微生物的生長第5章新(存儲版)
【正文】 ?傳代培養(yǎng)保藏 ?常用的有 瓊脂斜面 、 半固體瓊脂柱及 液體培養(yǎng) 等。 富集條件 可據(jù)分離的微生物的特點從物理、化學、生物及綜合多個方面進行選擇，如溫度、 pH、紫外線、高壓、光照、氧氣、營養(yǎng)等等許多方面。 77 ?單細胞 (單孢子 )分離 ? 采取顯微分離法從混雜群體中直接分離單個細胞或單個個體進行培養(yǎng)以獲得純培養(yǎng)，稱為 單細胞 (單孢子 )分離法 。 其做法 是先將已熔化的培養(yǎng)基倒人無菌平皿，制成無菌平板，冷卻凝固后，將一定量的某一稀釋度的樣品懸液滴加在平板表面，再用無菌玻璃涂棒將菌液均勻分散至整個平板表面，經(jīng)培養(yǎng)后挑取單個菌落。 大多數(shù)細菌、酵母菌，以及許多真菌和單細胞藻類能在固體培養(yǎng)基上形成孤立的菌落，采用適宜的平板分離法很容易得到純培養(yǎng) 62 ?所謂 平板， 即 培養(yǎng)平板 (culture plate)的簡稱， 它是指熔化的固體培養(yǎng)基倒入無菌平皿，冷卻凝固后，盛有固體培養(yǎng)基的平皿。 ? 在分離、轉接及培養(yǎng)純培養(yǎng)物時防止其被其他微生物污染的技術被稱為 無菌技術(aseptic technique)， 它是保證微生物學研究正常進行的關鍵。 計數(shù)法 微生物生長量的測定方法 26 這類方法是利用特定的細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量。培養(yǎng)過程 不投加或取出任何東西 。 (50%～ 80%(或65%))≈ 蛋白質(zhì)總量 D N A 含 量 核酸 DNA是微生物的重要遺傳物質(zhì)，每個細菌的 DNA含量相當恒定，平均為 105ng. 37 167。 58 ③ 最常用的滅菌方法是 高壓蒸汽滅菌 ，它可以殺滅所有的生物，包括最耐熱的某些微生物的休眠體，同時可以基本保持培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分不被破壞。 ?最常用的分離、培養(yǎng)微生物的固體培養(yǎng)基是瓊脂固體培養(yǎng)基平板。 ? 將一系列盛無菌瓊脂培養(yǎng)基的試管加熱使瓊脂熔化后，冷卻并保持在 50℃ 左右，用這些試管進行梯度稀釋待分離材料，試管均勻，冷凝，傾注一層滅菌液體石蠟和固體石蠟的混合物，將培養(yǎng)基和空氣隔開。 78 ?選擇培養(yǎng)分離 如果某種微生物的生長需要是已知的，也可以設計一套特定環(huán)境使之特別適合這種微生物的生長，因而能夠從自然界混雜的微生物群體中把這種微生物選擇培養(yǎng)出來，即使在混雜的微生物群體中這種微生物可能只占少數(shù)。對于這些生物，二元培養(yǎng)物是在實驗室控制條件下可能達到的最接近于純培養(yǎng)的培養(yǎng)方法。 ?微生物細胞對 低溫敏感 ，可用速凍、快速升溫和添加各種保護劑等手段。達到干燥的樣品可在真空或惰性氣體的密閉環(huán)境中置低溫保存，從而 使微生物處于干燥、缺氧及低溫的狀態(tài)，生命活動處于休眠， 可以達到長期保藏的目的。 87 ?沙土管保存 主要適用于產(chǎn)孢子的微生物 ，如芽孢桿菌、放線菌等。 ?菌種保藏機構： 中國微生物菌種保藏委員會 (CCCCM)， 中國典型培養(yǎng)物保藏中心 (CCTCC)， 美國典型菌種保藏中心 (ATCC)， 世界菌種保藏聯(lián)合會 (WFGC) 。 ? 富集培養(yǎng) 主要是指利用不同微生物間生命活動特點的不同，制定特定的環(huán)境條件，使僅適應于該條件的微生物旺盛生長，從而使其在群落中的數(shù)量大大增加，人們能夠更容易地從自然界中分離到所需的特定微生物。采用稀釋法進行液體分離，必須在同一個稀釋度的許多平行試管中，大多數(shù)(一般應超過 95%)表現(xiàn)為不生長。 66 ?涂布平板法 在微生物學研究中更常用的純種分離方法是涂布平板法。 ? 由于打開器皿就可能引起器皿內(nèi)部被環(huán)境中的其他微生物污染，因此 微生物實驗的所有操作均應在無菌條件下進行 ，其要點是在火焰附近進行熟練的無菌操作，或在無菌箱或操作室內(nèi)無菌的環(huán)境下進行操作 61 ?用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng) ? 不同微生物在特定培養(yǎng)基上生長形成的菌落或菌苔一般都具有穩(wěn)定的特征，可以成為對該微生物進行分類、鑒定的重要依據(jù)。因此，在微生物的研究及應用中，不僅需要通過分離純化技術從混雜的天然微生物群中分離出特定的微生物，而且還必須隨時注意保持微生物純培養(yǎng)物的“純潔”，防止其他微生物的混入。計數(shù)法又分為 直接計數(shù) 和 間接計數(shù) 兩類。這種培養(yǎng)方式也叫分批培養(yǎng)。 微生物的生存因子 ◆ 溫度對微生物生長的影響： 酶的活性 ； 細胞膜的流動性 ； 物質(zhì)的溶解度 ◆ 微生物對溫度變化很敏感 ◆ 高過極限導致死亡：酶、運輸載體被破壞，膜崩解；低溫：功能受到影響，但化學組分和結構不一定全受到影響 溫度 38 ◆ 微生物有各自的最低、最適和最高生長溫度范圍 ◆ 據(jù)微生物對溫度的生長需求，將微生物分四大類，嗜冷菌、嗜中溫菌、嗜熱菌和嗜超熱菌 溫度 基本溫度 cardinal temperature： 最低溫度 最適溫度 最高溫度 39 一種生活在蚊子消化道內(nèi)的原生動物，2227C在簡單培養(yǎng)基中就可以生長 ,但在 3334C下 ,必須向培養(yǎng)基中加金屬、氨基酸、維生素才能生長。 ④ 有些玻璃器皿也可采用 高溫干熱滅菌 59 ⑤ 為了防止雜菌，特別是空氣中的雜菌污染，試管及玻璃燒瓶都需采用適宜的塞子塞口，通常采用 棉花塞 ，也可采用各種 金屬、塑料及硅膠帽 ，它們只可讓空氣通過，而空氣中的其他微生物不能通過。Koch建立的 平板分離微生物純培養(yǎng)的技術 簡便易行， 100多年來一直是各種菌種分離的最常用手段。 培養(yǎng)后，
法律信息相關推薦
鄂ICP備17016276號-1