菌種的傳代與保藏ppt課件(存儲版)
【正文】 。 ? 將已接種畢的細(xì)菌管置 35~37℃ 培養(yǎng) 22~24小時 ， 霉菌管一般置 20~25℃ 霉菌培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 7日 。如發(fā)現(xiàn)菌型不典型，可進(jìn)行平板分離單菌落。 ⑥ 制備無菌液體石蠟時 ， 每管裝量不能太多 ， 否則分裝到菌種培養(yǎng)基中易造成污染 。 ? 適用范圍：適用于保藏部分霉菌 ， 酵母菌和放線菌 ， 對細(xì)菌保藏效果較差 。 ? 必須定期檢查保藏菌種冰箱的溫度 、 濕度以及菌種管的棉塞是否松動或生霉 ， 如有異常應(yīng)及時處理 。每隔 2~3個月移種一次，繼續(xù)進(jìn)行保藏。低溫、干燥、缺氧、缺乏營養(yǎng)等環(huán)境條件都有抑制微生物的代謝作用。 ? 大腸桿菌 [CMCC (B) 44102] ? 乙型副傷寒沙門桿菌 [CMCC (B) 50094] ? 銅綠假單胞菌 [CMCC (B)10104] ? 金黃色葡萄球菌 [CMCC (B)26003] ? 生孢梭菌 [CMCC(B)64941] ? 白色念珠菌 [CMCC(F)98001] 三、常用菌種保藏方法 (一 ) 菌種保藏的原理 ? 根據(jù)微生物的菌種生理、生化特性，在人工創(chuàng)造的條件下盡量降低微生物細(xì)胞的代謝強度，使細(xì)胞基本處于休眠狀態(tài)，生長繁殖受到抑制但又不至于死亡，以減低菌種的變異率。放在 4℃ 左右的冰箱中保藏。 ? 保藏時 ， 破傷風(fēng)桿菌可用庖肉培養(yǎng)基；生孢梭菌用流體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基 。 ? 將上述液體石蠟加入培養(yǎng)好的菌種試管內(nèi) ， 液體石蠟液面以高出培養(yǎng)基最上端 1 ㎝ 為宜 ， 將試管直立 ，放入 4℃ 冰箱中保藏 。 一般以高出斜面 1 ㎝ 為宜 。 ? 取出培養(yǎng)物，仔細(xì)觀察菌苔形態(tài)、有無雜菌、涂片、革蘭氏染色鏡檢，呈典型菌落后，轉(zhuǎn)種 3 代即可應(yīng)用。 ? 取出接種棒 ， 在火焰旁將培養(yǎng)基管棉塞堵上 ， 然后將接種過細(xì)菌的接種棒在火焰上燒灼滅菌 。用平板計數(shù)。 ? 購置菌種 ， 應(yīng)有介紹信 。 ? 菌種應(yīng)有詳細(xì)登記本 ， 包括名稱 、 分離日期 、鑒定日期 、 鑒定者 、 主要鑒定性能 ， 并注意記錄使用 、 轉(zhuǎn)移及銷毀情況和原因 。 一般同時接種幾支管 ， 其中一支用于以后菌種傳代或接種到半固體瓊脂培養(yǎng)基中 ， 其它用做工作菌種 。 至冰箱取出的菌種斜面 ， 應(yīng)在室溫放置約 30分鐘 ， 待溫度平衡后再移入接種室或超凈工作臺 。 1 菌種的復(fù)蘇 ?把凍干菌種管、滅菌 1ml 滴管、雙碟、鑷子、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂斜面數(shù)支，移入接種室或凈化工作臺。 ② 保藏過程中 ， 需經(jīng)常觀察斜面是否干燥 ， 如干燥 ， 需重新移種 。 ?
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