松材線蟲、松墨天牛和松樹間的共生關(guān)系研究-研究生課程論(存儲版)
【正文】 樹皮面積和 彼此之間互作關(guān)系影響。 不足之處 實驗中只考慮線蟲取食小喙長霉菌，沒有考慮線蟲取食松樹枝條活細胞的 實驗四研究松墨天牛對小喙長霉菌影響，實驗中在 6 個赤松枝條上均接種松墨天牛幼蟲和小喙長霉菌，但 未在赤松枝條上 單獨 接種小喙長霉菌作為對照。方差分析顯示接種天牛幼蟲后，天牛成蟲出現(xiàn)時間不受真菌、線蟲、樹皮面積和 天牛性別以及彼此之間互作關(guān)系的影響。 實驗二 在接種剛孵化的松墨天牛幼蟲的赤松枝條中存在天牛糞便，解剖發(fā)現(xiàn) 9 個活的天牛和 1 個死亡的天牛幼蟲，活天牛幼蟲平均體重為，頭殼寬 ，表明活天牛為三齡幼蟲，死亡天牛頭殼寬為 ，說明此為二齡幼蟲，解剖實驗發(fā)現(xiàn)在 10 個松樹枝條的韌皮部存和 5 個松樹枝條的部分木質(zhì)部存在真菌。 實驗四 研究松墨天牛對小喙長霉菌 影響， 6 個赤松枝條接種松墨天牛和小灰長霉菌， 24 天后，在接種位置上剝離樹皮，從松樹枝條上取下幼蟲和幼蟲糞便， 取整個松樹枝條 四分之一到二分之一的樹皮（包括天牛取食過的樹皮 ，不包括石蠟覆蓋的樹皮 ） 去除外 層樹皮，韌皮部切成 12cm 寬的小塊，使用手鉆在接種松墨天牛和小喙長霉菌的位置取韌皮部包括髓，松墨天牛糞便、韌皮部和木質(zhì)部放在聚乙烯袋子里，20℃下保存，兩天后 ，在真空狀態(tài)下凍干。方法和實驗一方法相同，培養(yǎng)條件 相同。兩個樹皮傷口最小距離平均為 ，兩個傷口接種后覆蓋原來的樹皮，用封口膜包起來， 即使不接種松墨天牛幼蟲，也挖一個小刻槽，實驗 4 中松樹枝條不用接種松材線蟲懸液或水，不會在樹皮上形成傾斜傷口。 灰葡萄孢在 10 mL 的大麥籽粒上培養(yǎng) 。 2022 年二月采伐 3 顆 12 年生的赤松用于實驗 2，胸徑分別為 、 和 ， 2022 年十月采伐一顆 12 年生的赤松用于實驗 4，其胸徑為 。 接種 18 天后，從松枝上剝離樹皮，從枝條上取幼蟲和幼蟲糞便，記錄韌皮部和木質(zhì)部上藍變面積確定小喙長霉的繁殖情況， 從縱向韌皮部上剝離四份之一到二分之一的樹皮，將樹皮外層剝離， 收集里面樹皮以獲得韌皮部樣品，再將里層樹皮的韌皮部剪切為 12mm 大小的樹皮塊，使用一把 15mm 寬的刀片，從接種松墨天牛幼苗和松材線蟲的地方包括髓取木質(zhì)部樣品，記錄木質(zhì)部樣品真菌繁殖情況，糞便、韌皮部和木質(zhì)部分別在 25℃下使用貝爾曼漏斗法分離 4872h，計算分離線蟲濃度，材料在 60℃下烘 512d，稱重， 線蟲密度表示每克材料干重中松材線蟲的數(shù)量。 實驗三 為研究松材線蟲種群和小喙長霉菌對松墨天牛生長發(fā)育的影響，在 四組黑松實驗材料上 按照實驗一中接種方法 接種松材線蟲、松墨天牛和小喙長霉菌三個物種的組合 。平均線蟲密度隨接種位置、松墨天牛幼蟲及真菌的有無而不同 ，在未接種真菌 的松樹枝條木質(zhì)部的松材線蟲密度小于其他接種位置的松材線蟲密度，小于接種真菌的松樹枝條。方差分析也表明天牛鞘翅長度受真菌和松材線蟲互作關(guān)系、真菌、松材線蟲和樹皮面積三者互作關(guān)系的影響，但是不受真菌、線蟲和樹皮面積的影響。 References Akbulut S, Linit MJ (1999) Flight performance of Monochamus carolinensis (Coleoptera: Cerambycidae) with respect to nematode phoresis and beetle characteristics. Environ Entomol 28:1014–1020. Arakawa Y, Togashi K (2022) Newly discovered transmission pathway of Bursaphelenchus xylophilus from males of the beetle Monochamus alternatus to Pinus densiflora trees via oviposition wounds. J Nematol 34:396–404 Carlile MJ, Watkinson SC, Gooday GW (2022) The fungi, 2nd edn. Academic Press, New York Dowding P (1970) Colonization of freshly bared pine sapwood surfaces by staining fungi. Trans Br Mycol Soc 55:399–412 Edwards OR, Linit MJ (1992) Transmission of Bursaphelenchus xylophilus through oviposition wounds of Monochamus carolinensis (Coleoptera: Cerambycidae). J Nematol
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