【正文】 細(xì)胞內(nèi)少部分正常 mRNA也可經(jīng)由無義介導(dǎo)的途徑降解 。 。 這類內(nèi)含子的剪接與前面介紹的前體 mRNA內(nèi)含子剪接相同 ， 但是沒有剪接體參與 目錄 I和 II型內(nèi)含子的剪切 目錄 五、 RNA在細(xì)胞內(nèi)的降解有多種途徑 ? 正常轉(zhuǎn)錄物和異常轉(zhuǎn)錄物的降解途徑有一定差異 。 ? RNA編輯作用說明 ， 基因的編碼序列經(jīng)過轉(zhuǎn)錄后加工 ， 是可有多用途分化的 ， 因此也稱為 分化加工 (differential RNA processing)。 1. 內(nèi)含子在剪接接口處剪除 ? 大多數(shù)內(nèi)含子都以 GU為 5?端的起始 ， 而其末端則為 AGOH3?。 ?前體 mRNA分子的斷裂和加多聚腺苷酸尾是多步驟過程 。 ?加工主要在細(xì)胞核中進(jìn)行 。 目錄 核酸酶 RNApol AATAAA GTGTGTG 轉(zhuǎn)錄終止的修飾點 5? 5? 3? 3? 3?加尾 AAAAAAA 目錄 三 、真核生物轉(zhuǎn)錄延長過程中沒有轉(zhuǎn)錄與翻譯同步的現(xiàn)象 ?真核生物轉(zhuǎn)錄延長過程與原核生物大致相似 ，但因有核膜相隔 ， 沒有轉(zhuǎn)錄與翻譯同步的現(xiàn)象 。 ? CTD磷酸化能使開放復(fù)合體的構(gòu)象發(fā)生改變，啟動轉(zhuǎn)錄。 目錄 轉(zhuǎn)錄起始點 TATA盒 CAAT盒 GC盒 增強(qiáng)子 ? 順式作用元件 (cisacting element) AATAAA 切離加尾 轉(zhuǎn)錄終止點 修飾點 外顯子 翻譯起始點 內(nèi)含子 OCT1 OCT1： ATTTGCAT八聚體 目錄 ?真核生物轉(zhuǎn)錄起始也需要 RNA pol對起始點上游 DNA序列進(jìn)行辨認(rèn)和結(jié)合 ， 生成 轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合體 （ preinitiation plex, PIC） 。 RNA polⅡ 還催化合成一些具有重要的基因表達(dá)調(diào) 節(jié) 作 用 的 非 編 碼 RNA ， 如 長 鏈 非 編 碼 RNA（ lncRNA） 、 微 RNA（ miRNA） 和 piRNA（ 與 Piwi蛋白相作用的 RNA） 的合成 。 ??因子還有 ATP酶活性和解螺旋酶 (helicase)的活性 。 DNA雙鏈解開的范圍只在 17 bp左右 ， 這比復(fù)制中形成的復(fù)制叉小得多 。 操縱子包括若干個結(jié)構(gòu)基因及其上游 (upstream)的調(diào)控序列 。 ? RNA聚合酶和雙鏈 DNA結(jié)合時活性最高 ， 但是只以雙鏈 DNA中的一股 DNA鏈為模板 。 Enzymes in prokaryotic transcription 第一節(jié) 目錄 ? 參與轉(zhuǎn)錄的物質(zhì)： ?原料 : NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) ?模板 : DNA ?酶 : RNA聚合酶 (RNA polymerase, RNApol) ?其他蛋白質(zhì)因子及 Mg2+和 Mn2+等 合成方向 5?→3 ?， 核苷酸間的連接方式為 3?， 5?磷酸二酯鍵。目錄 生物化學(xué)與分子生物學(xué) 目錄 第十六章 RNA的生物合成 RNA Biosynthesis ( Transcription ) 目錄 ? 在生物界， RNA合成有兩種方式 ? 一是 DNA指導(dǎo)的 RNA合成 ， 也叫轉(zhuǎn)錄 ， 此為生物體內(nèi)的主要合成方式 ， 也是 本章介紹的主要內(nèi)容 。 復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的區(qū)別 A U ， T A ， G CA T ， G C配對mR N A ， tR N A ， r R NA子代雙鏈 DN A（ 半保留復(fù)制）產(chǎn)物RN A 聚合酶（ RN A pol ）DN A 聚合酶酶NTPdNTP原料模板鏈轉(zhuǎn)錄（不對稱轉(zhuǎn)錄）兩股鏈均復(fù)制模板轉(zhuǎn)錄復(fù)制， ， ，（）酶目錄 原核生物轉(zhuǎn)錄的模板和酶 Templates amp。5′ 5′ ( NMP )n + NTP → ( NMP ) n+1 + PPi RNA 延長的 RNA 目錄 DNA依賴的 RNA聚合酶催化 RNA合成的機(jī)制 目錄 ? DNA聚合酶在啟動 DNA鏈延長時需要引物存在 ， 而RNA聚合酶 不需要引物 就能直接啟動 RNA鏈的延長 。 ?每一轉(zhuǎn)錄區(qū)段可視為一個轉(zhuǎn)錄單位 ， 稱為 操縱子 (operon)。 一、轉(zhuǎn)錄起始需要 RNA聚合酶全酶 ? 轉(zhuǎn)錄起始需解決兩個問題： 2. DNA 雙 鏈 打 開 ， 形成 開 放 轉(zhuǎn) 錄 復(fù) 合 體 (open transcription plex) ； DNA分子接近 10區(qū)域的部分雙螺旋解開后轉(zhuǎn)錄開始 。 DNA ??因子能結(jié)合 RNA， 又以對 poly C的結(jié)合力最強(qiáng) ， 但對 poly dC/dG組成的 DNA的結(jié)合能力就低得多 。mRNA是各種 RNA中壽命最短 、 最不穩(wěn)定的 ， 需經(jīng)常重新合成 。 目錄 （一）轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合體的形成 ?不同物種 、 不同細(xì)胞或不同的基因 ， 轉(zhuǎn)錄起始點上游都有不同的特異 DNA序列 ， 包括啟動子 、增強(qiáng)子等 ， 統(tǒng)稱為 順式作用元件 (cisacting element)。 ? TFIIH還具有激酶活性，它的一個亞基能使 RNA pol II的 CTD磷酸化。 可誘導(dǎo)因子和上游因子常常通過輔激活因子或中介子與基本轉(zhuǎn)錄因子 、 RNA聚合酶結(jié)合 ， 但有時也可直接與基本轉(zhuǎn)錄因子 、 RNA聚合酶結(jié)合 。 這些序列稱為轉(zhuǎn)錄終止的修飾點 。 目錄 ? 真核生物的轉(zhuǎn)錄終止及加尾修飾 目錄 真核生物 RNA的加工和降解 The Processing and Degradation of Eukaryotic RNA 第四節(jié) 目錄 ?真核生物轉(zhuǎn)錄生成的 RNA分子是初級 RNA轉(zhuǎn)錄物 (primary RNA transcript)， 幾乎所有的初級 RNA轉(zhuǎn)錄物都要經(jīng)過加工 ， 才能成為具有功能的成熟的 RNA。 ?一般真核生物在胞漿內(nèi)出現(xiàn)的 mRNA， 其 poly A長度為 100至 200個核苷酸之間 ， 也有少數(shù)例外 。 ? 此后 ， 還發(fā)現(xiàn)內(nèi)含子近 3′端的嘌呤甲基化 ， 例如 3mG是形成套索所必需的 。 目錄 真核細(xì)胞基因的前體 mRNA交替加工的兩種機(jī)制