蛋白質(zhì)的化學(xué)修飾ppt課件(存儲(chǔ)版)
【正文】 芐基鹵化物能使吲哚環(huán)烷基化 最常用的是 2羥基 5硝基芐基溴，由于溶解度的問題，常用它的類似物二甲基（ 2羥基 5硝基芐基）锍鹽。 E N Z O HC H C(NO2)4+ E N Z O HN O 2C HC ( N O 2 ) 3 + H ++ 四硝基甲烷 3硝基酪氨酸 試 劑 修 飾 的 側(cè) 鏈 Lys Glu Cys Arg Ser His Tyr Trp Met 醋酸酐 酰基酸酐 醛 N溴琥珀酰亞胺 碳二亞胺 苯異硫氰 四硝基甲烷 三硝基苯磺酸 焦碳酸二乙酯 碘乙酸 環(huán)乙烯亞胺 甲苯磺酰氟 馬來酰胺 常用重要修飾劑的專一性 第四節(jié) 蛋白質(zhì)肽鏈的交聯(lián) 雙功能試劑：具有兩個(gè)反應(yīng)活性部位，可以在相隔較近的兩個(gè)氨基酸殘基間搭橋、形成多肽鏈內(nèi)、多肽鏈間或者蛋白質(zhì)分子之間的交聯(lián)，而不引起蛋白質(zhì)構(gòu)象的重大改變的試劑。 雙亞氨酸酯（非裂解） 二甲基 3， 3′二硫代 雙丙基亞氨酯（可裂解） （二）異型雙功能試劑 這類試劑的一端與氨基作用，另一端與巰基側(cè)鏈作用，但用碳二亞胺時(shí)，另一端反應(yīng)基團(tuán)是羧基。 可測(cè)定齊聚體蛋白質(zhì)的分子量和亞基數(shù)目。 二、外生親和試劑 （一）將鹵代烷基衍生物通過腺嘌呤的 N6連到腺嘌呤 上，則可形成有效的外生親和試劑。 第六節(jié) 蛋白質(zhì)氨基酸的敏化光氧化 蛋白質(zhì)的敏化光氧化：當(dāng)敏化劑與蛋白質(zhì)共存時(shí)，若用可見光照射，則敏化劑產(chǎn)生化學(xué)變化，使蛋白質(zhì)側(cè)鏈氧化。 二、在蛋白質(zhì)序列分析中的應(yīng)用 （一）控制酶解程度 用三氟乙酰法將 Lys的 εNH2保護(hù)起來 變成酶不能水解的產(chǎn)物。 三、在雜化實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用 催化亞基 Cn 四硝基甲烷 硝化亞基 （活力保持 80～ 90%） 磷酸吡哆醛 吡哆醛化亞基 四氫鄰苯 二甲酸酐 ?；呋瘉喕? 催化亞基 Cn 調(diào)節(jié)亞基 R 修飾亞基 Ct 重組 Cn— R— Cn Cn— R— Ct Ct— R— Ct （活力喪失 90%） 重組分子（雜化分子） 。 第七節(jié) 蛋白質(zhì)化學(xué)修飾的應(yīng)用 一、用來測(cè)定蛋白質(zhì)分子中某種氨基酸的數(shù)量 常用方法 : 對(duì)氯苯甲酸與巰基作用； 三硝基苯磺酸與氨基作用 。 8疊氮腺苷三磷酸 芳基疊氮 β丙氨酸 NAD 試劑中的光親和基團(tuán) 是通過核糖的羥基連 接的。 嘌呤核苷酸的烷基鹵化衍生物也可看作是親和試劑，各種親和側(cè)鏈如 Cys、 His、 Lys、 Met等能與試劑上的鹵原子反應(yīng)。 兩種酶通過交聯(lián)形成雜化酶。兩端間的間隔基團(tuán)是（ CH2） n OCN H 2(
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