植株生理生長指標(biāo)的測定(存儲版)
【正文】 L HCl）。 （三）儀器設(shè)備 冷凍離心機(jī)，分光光度計，天平（感量 mg ），冰箱，恒溫水浴，研缽，剪刀，離心管，具塞試管，移液管，洗耳球。三、結(jié)果計算樣品中硝酸還原酶活性μg/g?h=xVSVTWtx—反應(yīng)液酶催化產(chǎn)生的亞硝態(tài)氮總量（μg）； VT—提取酶時加入的緩沖液體積，mL；VS—酶反應(yīng)時加入的粗酶液體積，mL； W—樣品鮮重，g；t —反應(yīng)時間，h。二、實驗步驟（一）標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：同離體法（二）酶反應(yīng)及活性測定取樣：~ 4份，剪成1cm左右的小段，放于小燒杯中，用直徑略小于燒杯直徑的玻璃瓶塞將材料全部壓于杯底，其中1份作對照，另外3份做酶活性測定用。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長下的吸光系數(shù)可通過測定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長下的吸光度而求得。由于葉綠體色素在不同溶劑中的吸收光譜有差異，因此，在使用其他溶劑提取色素時，計算公式也有所不同。（4）用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。1000—1L=1000mL。公式11相加即得葉綠素總濃度。靜置3~5min。解方程組（1）、（2）得：Ca= （3）Cb= （4）將Ca與Cb相加即得葉綠素總量CTCT=Ca+Cb=+ （5）另外，由于葉綠素a、葉綠素b在652nm的吸收峰相交，兩者有相同的吸光系數(shù)（），也可以在此波長下測定一次吸光度（A652）而求出葉綠素a、葉綠素b總量： CT=A652 （6）在有葉綠素存在的條件下，用分光光度法可同時測定出溶液中類胡蘿卜素的含量。 葉綠素含量的測定一、原理根據(jù)葉綠體色素提取液對可見光譜的吸收，利用分光光度計在某一特定波長測定其吸光度，即可用公式計算出提取液中各色素的含量。30%三氯乙酸溶液：30g三氯乙酸，水溶后定容至100mL。終止反應(yīng)和比色測定 保溫結(jié)束后立即加入1mL磺胺溶液終止酶反應(yīng)，再加1mL萘基乙烯胺溶液，顯色15min后于4000r/min下離心5min，取上清液在540nm下比色測定吸光度。 提取緩沖液：、 EDTA溶于100mL mol/L 。12H2O 硝酸還原酶活性可由產(chǎn)生的亞硝態(tài)氮的量表示。、用乙酸乙酯定容至刻度，即得到含甲腙25μg、50μg、100μg、150μg、200μg的標(biāo)準(zhǔn)比色系列，以空白作參比，在485nm波長下測定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。定容到100ml。所以TTC還原量能表示脫氫酶活
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