形態(tài)學檢驗技術(shù)huppt課件(存儲版)
【正文】 過５ mm 為宜，并快速投入固定液中。石蠟切片法就是使石蠟滲入組織，以達到支持增硬的作用。二甲苯是常用的一種透明劑。 ? 包埋前，視組織塊的大小先將繪圖紙折成一紙盒，作為包埋的容器。用毛筆輕輕取下蠟帶，放在蠟帶盒內(nèi)備用。 (11)透明 ? 切片入 1： 1無水酒精、二甲苯 → 二甲苯 (Ⅰ )→ 二甲苯 (Ⅱ )，各級停留 15min。 ④入１％氨水或自來水浸洗，使之藍化。 第四節(jié) 超顯微形態(tài)檢驗技術(shù) ?透射電子顯微鏡的發(fā)明者 （ 1932）和掃描隧道顯微鏡的發(fā)明者 （ 1982）共同獲得 1986年度諾貝爾物理學獎。經(jīng)加速而具有能量的電子從陽極板的孔中射出。 ③ 觀察照相室 ? 電子圖像反映在熒光屏上。透射電鏡的電路主要由以下部分組成，高壓直流電源、透鏡勵磁電源、偏轉(zhuǎn)器線圈電源、電子槍燈絲加熱電源，以及真空系統(tǒng)控制電路、真空泵電源、照相驅(qū)動裝置及自動曝光電路等。因此，試樣各點狀態(tài)不同，顯象管各點相應的亮度也必不同，由此得到的圖像一定是試樣狀態(tài)的反映。 D、保真度好：試樣通常不需要作任何處理即可以直接進行形貌觀察，所以不會由于制樣原因而產(chǎn)生假象。 ?克服了電子顯微鏡中高能電子束對樣品的輻射損傷以及樣品必須處于高真空中的限制。 ?成像過程中探針與樣品表面之間的距離小于1nm，電子云互相重疊，在這兩物體間施加2mv~2v的電壓，電子就可因量子隧道效應有針尖（或樣品）轉(zhuǎn)移到樣品（或針尖），從而在針尖和樣品間形成隧道電流。 C、景深大：景深大的圖像立體感強，對粗糙不平的斷口試樣觀察需要大景深。 掃描電子顯微鏡 （ Scanning Electron Microscope， SEM） 掃描電子顯微鏡示意圖 設在試樣附近的探測器把激發(fā)出的電子信號接受下來，經(jīng)信號處理放大系統(tǒng)后，輸送到顯象管柵極以調(diào)制顯象管的亮度。如果真空度低的話，電子與氣體分子之間的碰撞引起散射而影響襯度，還會使電子柵極與陽極間高壓電離導致極間放電，殘余的氣體還會腐蝕燈絲，污染樣品。樣品可在 X、 Y二方向移動，以便找到所要觀察的位置。在陽極加電壓，電子加速。 ? 切片封好后，放在切片托盤上待干燥，即可用于觀察。分色時就是褪去細胞質(zhì)不應著色部分的顏色，而使細胞核著色得清晰適度。 (9)染色 ? 染色劑多為水溶液，故染色前必須先經(jīng)脫蠟、復水等步驟。 ? 在旋轉(zhuǎn)式切片機上將蠟塊切成 48μm厚的薄片。浸蠟時間視材料大小而定，一般總的浸蠟時間為 24小時左右。 (4)透明 ? 酒精與石蠟不能混和，因此，脫水后的材料在浸蠟前，還必須經(jīng)過透明。浸洗后的材料若暫時不制片，可保存于７０％酒精中。 ? 應用最廣泛的 石蠟切片法制作過程是：取材→ 固定 → 沖洗 → 脫水 → 透明 → 浸蠟 → 包埋 →切片 → 貼片 → 烤片 → 脫蠟 → 復水 → 染色 → 脫水 → 透明 → 封藏。經(jīng)染色后的細菌細胞與背景形成鮮明的對比，在顯微鏡下更易于識別。 B、復消色差物鏡：物鏡外殼上標有“ Apo”字樣，除能校正紅、藍、綠三色光的色差外，還能校正黃色光造成的相差，通常與補償目鏡配合使用。照相時選用照相目鏡（ NFK）。檢查山道年（ Santonin）可將原料直接加甲醇鈉，顯紫紅色為陽性反應。 紙片法 取樣品抽提液滴在濾紙上，待展開，干后噴灑試液，可以檢查多種成分?！翱础本褪羌氈碌挠^察樣品，包括樣品的全貌和樣品各部位的特點，如形狀、顏色、光澤、分泌物、毛、孔、表面和斷面、斑點、刺等。 生物樣品的預處理 (1)消化分解：使用強酸或強堿等消化分解液，初步處理樣品，使大部分蛋白等大分子物質(zhì)在一定程度上降解或去除。如果遇到陰雨天或潮濕氣候，可放在4060℃ 鼓風干燥箱中烘干，以免發(fā)霉腐爛，并減少化學和生物變化。 采樣的最一般方法 ① 采樣前應預先準備好采樣工具，如刀具、剪刀、保存袋、手套、冰盒、標簽、記錄本、采集登記表等； ②根據(jù)實際情況確定樣品采樣量：為了確保有足夠數(shù)量的樣品進行檢測分析，應根據(jù)檢測分析項目的內(nèi)容要求確定樣品的采集量。每晚必須及時整理檢查，補上漏記的項目。 植物標本的采集注意事項 (1)采集的植物全株樣品最好帶有繁殖器官 (花、果或孢子囊、子實體等 )，草本植物特別應該注意帶有葉的部分和地下部分，寄生植物應帶寄主。例如在田地里采樣，不要采集田埂、地邊及距田埂地邊 2米以內(nèi)的植株。 隨后的檢驗和分析 可以千差萬別，例如確定病原生物的種類、藥物作用的時空變化、遺傳基因的改變、食品毒物的含量等，這包括微生物檢驗、生物化學檢驗和分子生物學檢驗。 適時性 ? 指需要充分注意生物的 不同生長發(fā)育階段 。 (5)對于含水分較多（如景天科、仙人掌科等）或有根狀 地下莖植物（如百合科），有時需切開干燥或用開水將其燙死。 (2)血液：血液中有害物質(zhì)的濃度可反映近期接觸污染物質(zhì)的水平，并與其吸收量呈正相關(guān)。 ⑥平均樣的獲得：四分法、切成塊的 1/41/8混合。 ③過篩：將粉碎好的樣品過
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