O O O N N N NX Barbiturate 注射液，靜脈注射 O O O O O O O Barbiturate 注射液，腹腔注射 O O O N O N O 先麻醉，之后放血致死 O O O O O O O 先麻醉，之后靜脈注射KCl(2mmol/kg) O O O O O O O 先麻醉，之后斷頭 O O M N N N N 先麻醉，之后頸椎脫臼 O O N N N N N 動物清醒中直接斷頭 M M M N N N N 動物清醒中直接頸椎脫臼 M N N N N N N 電昏后放血致死 N N N N N N O 說明： O:建議使用方法； N:不得使用方法； M:一般情況不推薦使用，除非實驗需要。 。 ? 一般可按下列比例換算：人用藥量為 1；小鼠、大鼠為 2550；豚鼠、家兔為 1520；犬、貓為 510。 ?例如，由于在一天中的不同時間給予動物，一種藥物的陽性和陰性（毒性的）反應可能發(fā)生變化。 2. 動物實驗時的營養(yǎng) 動物體內各營養(yǎng)素間的復雜關系對營養(yǎng)研究至關重要。 2. 對生長發(fā)育的影響 ? 動物生長發(fā)育常為實驗的衡量指標。 勢力范圍 Male mice will fight when first comingled in a cage, and they need to be observed very closely during this time of establishing a social dominance hierarchy within the group. Weak and nonaggressive animals might be injured or killed if not removed from the cage. 實驗動物與設備和試劑同樣重要 實驗動物的影響 生物學穩(wěn)定性 ? 動物具有保持其主要機體功能在一定界限內工作的體內固有機制，這些機制在外界條件可能改變機體功能的情況下開始發(fā)揮作用 ,稱為生物學穩(wěn)定性。 粗暴的捉拿操作和新的員工可再激活動物逃跑的本能 ， 并可能影響到實驗結果 。 社會學因素 （ Sociological factors） 生物因素對動物試驗的影響 我們提供動物標準的環(huán)境、標準的飼料、清潔的水、清潔的墊料，并遠離它們自然的天敵。 動物每天 24小時與墊料密切接觸，墊料質量對動物有著巨大影響。引起動物緊張，導致不安和騷動。 大鼠、小鼠和家兔是夜行性動物，強光對它們是有害的?；\具中的氣體理想情況應該是盡可能地與新鮮空氣接近，符合空氣中氣體組分的正確混合 (nitrogen, %。 因此，環(huán)境溫度高于熱平衡區(qū)比低于它使動物的應激反應更強烈。 Other Immune Deficiency Animal NZBW F1 野生色 WBB6F1—W/WV （ WB—W/+♀ XC5TBL/6—WV/+） F1 Anaemia, gastric ulcer， bone marrow failure model White,black eye 動物模型復制原則 ? 相似性 ? 可重復性 ? 可靠性 ? 適用性和可控性 ? 易行性和經濟性