蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能(存儲版)
【正文】 是多肽鏈 180176。 結(jié)構(gòu)域是球狀蛋白的折疊單位 較小的蛋白質(zhì)分子或亞基往往是單結(jié)構(gòu)域的 。 ? 球形蛋白的三級結(jié)構(gòu)很密實 ， 大部分的水分子從球形蛋白的核心中被排出 ， 這使得極性基團間以及非極性基團間的相互用成為可能 。 ?亞基 (subunit)就是指參與構(gòu)成蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)的 、 每條具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈 。 ▲ α、 β鏈的三級結(jié)構(gòu)與肌紅蛋白的很相似 ， 血紅蛋白 (hemoglobin)的四級結(jié)構(gòu) ?當(dāng)血紅蛋白的一個 α 亞基與氧分子結(jié)合以后 ，可引起其他亞基的構(gòu)象發(fā)生改變 ， 對氧的親和力增加 ， 從而導(dǎo)致整個分子的氧結(jié)合力迅速增高 ， 使血紅蛋白的氧飽和曲線呈 “ S”形 。 ★ 負協(xié)同效性： 一種配基的結(jié)合抑制促進后續(xù)配基的結(jié)合 。在肺部， PO2超過 100torr，因此，即使沒有 BPG，血紅蛋白也能被飽和，在組織中， PO2低， BPG降低血紅蛋白的氧親和力，加大血紅蛋白的卸氧量。 ?引起蛋白質(zhì)變性的因素有： ① 物理因素 ：高溫 、 高壓 、 紫外線 、電離輻射 、 超聲波等； ② 化學(xué)因素 ：強酸 、 強堿 、 有機溶劑 、重金屬鹽等 。 第五節(jié)、蛋白質(zhì)的分離與純化 （ 一 ） 鹽析與有機溶劑沉淀： 1. 鹽析： ?在蛋白質(zhì)溶液中加入大量中性鹽 ，以破壞蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì) ， 使蛋白質(zhì)從溶液中沉淀析出 ， 稱為 鹽析 。 ?蛋白質(zhì)分子在溶液中可帶凈的負電荷或帶凈的正電荷 ， 故可在電場中發(fā)生移動 。 蛋白質(zhì)的氨基酸組成分析 3. 分析蛋白質(zhì)的 N端和 C端氨基酸 。 Edman降解法測定氨基酸序列 異硫氰酸苯酯 氨基酸自動測序儀 7. 將兩套不同肽段的氨基酸順序進行比較 ， 以獲得完整的蛋白質(zhì)分子的氨基酸順序 。 三、氨基酸順序分析 ? 蛋白質(zhì)多肽鏈的氨基酸順序分析 ， 即蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的測定 ， 主要包括以下幾個步驟： 1. 分離純化蛋白質(zhì) ， 得到一定量的蛋白質(zhì)純品 。 ?沉淀原理是： ① 脫水作用； ② 使水的介電常數(shù)降低 ， 蛋白質(zhì)溶解度降低 。 ? 加熱使蛋白質(zhì)變性并凝聚成塊狀稱為 凝固 。 ? 蛋白質(zhì)分子表面的水化膜和表面電荷是穩(wěn)定蛋白質(zhì)親水溶膠的兩個重要因素 。 BPG（ 2,3二磷酸甘油酸 ） 通過與它的兩個 β亞基形成鹽鍵穩(wěn)定了血紅蛋白的脫氧態(tài)的構(gòu)象 ， 因而降低脫氧血紅蛋白的氧親和力 。 ★異促效應(yīng)（異位效應(yīng)）： 就是別構(gòu)效應(yīng)，別構(gòu)部位與效應(yīng)物的結(jié)合對活性部位的影響。 ?適當(dāng)降低溶液滲透壓。 血紅素輔基 ， 扁平狀 ， 結(jié)合在肌紅蛋白表面的一個洞穴內(nèi) 。 ?維系三級結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵主要是非共價鍵（次級鍵），如疏水鍵、氫鍵、鹽鍵、范氏引力等，但也有共價鍵，如二硫鍵等。 RNase的分子結(jié)構(gòu) α 螺旋 β 折迭 β 轉(zhuǎn)角 無規(guī)卷曲 三 、 超二級結(jié)構(gòu) 由若干個相鄰的二級結(jié)構(gòu)單元 （ α螺旋 、 β折疊 、 β轉(zhuǎn)角及無規(guī)卷曲 ） 組合在一起 ， 彼此相互作用 ， 形成有規(guī)則的 、 在空間上能夠辨認的二級結(jié)構(gòu)組合體 。 封閉環(huán)原子數(shù) =3n+4（ n= .....） （ n：后邊第 n個 aa） （ n=1） 310 螺旋 （ n=2） 613螺旋 （ n=3） （ n=4） 310 n=1 n=2 n=3 n=4 ?影響 α 螺旋穩(wěn)定的因素有： ⑴ 極大的側(cè)鏈基團 （ 存在空間位阻 ） ； ⑵ 連續(xù)存在的側(cè)鏈帶有相同電荷的氨基酸殘基 （ 同種電荷的互斥效應(yīng) ） ； ⑶ 有 Pro等亞氨基酸存在 （ 不能形成氫鍵 ） 。 ★ 從 Cα沿鍵軸方向看，順時針旋轉(zhuǎn)的 Φ (Ψ)角為正值，反之為負值。 結(jié)構(gòu) ， 稱為肽單元或肽鍵平面 。 蛋白質(zhì)分子中氫鍵的形成 2. 疏水鍵： ?非極性物質(zhì)在含水的極性環(huán)境中存在時 ，會產(chǎn)生一種相互聚集的力 ， 這種力稱為 疏水鍵或疏水作用力 。 （三）蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)與生物功能 ★ 蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)決定高級結(jié)構(gòu)和功能 ★ 同源蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的種屬差異與生物進化 通過比較同源蛋白質(zhì)的氨基酸序列的差異可以研究不同物種間的親源關(guān)系和進化 。 （ 9） 確定多肽鏈中二硫鍵的位置 。其巰基可氧化、還原，故有還原型（ GSH）與氧化型（ GSSG）兩種存在形式。 蛋白質(zhì)的構(gòu)象通常由 非共價鍵 （ 次級鍵 ） 來維系 。 氨基酸的光吸收性 Tyr、 Phe、 Trp的R基含有共軛雙鍵，在 220300nm近紫外區(qū)有吸收。Asp,Glu. 三、氨基酸的理化性質(zhì)： 1．兩性解離及等電點： (1) 氨基酸在晶體和水溶液中主要以兼性離子形式存在 ① 晶體溶點高 → 離子晶格 ， 不是分子晶格 。第二章 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能 Chapter 2 Structure and Function of Protein 主講人：段江燕 ?蛋白質(zhì) (protein)是由氨基酸為單位組成的一類重要的生物大分子 ， 是生命的物質(zhì)基礎(chǔ) 。 b)極性氨基酸： Gly,Tyr， Cys， Ser， Thr，Asn， Gln； Lys,Arg,His。 ?可利用此性質(zhì)采用紫外分分光度法測定蛋白質(zhì)的含量 。 ?構(gòu)象是由于有機分子中單鍵的旋轉(zhuǎn)所形成的 。 谷胱甘肽 （ GSH） ： ?全稱為 γ 谷氨酰半胱氨酰甘氨酸。 （ 7） 測定各個肽段的氨基酸順序 （ 8） 確定肽段在多肽鏈中的順序 。 ★ 羧肽酶法 （ Pro不能測 ） 羧肽酶 A：除 Pro、 Arg、 Lys外的所有 C端 羧肽酶 B：只水解 Arg、 Lys N H2N… … … … … Val— Ser— Gly C 肽鏈的部分裂解和肽段的分離純化 （ 1） 、 化學(xué)裂解法 ① 溴化氰 — Met— X— 產(chǎn)率 85% ② 亞碘?；郊姿? — Tr
黨政相關(guān)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1