分子生物學課件chapter4dna復制(存儲版)
【正文】 lestranded DNA binding proteins stabilize ssDNA prior to replication Topoisomerases remove supercoils produced by DNA unwinding at the replication fork DNA polymerase extend the DNA chain Table 81 (factors involved in the replication) 1)、 解螺旋酶 （ helicase） :又稱解旋酶 , 通過水解ATP獲得能量 ,解開 DNA雙鏈 . 2). 單鏈結合蛋白 （ SSB): 結合在 DNA單鏈上 ,有時有協(xié)同效應 . 3)、 DNA旋轉酶 ：消除復制叉前進過程中產生的正超螺旋，產生負超螺旋 . The initiation of DNA replication （ 1） OriC in E. coli chromosomal DNA ? 四個 9bp的重復序列 dnaA結合位點 ? 三個 13bp的重復序列 若干 GATC位點 酵母菌的復制起點 稱為 ARS(autonomously replicating sequence)，有100多個 bp。 ②解決末端復制問題，端粒酶能與端粒作用，延伸其長度。當端粒比正常的長度短數(shù) kb時細胞就不再分裂。其中 RNAⅡ 也叫做復制引物。 實驗表明－－人體細胞通過監(jiān)測失去的端粒的重復數(shù)而計數(shù)細胞分裂次數(shù)，當端粒長度下降到 某一臨界值時，細胞終止分裂－－－衰老、死亡“多莉”的衰老研究端粒丟失的速率，預測人類的壽命＞ 研究推測端粒酶與腫瘤的關系ColE1質粒 DNA的復制是從一個特定的復制起點（ ori）開始，并沿著環(huán) DNA分子單向性地進行。 （ 3） 補齊過程 通過 TG鏈的回折形成 發(fā)夾結構（ G 端粒的功能： ①維持染色體的完整性，決定細胞的壽命。 轉入正常 N源培養(yǎng)基中 ARS包括一個共有序列 (A)和附加元件 (B1~B3)。 端粒的結構 ① DNA端粒由簡單的串聯(lián)重復序列組成 人和其他脊椎動物： AGGGTT 纖毛原生動物四膜蟲： GGGGTT和 GGGGTTTT 面包酵母： G1－ 3T和 G1－ 5A 共同特點：富含 G；長度達幾百到幾 kb；人類 DNA端粒長幾 kb到幾十 kb。所以端粒變短是一種老化的象征。 RNAⅡ 分子在轉錄起點附近同互補的模板 DNA形成一種雜交分子，被RnaseH酶所切割，從而釋放出 3′OH末端，作為供 DNA聚合酶 Ⅰ 合成 DNA的引物。這點可被用來檢驗癌細胞。 端粒酶的作用機制：端粒酶的 RNA分子與端粒 DNA配對，以 RNA為模板進行類似逆轉錄合成 DNA，向 5’→ 3’延伸端粒至模板 RNA末端后，延長的 DNA末端與 RNA模板解離，端粒酶移動，重新定位于延長后的 DNA3’端，開始下一輪延
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